MANIPULACION DE GONADAS FEMENINAS, OBTENCION DE OVOCITOS Y

DESCRIPCION DE LA MORFOLOGIA DE LOS OVARIOS DE MAMIFEROS

INTRODUCCIÓN

Los ovocitos son células germinales femeninas que se generan en los ovarios. Se trata de una
fase del desarrollo del óvulo, cuando aún no ha madurado. El ovocito surge como parte del
proceso de gametogénesis que se desarrolla en las mujeres y en las hembras de los animales
(Hunter, 2000). Está rodeado por una capa extracelular transparente compuesta por una
matriz de glicoproteínas denominada zona pelúcida, que rodea el ooplasma del ovocito que
cuenta con su propia membrana celular ( Palma,2001)

La morfología del citoplasma y las células del cumulus son los primeros criterios para discriminar
entre ovocitos competentes o incompetentes para el desarrollo embrionario, la calidad de las
células que rodean el ovocito y la apariencia homogénea de citoplasma son los mejores
indicadores para determinar si el ovocito posee potencial para madurar y fecundar in vitro las
células del cumulus son subpoblaciones de células de la granulosa que aportan los nutrientes al
ovocito durante su crecimiento, participan en la formación de la zona pelúcida , y sintetizan la
matriz compuesta de ácido hilurónico y proteínas que juegan un papel importante en el
transporte del ovocito a través del oviducto y permiten atrapar al espermatozoide para la
fertilización, (Muñoz, 2005).

Por lo tanto los ovocitos se pueden clasificar según estos criterios, según las capas de células del
cumulus y la homogeneidad y apariencia del citoplasma, aunque las categorías de clasificación
varían en número según los autores con importancia científica y para controlar la calidad de la
producción y recolección de los ovocitos , existen clasificación de 2 ,3 y 4 categorías, las que he
valorado como más relevante, el tipo A corresponde a un ovocito corresponde a un ovocito con
células del cumulus con número de capas múltiples ( mayor a 4) y compactas, con citoplasma
homogéneo y transparente; el tipo B tiene capas múltiples del cumulus ( de 1 a 3) y un
citoplasma homogéneo con zonas periféricas oscuras; el tipo C se caracteriza por tener un
cumulus denudado y un citoplasma irregular con zonas oscuras; el tipo D tiene el cumulus con
células expandidas y un citoplasma irregular y con zonas oscuras , Aunque por otra parte un
ooplasma negro indica que el ovocito esta envejecido y tiene bajo el potencial para soportar el
desarrollo (Saacke,2003)

Otros estudios de cuatro categorías, por características morfológicas son a nivel ultraestructural
y por su capacidad de desarrollo en un sistema de maduración in vitro, en la categoría 1 y 2 los
orgánulos son distribuidos de manera uniforme. Mientras que en la 3 y 4 los orgánulos imitaban
las características de los ovocitos durante la maduración final, en la categoría 1 las células del
cumulus penetraban el córtex del ovocito o se encontraban superficiales al mismo, mientras que
en la categoría 4 en la mayoría no penetraba (Palma,2001)
MATERIALES Y METODOS

 Gonadas de mamíferos terrestre (Vaca)

 Bisturi
 Lamina y laminillas portaobjetos
 Microscopio

Procedimiento:

 Iniciamos con la diseccion de las gonadas de vaca

 Con ayuda de un gotero y una lamina portaobjeto obtener los gametos.
 Observar los ovocitos en el microscopio

RESULTADOS

COMENTARIO
El primer trabajo experimental sobre la embriología de mamíferos se llevo a cabo con
conejos, a la vista de sus características biológicas favorables, tales como el tamaño
relativamente grande del huevo, lo que facilita la manipulación, y la ovulación inducida
por el apareamiento. Estas nuevas condiciones de cultivo, aunque muy simple, permite
la expansión del desarrollo de técnicas para la producción de embriones in vitro.
Estudios in vitro sobre el desarrollo de gametos femeninos, buscan a acelerar los índices
eproductivos de los bovinos por lo tanto su productividad. En este trabajo de ovocitos
de vacas recuperados de ovarios de matadero, demuestra que se puede trabajar con
animales de alta producción láctea, buscando incrementar la cantidad de crías por
año/vientre, previa fertilización y trasferencia de embriones.

