Análisis instrumental

RESUMEN

El objetivo es determinar la concentración de sulfato de cobre por

espectrofotometría, la espectrofotometría es una técnica analítica que permiten
determinar la concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las
moléculas absorben las radiaciones electromagnéticas y a su vez que la cantidad de
luz absorbida depende de forma lineal de la concentración. Para hacer este tipo de
medidas se emplea un espectrofotómetro, en el que se puede seleccionar la longitud
de onda de la luz que pasa por una solución y medir la cantidad de luz absorbida por
la misma.

En esta práctica se darán a conocer las características generales y conceptos

relacionados con la espectrofotometría. A continuación y tras la explicación del
funcionamiento del espectrofotómetro se harán espectros de absorción con una
longitud de onda de 640 nm donde la concentración de 40000 mg/L presenta la
máxima absorción de 0.326, y la absorción mínima es de 0.060 de la concentración
de 10000 mg/L utilizando un volumen de 2.5 ml y en las muestras problemas de
diferentes concentraciones la absorbancia máxima es de 0.209 y la mínima de 0.087;
las curvas de calibración están en un nivel de confianza entre 95 a 99 % , las
concentraciones y absorbancias varían de acuerdo al volumen utilizado. Este
método es utilizado para determinar la concentraciones de contaminantes y
biomoléculas presentes en bebidas y alimentos.

Introducción

El presente reporte contiene los resultados obtenidos de las cuatro concentraciones

de sulfato de cobre utilizando el análisis espectrofotométrico, este análisis es una de
las técnicas más utilizadas para detección específica de moléculas, se caracteriza por
su precisión, sensibilidad y aplicabilidad a moléculas de distinta naturaleza.

El análisis se hace con la finalidad de conocer la absorbancia de cada concentración,

utilizando el equipo de espectrofotómetro, como también la curva patrón de las
absorbancias para verificar la ley de Lambert-Beer, calcular el coeficiente ∈ y
determinar la concentración de una muestra de sulfato cúprico de las
concentraciones para así determinar la curva de calibración.

Materiales

 Matraces aforados de 100ml

 Vasos de precipitado de 100ml, 50ml, 20ml
 Un vaso de precipitado de 500ml
 Lavador (pizeta)
 Pipetas de vidrio
 Frasco
  Tubos de baquelita

Reactivos

 Solución de sulfato de cobre de 40000mg /L (ppm) (40r)/L

Equipo

 Espectrofotómetro
 UUV- visible (rango 195 a 1000nm)

MÉTODOS

C11 = C2V2

PROCEDIMIENTO

Primeramente el profesor hiso la solución de sulfato de cobre (CUSO4), con una

concentración de 40000 mg/l (ppm), para partir de esta concentración se obtuvo 3
soluciones de: 10000, 20000, 3000 (ppm).

Para esta concentración de 40000 (ppm) se trabajó con una regla de 3 simple para
ver con cuanta de solución se va a trabajar y cuanto de agua se va a añadir,
aplicándola regla de 3 simple en los 40000 (ppm), se obtuvo 10gr de sulfato de cobre
en 250 mg en agua destilada.

Para las soluciones de 30000, 20000 y 10000 (ppm), se aplicó la siguiente formula:
C1V1 = C2V2. Después se obtuvo resultados de cada solución para saber cuánto de
agua destilada se va a añadir a cada solución hasta llegar a los 10ml en la probeta.

A partir de cada muestra en las probetas se llevado a un espectrofotómetro para

calcular la absorbancia de cada muestra, primeramente se colocó una cubeta ¾ de
agua destilada para blanquear y recién agregar ¾ de cada concentración. Las
absorbancias y las concentraciones se realizó mediante el programa exel para
encontrar la curva patrón.

Se añadió en 2 tubos de baquelita dos soluciones “X” de sulfato de cobre y luego se

agito para llevar al espectrofotómetro y hallar la absorbancia de estos 2 problemas.
Los resultados obtenidos se reemplaza en la curva patrón para hallar “Y” y así saber
cuánto es la concentración de la sustancia.
 Resultados y discusiones

N° Concentración Concen 1 2 3 4 5 6 7
mg/L tración Abs Abs Abs Abs Abs Abs Abs
utilizad
a
1 40000 10 0.326 0.326 0.326 0.326 0.326 0.326 0.326
2 30000 7.5 0.236 0.233 0.222 0.207 0.206 0.215 0.224
3 20000 5 0.157 0.153 0.141 0.143 0.134 0.153 0.145
4 10000 2.5 0.079 0.074 0.064 0.073 0.060 0.072 0.074
5 Problema 1 0.209 0.119 0.134 0.114 0.114 0.200 0.086
6 Problema 2 0.093 0.129 0.150 0.147 0.088 0.087 0.107
7 Curva de Y=8e-
calibración 06x-
0.0125
R2=0.998
4

Cuestionario

Que es la curva de calibración. ¿Cuál es su aplicación?

