Professional Documents
Culture Documents
INFORME Nº 2
PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO
CÁTEDRA: MICROBIOLOGÍA
CATEDRATICOS: Mg. SANCHEZ ARAUJO, VICTOR GUILLERMO
Ing. CASTAÑEDA DUEÑAS, JULIO CESAR
V CICLO - AULA UNICA
INTEGRANTES DE GRUPO:
CONDOR GASPAR, JUAN CARLOS
DE LA CRUZ VELÁSQUEZ, SENDY GIMENA
GUARDIA CURASMA, LEONEL HANS
PAYTAN TAIPE, BETSY DIANA
PAREDES CCENTE, DAYSI CATALINA
TAIPE CRISPIN, EDERZON
TITO TAIPE, MICHAEL
HUANCAVELICA – PERU
2019
A nuestros padres que nos han dado la existencia y en ella
la capacidad por superarnos y desear lo mejor en cada paso
por este camino difícil y arduo de la vida. Gracias por ser
como son, porque su presencia y persona han ayudado a
construir y forjar las personas que ahora somos.
DESARROLLO DE LA:
PRACTICA Nº 2
I. INTRODUCCION
Los medios de cultivo son fuentes nutritivas naturales o sintéticas que se asemejan al nicho
ecológico de los microorganismos en el cual se desarrolla. Estas necesidades nutricionales se han
determinado mediante extensas investigaciones.
De acuerdo a su función o aplicación se tiene los siguientes medios:
Medios de aislamiento no selectivo se utiliza para aislar bacterias donde se pueden
desarrollar la mayoría de ellas, ya que no presentan inhibidores. Tenemos al agar nutritivo.
Medos de aislamiento selectivo: estos medios además de llevar el medio base presentan
un sustrato más indicador y en algunos casos inhibidores que pueden colorantes, sales,
antibacterianos como antibióticos. Se clasifica en poco, medianos y altamente selectivos.
Medios de aislamiento especifico son generalmente altamente enriquecidos. Además, en
estos medios los inhibidores tienen relativa importancia, pues su especificad está en
función de su riqueza.
Medios diferenciales, son medios que llevan un medio corriente, al que se le ha agregado
un sustrato conocido y un indicador de pH. En ellos se estudian la acción de enzimas
bacterianas.
Todos los medios deberán ser preparados de acuerdo a las especificaciones dadas por los
fabricantes, así existen medios que requieren esterilización otros se preparan por ebullición y otros
por filtración.
II. OBEJTIVOS
Conocer el procedimiento de preparación de un medio simple o común, y un medio selectivo.
Conocer las formas de esterilización usado más frecuentemente en microbiología.
Los microorganismos son los seres más abundantes de la tierra, pueden vivir en condiciones extremas
de pH, temperatura y tensión de oxígeno, colonizando una amplia diversidad de nichos ecológicos.
Para permitir el crecimiento de microorganismos en el laboratorio, es necesario aportarles un medio
con nutrientes y condiciones
fisicoquímicas adecuadas para su
desarrollo. “El medio de cultivo es aquel
que contiene agua y una serie de
nutrientes, necesarios para su
metabolismo” (Barrero, 2016)
Medios de cultivo, un medio de cultivo es
un sustrato o una solución de nutrientes
que permite el desarrollo de
microorganismos como las bacterias.
Las bacterias son microorganismos
unicelulares que se reproducen por fisión
binaria, conocida también como
bipartición (María & Paula Z., 2005)
Existen dos tipos de bacterias, las Gram
positivas y las Gram negativas.
En microbiología, se denominan
bacterias Gram positivas a aquellas
bacterias que se tiñen de azul oscuro o
violeta por la tinción de Gram: de aquí el
nombre de "Gram-positivas"
En microbiología, se denominan
bacterias Gram negativas a aquellas
bacterias que no se tiñen de azul oscuro
o violeta por la tinción de Gram, y lo hacen de un color rosado tenue: de ahí el nombre de "Gram-
negativas".
