pHix
pHix
Buffer de Fosfatos Concentrado
Para usarse como un buffer salino en ensayos de Hemaglutinación para la
detección de anticuerpos o para Capture®.
No Contiene conservadores
No lo utilice si esta marcadamente
No existe estándar de potencia US
turbio
Immucor, Inc.
Norcross, GA 30071 USA
USO:
El Buffer de Fosfatos concentrado, se utiliza como un buffer
salino en los ensayos de hemaglutinación para la detección
de anticuerpos o para Capture.
RESUMEN DE LA PRUEBA:
Varios factores afectan la eficiencia con los anticuerpos
unidos a antígenos. Uno de estos factores es el pH del
medio de prueba. Se puede estimular la disociación de los
anticuerpos y sus antígenos haciendo a este medio, muy
ácido ó muy alcalino.
Barnes mostró que la unión del anti-D se disminuyó
significativamente cuando el pH del medio de prueba
estaba por debajo de 6.4 o por arriba de 8.4.1 En contraste,
otros investigadores han mostrado que los anticuerpos para
los antígenos M y P reaccionan mejor a un pH de 6.0 o 6.5.2,3
Bruce et al mostró que algunos ejemplos de anti-D, -S, -s, -
Fya y –Jka no reaccionan o lo hacen débilmente en pruebas
de detección de anticuerpos mediante hemaglutinación
que emplean salina con un pH de 6.5 o menos.4 Estos
autores sugieren que los ensayos de hemaglutinación para
la detección de anticuerpos utilizan salina a un pH de 7.0-
7.2.
Rolih et al5 mostraron que la salina acidificada altera los
resultados de los ensayos de adherencia eritrocitaria en
fase sólida. Las reacciones verdaderamente positivas
disminuyeron su fuerza y se presento un incremento
concomitante en los resultados falsos positivos. Estos autores
mostraron que tales resultados no solo se debían a una
disminución de la unión del anticuerpo sino también a la
pérdida de reactivo de membranas eritrocitarias unidas a la
superficie sólida. Los mejores resultados se obtuvieron en
sistemas de prueba de fase sólida en lo que se utilizó un
buffer salino a un pH de 7.0-7.5.
PRINCIPIO DE LA PRUEBA:
El pHix es una solución concentrada de sales disueltas
monopotásicas y dipotásicas. Un frasco (aproximadamente
200 mL) del concentrado se adiciona a 20 L de solución
salina isotónica no regulada para obtener un pH de 6.9-7.2.
La salina regulada así preparada esta lista para usarse en
pruebas serológicas como ensayos de hemaglutinación o
ensayos de adherencia eritrocitaria en fase sólida, donde
se requiere mantener un pH en el medio. El pHix se
recomienda para regular el pH de las salinas no reguladas
empleadas en los ensayos de adherencia eritrocitaria en
fase sólida Capture-R, Capture-P, Capture-CMV y Capture-
S.
REACTIVO: Frasco con 200 mL.
pHix: solución concentrada de sales monopotásicas y
dipotásicas de fosfatos disueltas. Almacene los frascos a
temperatura ambiente (18-30 °C). Almacenarlo en
refrigeración puede ocasionar la precipitación y
cristalización de las sales. El material que ha sido refrigerado
o muestra evidencia de cristalización se puede calentar de
35-40 °C para facilitar la solubilización.
Buffer de Fosfatos Concentrado
Para usarse como un buffer salino en ensayos de
Hemaglutinación para la detección de anticuerpos o para
Capture®.
El Buffer Concentrado de Fosfatos pHix debe ser una
solución clara e incolora con o sin cristales incoloros. No
utilice el pHix si muestra turbidez o si ha desarrollado algún
color. El cambio en la turbidez o color puede indicar
contaminación.
No existe un estándar de potencia U.S.
PRECAUCIONES:
Para uso de diagnóstico in-vitro.
No congelar. No se recomienda refrigerarse.
No contiene conservadores. Manéjelo con especial
cuidado para evitar contaminación microbiana. La
contaminación causará un efecto adverso en el
funcionamiento del producto durante su vida útil. No utilice
reactivos contaminados. No lo utilice si ha llegado a su
fecha de caducidad. No utilice frascos con fugas. No
utilice frascos sin etiquetar.
No le adicione agua destilada o desionizada. El agua
tratada con pHix no será isotónica, por lo tanto no se
puede utilizar en ensayos de hemaglutinación o de
adherencia eritrocitaria en fase sólida.
PREPARACIÓN Y RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA:
No se requiere de una preparación especial de las
muestras del paciente o donador. Recolecte las muestras
mediante métodos de rutina para obtener suero/plasma,
eritrocitos o plaquetas para pruebas de detección de
anticuerpos o antígenos. Consulte las instrucciones de uso
de la prueba de antígeno o de los reactivos para la
detección de anticuerpos empleadas para determinar las
restricciones de la toma de muestra.
PROCEDIMIENTO:
Reactivo Proporcionado: pHix frasco de 200 mL, listo para
utilizarse.
Materiales Adicionales Requeridos:
1. 20 litros de Solución Salina Isotónica no regulada
diseñada para uso en Bancos de Sangre.
2. Papel pH capaz de leer pH de 6.5 ó 7.5 o bien
potenciómetro calibrado para estándares altos en
sales.
3. Reactivos y muestras de pacientes y/o donador
requeridos para la detección de anticuerpos o
antígeno.
MÉTODO DE PREPARACIÓN:
1. Observe el Buffer para evidenciar cristalización. Si los
cristales están presentes en el frasco, caliente el
concentrado a 35-40 °C hasta que se hayan disueltos.
2. Adicione el contenido del frasco a 20 litros de salina no
regulada. Mezcle suavemente durante 1 minuto.
3. Cheque el pH de la salina. Después de la adición del
buffer se debe registrar un pH de 6.9 a 7.2. Si el pH es
 menor de 6.5 o mayor de 7.5 no utilice la salina
regulada.
4. La fecha de caducidad de la salina regulada es de 31
días a partir de la fecha de preparación o de la fecha
de caducidad designada por el fabricante de la
salina. Indicar en el frasco contenedor de la salina que
el contenido se ha regulado. Escriba el pH y la fecha
de caducidad en el contenedor de la salina. No la
utilice después de esta fecha.
5. La salina regulada esta ahora lista para utilizarse en
ensayos de hemaglutinación o de adherencia
eritrocitaria en fase sólida.
LIMITACIONES:
Pueden ocurrir resultados de prueba erróneos por
contaminación química o bacteriana de la salina regulada.
Es más, se pueden presentar errores si el procedimiento en
el cual se ha utilizado la salina regulada no se esta llevando
a cabo correctamente.
BIBLIOGRAFÍA:
1. Barnes AE. The specificity of pH and ionic stregth
effects on the kinetics of the Rh(D)-anti-Rh (D) systems.
J Immunol 1966;96:854-64.
2. Judd WJ. A pH dependent autoagglutinin with anti-P
specificity. Transfusion 1975;15:375-6.
3. Beattie KM, Zuelzer WW. The frecuency and properties
of pH dependent anti-M. Transfusion 1965;5:322-6.
4. Bruce M, Watt AH, Hare W et al. A serious source of
error in antiglobulin testing. Transfusion 1986;26:177-81.
5. Rolih S. Thomas R, Fisher R, Talbot J. Solid phase test
errors due to acidic or unbuffered salines.
Immunohematology, 1993;9:15-9.