Que es la curva de calibración

(Skoog, 2001) menciona que la curva de calibración es un método empleado para

medir la concentración de una sustancia en una muestra por comparación con una
serie de elementos de concentración conocida. Se basa en la existencia de una
relación en principio lineal entre un carácter medible (por ejemplo la absorbancia
en los enfoques de espectrofotometría) y la variable a determinar (la
concentración). Para ello, se efectúan diluciones de unas muestras de contenido
conocido y se produce su lectura y el consiguiente establecimiento de una función
matemática que relacione ambas; después, se lee el mismo carácter en la muestra
problema y, mediante la sustitución de la variable independiente de esa función, se
obtiene la concentración de esta. Se dice pues que la respuesta de la muestra puede
cuantificarse y, empleando la curva de calibración, se puede interpolar el dato de la
muestra problema hasta encontrar la concentración del analito. Las curvas de
calibración suelen poseer al menos una fase de respuesta lineal sobre la que se
realiza un test estadístico de regresión para evaluar su bondad.

Revise y anote metodología de análisis por espectrofotometría para

diferentes muestras. Anote 10 e indique la fuente bibliográfica.

DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE MnO4

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.
Obtención del espectro de absorbancia.
A. Con una pipeta graduada, tomar 1 mL de la disolución 0,1M de KMnO4 y verterlo
en un vaso de precipitado de 100 mL. Añadir poco a poco, y agitando
cuidadosamente, agua destilada hasta que la disolución resultante presente un color
similar al de la muestra problema.
B. Con la disolución preparada se obtendrá el espectro de absorción como sigue:
- Debido al color púrpura de la disolución de MnO4
-, podemos predecir la zona del espectro en la que se obtendrá la máxima
absorbancia. Después de poner a punto el espectrofotómetro, con la ayuda del
profesor, seleccionar una longitud de onda 20 nm por debajo del límite inferior del
intervalo correspondiente.
- "Hacer el blanco" para dicha longitud de onda. Es decir, toma una de las cubetas y,
tras llenarla con agua destilada (es el blanco para este caso particular), sitúala en el
portacubetas del espectrofotómetro y ajusta la lectura al cero de Absorbancia.
- A continuación llena la otra cubeta con la disolución previamente preparada,
sitúala en el portacubetas y espera unos segundos hasta que la lectura de
absorbancia se estabilice. Anota el valor de absorbancia obtenido para esta longitud
de onda.
- Selecciona en el espectrofotómetro una longitud de onda 10 nm superior a la
anterior y repite el proceso anteriormente descrito.
- Repite de nuevo todo el proceso hasta alcanzar una longitud de onda 20 nm por
encima del límite superior del intervalo de longitudes de onda correspondiente al
espectro de absorción delMnO4
C. Sobre un papel milimetrado representa el espectro de absorción del KMnO4 en la
forma A vs. ƛ.
Selecciona la longitud de onda correspondiente al máximo de absorbancia. Dicha
longitud de onda será la utilizada en el análisis cuantitativo del MnO4
Preparación de la recta de calibrado