El medio de cultivo requiere una esterilización, inmediatamente después de su preparación, para
eliminar los microorganismos contaminantes; esto se hace normalmente por calor húmedo a menos
que en su composición, el medio contenga sustancias termolábiles (María & Paula Z., 2005)
UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA
c. SEMISÓLIDOS: Son aquellos que contienen una proporción de agar inferior al 0,5%. Se
utilizan para pruebas bioquímicas y de movilidad.
Según su utilidad:
a. NUTRITIVOS. Permiten el crecimiento de la mayoría de los microorganismos, por ser muy
generales. Como ejemplo de este tipo de medios están el agua de peptona y el caldo de
tripticasa-soja.
El agar es una sustancia inerte polisacárida (hidrato de carbono) que se extrae de las algas. Como
esta sustancia no es digerida por las bacterias no constituye ningún elemento nutritivo. Este
conjunto convenientemente esterilizado puede ser vertido en placas de Petri o en tubos de ensayo
y presentan la posibilidad de aislar y diferenciar bacterias, "procesos que antes no eran posibles
en medio líquido".
Existen diferentes tipos de “Agar” entre ellas la que hemos usado:
AGAR NUTRIENT.
Medio sólido que se prepara añadiendo agar a un caldo nutritivo. Existen diversas clases de agar
nutritivo comercializadas: agar infusión de cerebro y corazón (agar BHI), agar triptona de soja
(TSA), agar brucela, agar Columbia.
UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA
IV. MATERIALES
MATERIALES E INSTRUMENTOS
Impiden la transmisión
de microorganismos potencialme
nte patógenos, al evitar el
GUANTES A contacto entre la superficie
GRANEL biológica del usuario y el medio
al que está expuesto actuando
como barreras físicas
artificiales.
UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA
EQUIPOS
Una autoclave es un
recipiente de presión
metálico de paredes
gruesas con un cierre
hermético que permite
AUTOCLAVE trabajar a alta presión para
realizar una reacción
industrial, una cocción o
una esterilización con
vapor de agua a 100ºC.
REACTIVO
En esta práctica que se realizó se utilizó como referencia el agar nutritivo lo cual es un medio
de cultivo usado normalmente como rutina para todo tipo de bacteria. Es muy útil porque
permanece sólido incluso a relativamente altas temperaturas. Además, el crecimiento
bacteriano en este agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen mejor las colonias
pequeñas.
0,5% de peptona;
0,3% de extracto de carne/extracto de levadura;
1,5% de agar;
0,5% de cloruro de sodio;
agua destilada;
pH casi neutro (6,8) a 25 °C.
El caldo nutritivo se hace exactamente igual, excepto por la omisión del agar.
UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA
El agar nutritivo es
un medio de
cultivo usado
normalmente como rutina
para
AGAR todo tipo de bacteria. Es
NUTRITIVO muy útil porque
permanece sólido incluso
a relativamente altas
temperaturas. Además, el
crecimiento bacteriano en
este agar lo hace en la
superficie, por lo que se
distinguen mejor
las colonias pequeñas.
UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA
V. PROCEDIMIENTOS
1000mL − − − − − 28g
200mL − − − − − Xg
X = 5,6g
Disolveremos en el matraz de
Erlenmeyer echando la sustancia
agar nutrimento con ayuda de una
espátula de laboratorio.
EBULLICION
Se estuvo removiendo
constantemente para que el calor
se homogenice en el mataraz con
una franela para que no nos
pueda quemar el guante de látex
para esto se requiere bastante
cuidado y precaución.
Se lleva a la autoclave
es necesario identificar
porque hay muestras
también de otro grupo y
para no confundirnos.
UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA
Luego se lleva a la
incubadora
bacteriológica.
VI. RESULTADOS
Se disponía de un agar nutritivo para la practica el cual se realizó los cálculos respectivos
tanto gravimétrico y volumétrico.
Se hizo correctamente la ebullición del agar en el matraz de Erlenmeyer con la estufa
eléctrica.
Se logró preparar el agar nutritivo y se movió homogéneamente cada 10segundos para que
se homogenice el calor.