BIBLIOGRAFIA

 Hunter MG.2000. Oocyte maturation and ovum quality in pigs. Rev Reprod.
5:122-130.
 Muñoz VMA.2005. Fertilización in vitro en cerdos. Instituto Potosino de
Investigación Científica y Tecnológica, A.C. Posgrado en Biología Molecular.
Tesis para obtener el grado de Maestro en Ciencias. San Luis Potosí, SLP.
 Palma,G.A.2001. Transferencia de embriones y Biotecnología de la reproducción en la
especie bovina,54:185-213.
 Saacke RG.2003. Fertilidad del toro: una opinión sobre su estado actual y
perspectivas. Taurus, Bs. As;5(19):18-28.

MANIPULACIÓN DE GONADAS FEMENINAS, OBTENCIÓN DE OVOCITOS Y

DESCRIPCIÓN DE LA MORFOLOGIA DE LOS OVARIOS DE ERIZOS DE MAR

INTRODUCCIÓN
La especie con la que hemos trabajado es el Paracentrotus lividus “Erizo de mar”. Se
trata de un equinodermo de pequeño o medio tamaño que presenta simetría radial
(Miguez,1990)
Está previsto de un esqueleto de placas calizas debajo de la piel de las que, emergen
púas. Tiene un sistema especial de locomoción llamado sistema ambulacral que
consiste en un sistema de conductos por los que circula el agua y que conectan con
pequeñas vesículas que salen al exterior por los poros de las placas, constituyendo los
pies ambulacrales (Urgorri,1994)
El erizo de mar se alimenta principalmente de algas y su sistema digestivo se prolonga
del lado oral al aboral. En la boca presenta un órgano raspador llamado linterna de
Aristóteles formado por cinco dientes quitinosos con mandíbula, al que le sigue la
faringe, el esófago y el estómago tubular que desemboca en el intestino para terminar
en ano (Urgorri,1994)
Su reproducción es de tipo sexual, sin embargo no se puede distinguir a simple vista el
sexo. Cuando las gónadas de las hembras están maduras adquieren un color naranja
intenso y cuando los machos están preparados para desovar, la gónada adquiere un
color blanco. Los óvulos y el esperma son vertidos al agua de manera más o menos
sincronizada dejando los gametos a la suerte de un posible encuentro( Sewell,1999)

MATERIALES Y MÉTODOS
- 1 jeringa
- 5 especimenes de erizos de mar
- Kcl 0.5 M
- 1 vaso de precipitación
- Agua de mar
 - Lamina portaobjetos
- Laminilla cubreobejos
- Gotero
- Tijera

Procedimiento

Se sujeta a uno de los especimes de erizo de mar y se le inyecta un poco de Kcl 0.5M
mientras en un vaso de precipitación se coloca un poco de agua de mar. Luego al
espécimen se le coloca sobre el vaso de precipitación y se observa como se desprende
unos hilos color rosado los cuales son sus gonadas femeninas, luego se toma una
muestra y se observa en el microscopio.

RESULTADO

COMENTARIO
La parte comestible de los erizos de mar, como en todas las especies de erizos, son
sus gónadas. Por esta razón la variación anual de las gónadas es uno de los aspectos
más estudiados de su ciclo biológico. Su ciclo gonadal ha sido estudiado
ampliamente, tanto en el Atlántico como en el Mediterráneo.
La temperatura es un factor ambiental que afecta la duración del desarrollo
embrionario en el erizo de mar. Se acepta que la entrada del espermatozoide
provoca la activación del ovocito, que se expresa a nivel molecular y celular de
diferentes maneras
Respecto al papel de los factores ambientales en el control del ciclo gonadal, la falta
de estudios específicos es notable, siendo muy pocos autores los que tratan de
relacionar la variación del ciclo gonadal con las condiciones oceanográficas de la
zona de estudio.

BIBLIOGRAFIA

 Miguez Rodríguez (1990). Nuevas aportaciones sobre el rendimiento gonadal y las

relaciones biométricas de Paracentrotus lividus (Lamarck) en la ría de la Coruña.
Bentos VI. : 275-281.

 SEWELL MS. & YOUNG CM 1999.Temperature limits to fertilization and early

development in the tropical sea urchin Echinometra lucunter. J. Exp. Mar. Biol.
Ecol. 236:291-305

 Urgorri V, Reboreda P, Troncoso JS (1994). Dispersión, demografía y producción

gonadal de una población de Paracentrotus lividus (Lamarck, 1816). Memoria final
de resultados.