A. En un matraz aforado de 100 ml, preparar una disolución de KMnO4 0,01 M. Para
ello, toma una cantidad de la disolución de KMnO4 0,1M en un vaso de precipitado
y pipetea el volumen necesario. Viértelo en el matraz aforado de 100 ml y enrasa
hasta la marca con agua destilada.
B. A partir de esta disolución de KMnO4 0,01M, prepara, utilizando los matraces
aforados de 25 ml, y siguiendo el mismo procedimiento experimental, tres
disoluciones patrón de KMnO4 de concentraciones 2 x 10-5 M, 6 x 10-5 M y 1 x 10-
4 M.
Medición de los patrones y obtención de la curva de calibrado
A. Siguiendo el procedimiento ya conocido, medir la absorbancia de cada una de las
disoluciones patrón a la longitud de onda seleccionada. Recordar que antes de la
medición de cada patrón debe hacerse el blanco.
La medición de la absorbancia de los tres patrones debe realizarse en orden
creciente de concentraciones y utilizando una misma cubeta. Para ello, después de
cada medida:
- Desechar la disolución patrón ya medida
- Limpiar la cubeta con agua destilada varias veces
- Limpiar la cubeta con la nueva disolución patrón una vez
- Llenar la cubeta con la nueva disolución patrón y medir
B. Con las absorbancias anotadas para cada una de las disoluciones patrón,
representar gráficamente, en un papel milimetrado, la curva de calibrado en la
forma: A vs. c
C. Mediante un ajuste de regresión por mínimos cuadrados, calcular la ecuación de
la recta obtenida.
Medición de la muestra problema
A. Siguiendo el procedimiento conocido, medir la absorbancia de la muestra
problema.
B. Calcular la concentración de dicha muestra mediante dos métodos:
- Gráficamente, mediante interpolación del valor de absorbancia obtenido
- Matemáticamente, mediante la utilización de la ecuación de la recta de calibrado
RESULTADOS EXPERIMENTALES
- Longitud de onda seleccionada: nm
- Ecuación de la recta de calibrado:
- Concentración de MnO4
- en la muestra problema:
a. Gráficamente: M
b. Matemáticamente: M

ESPECTRO DE ABSORCIÓN DE UN COLORANTE Y DETERMINACIÓN DE

CONCENTRACIONES

La práctica que vamos a hacer consiste en la determinación de una concentración

desconocida de un colorante alimentario en una muestra problema. Para ello
realizaremos los siguientes experimentos:

· Mediremos el espectro de absorción de una disolución que contiene el colorante E-

124 y localizaremos su máximo de absorción.

· Nos situaremos en dicho máximo y mediremos la absorbancia de 4 disoluciones de

concentración conocida de colorante preparadas por nosotros. Esto
nosproporcionará una recta de calibrado.

· Mediremos la absorbancia de la muestra problema y determinaremos su

concentración a partir de la recta de calibrado.

Procedimiento

1. Preparación de 4 disoluciones patrón de colorante E-124 a partir de una

disolución concentrada del colorante (concentración 0,15 g/l de colorante rojo E
124) que se proporciona ya preparada. En la preparación de las disoluciones patrón
se utilizarán:
· Pipetas y matraces aforados y la balanza de precisión.

· una disolución tampón de MES previamente preparada. El MES es una solución de

un ácido orgánico (ácido 2-morfolino etanosulfónico) 50 mM neutralizado con
NaOH hasta pH=6,5. El tampón garantiza que el pH se mantiene en torno a 6,5.

Cada pareja utilizará la disolución concentrada para preparar las siguientes 4

disoluciones más diluidas que serán las que se midan en el espectrofotómetro:

Disolución 1: diluir 1 ml de la disolución concentrada con 5 ml de tampón y enrasar

con agua en un matraz aforado de 25 ml.

Disolución 2: idem, 2 ml de disolución concentrada.

Disolución 3: idem, 3 ml de disolución concentrada.

Disolución 4: idem, 5 ml de disolución concentrada.

2. Calcular la molaridad de todas las disoluciones, incluida la concentrada. Usar los

datos que se facilitan en el anexo.

3. Medir el espectro de absorción del colorante de 325 a 685 nm sobre la disolución

4: Tras realizar el blanco, se introduce una cubeta con la disolución 4 (la más
concentrada) y se mide la absorbancia en el intervalo de longitudes de onda fijado
tomando valores cada 20 nm. Se repite la operación de manera más fina en la región
donde se haya observado una mayor absorbancia, esta vez tomando valores cada 10
nm. Establecer, a partir de esta medida, dónde se encuentra el máximo de absorción
del colorante. Anotar el valor de absorbancia para esa longitud de onda de la
Disolución 4.

4. Repetir la medida, a la misma longitud de onda (máximo de absorción del

colorante) para las disoluciones 3, 2, 1 y para una mezcla problema de concentración
desconocida.

Anotar los correspondientes valores de absorbancia frente a concentración para

hacer una recta de calibrado.

5. Proceder a realizar el análisis de datos:

5.1 Representar gráficamente el espectro de absorción del colorante (absorbancia
frente a longitud de onda).

5.2 Representar la absorbancia en el máximo de las Disoluciones 1-4 frente a la

molaridad y ajustar los 4 puntos a una recta por el método de mínimos cuadrados.
A partir de la regresión lineal obtenida, determinar:

a) El coeficiente de asertividad molar k del colorante E-124 a la longitud de onda

escogida.

b) La concentración de la muestra problema.

DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNA

(GILBERT, H y AYRES. 1970) menciona que existen diversos métodos que permiten
cuantificar la concentración de proteína presente en las muestras biológicas,
basados en las propiedades que muestran las proteínas en solución.

ABSORCIÓN EN EL UTRAVIOLETA

Las proteínas poseen una banda de absorción a 280 nm como consecuencia de la

absorción de los residuos de tirosilo y triptofanilo en esta región del espectro.

· Es un método no destructivo.

· El rango de concentración que se puede determinar depende del contenido de los

aminoácidos Tyr y Trp, y oscila entre 0,05 y 2 mg/ml.

· La presencia de sustancias absorbentes a 280 nm conduce a interferencias.

 MÉTODO DE BIURET

El nombre de la reacción procede del compuesto coloreado formado por la

condensación de dos moléculas de urea con eliminación de amoníaco.

REACCIÓN DEL BIURET

Si una solución fuertemente alcalina de sulfato cúprico (CuSO4) se añade a una

solución de proteína se forma una complejo entre el ion cúprico y los enlaces
peptídicos, con aparición de una coloración violeta-púrpura, que presenta un
máximo de absorción a 540 nm.
Las características más importantes de la reacción son:

 La reacción del Biuret se aplica, a partir de los tetrapéptidos, a todos los

péptidos y proteínas.
 Su rango de determinación es de 1 a 6 mg/ml.
 No depende de la composición de aminoácidos.
 Algunos compuestos (NH4+, Tris, etc.) dan la reacción.

MÉTODO DE LOWRY

Para aumentar la sensibilidad de la reacción del biuret, el complejo proteína-Cu2+

se hace reaccionar con el reactivo de Folin-Ciocalteu, dando una coloración azul, con
un máximo de absorción a 650 nm. Esta coloración se atribuye a la reducción del
ácido fosfomolíbdico/fosfotúngstico a azul de heteropolimolibdeno de composición
no definida, por medio de los residuos tirosilos, triptofanilos, y en menor grado,
cisteinilos e histidilos de las proteínas que forman el complejo con el Cu2+.

Las características del método son:

 La intensidad de la coloración varía con la composición de aminoácidos de la

proteína.
 Es más sensible que el ensayo del biuret. El rango es de 0,1-1 mg/ml.
 La modificación de Hartree incrementa la sensibilidad de 0,015-0,15 mg/ml.
 Presenta muchas interferencias.
 MÉTODO DE BRADFORD
 Consiste en la formación de un compuesto de adsorción de coloración
azul entre los residuos de aminoácidos básicos de las proteínas y el
colorante Azul Coomassie.
 Absorbe luz a 595 nm.
 El rango de determinación de proteína es de 1-10 mg/ml (ensayo micro)
y de 0,5 -1,4 mg/ml (ensayo estándar).
 La intensidad de absorción depende del contenido de aminoácidos
básicos y aromáticos.

ANALIZAR LA COMPOSICIÓN DE UNA DISOLUCIÓN QUE CONTIENE UNA

MEZCLA DEL INDICADOR AZUL DE BROMOTIMOL EN SU FORMA
MOLECULAR HA (ÁCIDA) Y DISOCIADA A- (BÁSICA)

(MIÑONES, 1978) muestra el siguiente método espectrofotométrico.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

a) Preparación de disoluciones de la forma ácida del Azul de Bromotimol:

Tomando como base una disolución de partida, facilitada por el profesor, de Azul
de Bromotimol 5.00.10-5 M en medio ácido (HCl), prepárense por dilución las
siguientes disoluciones: { Disolución A: En un matraz de 10 mL pipetear 8 mL de
disolución de partida y enrasar con diluyente ácido (HCl). Disolución B: En un
matraz de 10 mL pipetear 6 mL de disolución de partida y enrasar con diluyente
ácido. Disolución C: En un matraz de 10 mL pipetear 4 mL de disolución de
partida y enrasar con diluyente ácido. Disolución D: En un matraz de 10 mL
pipetear 2 mL de disolución de partida y enrasar con diluyente ácido. Nota: El
pKa del azul de bromotimol es 7.30, al encontrarse en medio ácido no hay duda
 de que el indicador se encuentra totalmente bajo su forma ácida: HA l A - + H +
(pKa=7.30) b) Preparación de disoluciones de la forma básica del Azul de
Bromotimol: Tomando ahora como base una disolución de partida, facilitada por
el profesor, de Azul de Bromotimol 5.00.10-5 M en medio básico (NaOH 10-2M),
prepárense por dilución las mismas disoluciones que en el apartado anterior
pero ahora enrasando con diluyente básico (NaOH).