Una vez logrado una ebullición y calor concentrado en el matraz con el agar nutritivo se
procedió a amarrarle en la boquilla el algodón y papel kraft enrollándolo con pabilo.
Y posteriormente se rotulo en el matraz el nombre de grupo para llevarlo a la autoclave.
Y después de dos días y 16 horas se retornó a ser una serie de pasos más y después de
eso se retornó después de dos días con 16horas y 40 minutos aproximadamente al
laboratorio donde se obtuvo a ver el medio de cultivo donde que ya salían algunas
protuberancias de microorganismos ya se podían visualizar.
DESARROLLO DE LA ACTIVIDAD
SE AVERIGUA QUE:
Bipartición
UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA
Reproducción parasexual
Transformación
Transducción
Cuando una célula es atacada por un virus bacteriófago, la bacteria genera nuevas copias
del ADN vírico. En la fase de ensamblaje se pueden introducir fragmentos de ADN
bacteriano en la cápsida del virus. Los nuevos virus ensamblados infectarán nuevas
células. Mediante este mecanismo, una célula podrá recibir ADN de otra bacteria e
incorporar nueva información.
Conjugación
Este método de siembra se realiza sobre la superficie de los medios de cultivo sólidos
distribuidos en placas de "Petri" o en tubos de ensayo solidificados en forma de cuña.
Con éste procedimiento se puede conseguir una buena separación de las colonias y
aislarlas fácilmente. Para ello se funde el medio de cultivo, se vuelca en caja de Petri y se
deja solidificar. Con el asa previamente esterilizada se toma material de un cultivo
heterogéneo y se descarga sobre la superficie del medio formando estrías.
UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA
Se toma el tubo de ensayo con medio líquido, como el caldo simple. Se toma el material
adiluir y se siembra en el tubo con el uso del asa cargada con el material
bacteriológico, seagita, con movimientos moderados. La finalidad poner a la bacteria en
suspensión.
El TSI (Triple Sugar Iron) es un medio que contiene glucosa, sacarosa y lactosa, hierro y
un indicador que es el rojo fenol. En este medio se siembra por picadura y estrías en
superficie. A lo largo del canal se desarrollan los microorganismos, y según lo hagan en
la parte superior o inferior del tubo, estarán indicando su comportamiento frente a los
azucares.
No todos los microorganismos toleran del mismo modo, un determinado factor ambiental, esto
provoca que algunas condiciones sean nocivas ara una especie bacteriana y neutras o
beneficiosas para otras. Los principales tipos de factores:
AGENTES FISICOS.
· Temperatura.
· Desecación (Aw).
· Radiaciones.
· Ondas sonoras.
· Presión hidrostática.
· Presión osmótica.
AGENTES QUÍMICOS
· Desinfectantes y antisépticos.
· Quimioterapéuticos.
· Antibióticos.
Presencia de substancias antimicrobianas naturales
UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA
VIII. CONCLUSIONES
Los medios de cultivo son uno de los métodos más usados para el análisis de
microorganismos con múltiples propósitos, como el de multiplicación, identificación, entre
otros.
Se logró conocer los diferentes medios de cultivos para sembrar microorganismos.
Se aprendió los pasos para elaborar un medio de cultivo, sus cálculos respectivos de las
cantidades necesarias para su preparación.
Al realizar una siembra de microorganismos, debemos tener en cuenta que técnica se va a
utilizar, debido a que estas varían respecto a las características del microorganismo a tratar.
También debe tenerse en cuenta la forma, espacio y el objetivo al que se quiere llegar, pues
dependiendo de esto la técnica de siembra es diferente.
Un microorganismo se puede sembrar en un medio líquido o en la superficie de un medio
sólido de agar.
Un cultivo de bacterias o de hongos es con el fin de aislarlas en el medio para lograr un mejor
estudio de ellos.
UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA
Geo, B., Karen, C. C., & Janet, S. B. (2011). Microbiologia Clinica. Mexico: MC Graw Hill.
María, C. A., & Paula Z., A. (2005). Microbiologia del Agua. SOLAR SAFE WATER , 18.
X. ANEXOS
Esperando en el laboratorio
Agar nutritivo