La salina regulada con pHix no debe causar cambios en la

apariencia de los eritrocitos o plaquetas o causar lisis de
estos elementos celulares. La salina regulada que cause
cambios en suero/plasma o elementos celulares no se debe
de utilizar.

El pHix no esta hecho para adicionarse a agua destilada o

desionizada. El agua tratada con pHix causará hemólisis de
los elementos celulares debido a que no es isotónica. Esto
ocasionará resultados falsos positivos o negativos en
ensayos de hemaglutinación o en resultados de prueba en
fase sólida.

La salina regulada con pHix no se debe de utilizar para

preparar soluciones enzimáticas de ficina o papaína, ya
que estas proteasas requieren de un ambiente ácido para
una actividad óptima.

Los reactivos de grupo sanguíneo preparados en diluyentes

ácidos pueden producir reacciones inesperadas con
eritrocitos suspendidos en salina regulada a un pH de 6.9-
7.2. En particular, los reactivos anti-B monoclonales
preparados a partir de líneas celulares ES4 se puede
preparar en un diluyente con un pH de 6.0 para disminuir la
detección del antígeno B adquirido. La línea celular ES4 es
utilizada por varios fabricantes como su fuente de Anti-B
monoclonal. Cada fabricante ha formulado un diluyente
adecuado para diluir su anticuerpo. Es posible que la salina
regulada a un pH de 6.9-7.2, cuando se utiliza para
preparar suspensiones de eritrocitos, anule los efectos del
buffer ácido en los diluyentes fabricados y de este modo
cambian las características de la reacción del Anti-B. Revise
el instructivo de uso del fabricante para ver si el Anti-B
monoclonal del fabricante se puede usar con eritrocitos Fabricado en USA por: Immucor, Inc., 3130 Gateway Drive, Norcross, GA
suspendidos en salina regulada. 30071.

CARACTERÍSTICAS ESPECÍFICAS DE FUNCIONAMIENTO:

La habilidad del pHix para regular soluciones normales de
salina a un pH de 6.9-7.2 se ha demostrado en pruebas
internas. Los estudios comparativos de reactividad y
potencia llevados a cabo con anticuerpos seleccionados
al azar han demostrado que un pH neutral de
aproximadamente 7.0 es el adecuado para la detección
del anticuerpo. 4,5
Importado por: Laboratorios LICON, S.A.
Camino Antiguo a Santa Mónica No. 7, Col. Jardines de Santa Mónica,
Tlalnepantla, C.P. 54050, Estado de México, México (Domicilio Fiscal).
Acondicionado y Distribuido por: Laboratorios LICON, S.A.
Av. Industria Eléctrica de México No. 3, Col. Xocoyahualco, Tlalnepantla,
C.P. 54080, Estado de México, México.
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Rev.: 07/09/2015 - IN-270