Nota: Como el pKa del indicador es 7.30 no hay duda de que éste se encuentra
totalmente bajo su forma básica en NaOH 10-2 M . c) Obtención de los espectros
de la forma ácida y básica del indicador: Para ello vamos a utilizar las
disoluciones “A” respectivas preparadas anteriormente. En cada caso,
llenaremos una cubeta con la referencia adecuada y otra con la muestra a medir.
A continuación, iremos midiendo el valor de la absorbancia de la muestra a
distintas longitudes de onda entre 400 y 680 nm, haciendo las medidas a
intervalos de 10 nm. Es importante tener en cuenta que, cada vez que se
modifique el valor de la longitud de onda, hay que ajustar de nuevo el cero de
absorbancia con la referencia. Finalmente, se representan los datos en papel
milimetrado, de manera que figure la absorbancia “A” en ordenadas frente a
longitud de onda “l” en abcisas:

d) Obtención de las rectas de calibrado para las formas ácida y básica del Azul de
Bromotimol: A la vista de los espectros de absorción de la forma ácida y básica del
indicador, se apreciará un máximo para la forma básica en torno a 620 nm y un
máximo para la forma ácida alrededor de 440 nm. Elegidos estos valores de longitud
de onda como los mas idóneos, se mide la absorbancia de cada una de las
disoluciones preparadas en el apartado a) (disoluciones de la A a la D), ajustando
previamente el cero de absorbancia a cada longitud de onda con la referencia
adecuada.
DETERMINACIONES ESPECTROFOTOMETRICAS EN ALIMENTOS.
CAROTENOIDES TOTALES Y NITRITOS.
(Universidad Central de Venezuela, 2010). Da a conocer la siguiente
determinación espectrofotométrica
. PROCEDIMIENTO:
1. Curva patrón: Tomar 5 tubos de ensayo y enumerar del 1 al 5. Colocar
en cada uno de ellos las cantidades de reactivos que se especifican a
continuación:

Agitar con cuidado los tubos y determinar la absorbancia de cada solución a

la longitud de onda máxima. Construir la curva de calibración trazando un
gráfico de la absorbancia correspondiente contra la concentración de
betacaroteno contenida en cada una de las soluciones patrón.

2. Determinación del contenido de carotenoides totales en el alimento:

1. Pesar aproximadamente 1g de muestra fresca de zanahoria previamente
pelada y cortada en trozos pequeños.
2. Homogenizar en una licuadora con 60 ml de acetona por unos 3 minutos.
3. Decantar y agregar más acetona para realizar una extracción. Repetir el
proceso hasta extraer completamente los pigmentos.
4. 3 Filtrar y lavar el residuo que queda en el papel de filtro con unos 20-30
ml de acetona.
5. Concentrar en campana con un baño de María (o en plancha eléctrica)
hasta pequeño volumen.
6. Agregar 60 ml de éter de petróleo.
7. A la solución etérea que contiene los carotenoides agregar una pequeña
cantidad de Na2SO4 anhidro. Dejar la solución con el agente desecante unos
15 minutos, agitar ocasionalmente.
8. Transferir cuantitativamente la solución etérea a un matraz aforado de 100
ml y llevar a volumen con éter de petróleo.
9. Tomar con una pipeta 2 ml de esta solución ( o un volumen que pueda
medirse la intensidad de color) y transferir a un tubo.
10. Agregar 8 ml de éter de petróleo y medir la absorbancia a la longitud de
onda de máxima absorción encontrada previamente.
D. Cálculos:
1. Determinar por medio de la curva estándar la cantidad de carotenoides
totales presentes en la muestra. Expresarlos como mg de beta-
carotenos/100 g de muestra.
2. Calcular la cantidad de carotenoides totales expresados como beta-
caroteno utilizando la constante %1 E1cm.
3. Comparar ambos resultados.

DETERMINACIÓN DE CALCIO Y MAGNESIO EN UN LÁCTEO, LECHE

ENTERA PARMALAT
METODOLOGÌA
(FISCHER y PETERS, 1971) da a conocer el siguiente procedimiento de la
determinación de calcio y magnesio en un lácteo
Procedimiento
En la práctica se desarrollaron dos partes: la elaboración de las curvas de
calibración y la medición de la muestra. Antes de realizar la medición en el
espectrómetro Perkin Elmer, es necesario ejecutar el adecuado calibrado del
instrumento, colocar la lámpara de cátodo hueco correspondiente al
elemento a determinar; ajustarla teniendo en cuenta que el rayo debe pasar
a una distancia media dentro de la llama, para una buena determinación;
acomodar la longitud de onda para el Ca fue 422.7nm y para el Mg 285.2nm,
también el slip que en ambos casos fue -7, la ganancia y la corriente que debe
pasar a la lámpara (este valor es propio de cada fuente y la información vine
con ella). La llama utilizada es de aire-acetileno, la cantidad de aire y
acetileno también se cuadra manualmente.
Curvas de calibración:
Se realizaron dos curvas una para la el calcio y otra para el magnesio, cada
una en los intervalos indicados para el elemento; la de calcio con
concentraciones entre 0 y 5 ppm y la de magnesio entre 0 y 0,5 ppm. Para
esto, se utilizaron soluciones patrón con concentraciones de Ca =1001 ppm
y Mg = 10ppm y se hizo uso de la ecuación de disolución:

CfVf = CiVi

determinaron los volúmenes necesarios para obtener la concentración

deseada (ver tabla 1 y 2 ), el volumen final Vf utilizado para el calcio fue 25
mL y para el magnesio fue 50ml, los cuales fueron medidos en balones
aforados. Antes de aforar se les agregó a los balones 0.5 mL (a los de Ca) y 1
mL (a los de Mg) de una solución 5% de óxido de lantano. Se realizó un
blanco, es decir una solución que no contenía muestra pero si los 0.5mL de
óxido.

Los valores de absorción de la curva de calibrado del calcio también fueron

tomados en un espectrómetro, más moderno, en este las medidas son más
 simples, ya que todo el proceso de ajuste del instrumento es automático, las
ordenes se le envía por medio de un computador, donde al igual se reciben
los resultados del análisis. Los datos obtenidos para la curva fueron:

¿CUÁLES SON LAS PARTES DEL ESPECTROFOTÓMETRO?

Según (QuimiNe, 2011) para que un espectrofotómetro realice las funciones

correctas es necesario que cuente con aquellos componentes que lo ayudarán en su
labor. Por lo tanto, un espectrofotómetro se compone de:

Fuente de luz

La fuente de luz ilumina la muestra química o biológica, pero para que realice su
función debe cumplir con las siguientes condiciones: estabilidad, direccionabilidad,
distribución de energía espectral continua y larga vida.

Las fuentes de luz que puede tener un espectrofotómetro son:

- Lámpara de wolframio (también llamado tungsteno)

- Lámpara de arco de xenón
- Lámpara de deuterio que es utilizada en los laboratorios atómicos

Monocromador

El monocromador de un espectrofotómetro aísla las radiaciones de longitud de onda

deseada, logrando obtener luz monocromática.
Un monocromador está constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores
y el elemento de dispersión.

Colimador

El colimador es un lente que lleva el haz de luz entrante con una determinada
longitud de onda hacia un prisma, el cual separa todas las longitudes de onda de ese
haz logrando que se redireccione hacia la rendija de salida.

Compartimiento de muestra

En el compartimento de muestra es donde se lleva a cabo la interacción R.E.M. con

la materia.

Detector

El detector se encarga de evidenciar una radiación para que posteriormente sea

estudiada y saber a qué tipo de respuesta se enfrentarán (fotones o calor).

Registrador

Convierte el fenómeno físico en números proporcionales al analito en cuestión.

Fotodetectores

Los fotodetectores de un espectrofotómetro perciben la señal en forma simultánea

en 16 longitudes de onda y cubren al espectro visible, de esta manera se reduce el
tiempo de medida y minimiza las partes móviles del equipo.

Bibliografía

QuimiNe. Química , Material y Equipo de Laboratorio. 03-Oct-2011.

Disponible en. https://www.quiminet.com/articulos/como-se-compone-un-
espectrofotometro-2584607.htm.
Skoog, D. A., Holler, F.J. & T. A. Nieman (2001) Principios de Análisis Instru
mental. 5ta Edición, Editorial McGraw‐Hill, México. 1028 pp.
MIÑONES, J., "Manual de técnicas instrumentales", Círculo editor Universo.
1978. URL, disponible en
http://campus.usal.es/~quimfis/apoyo/Carmen/Practicas/Espectrofotome
tria

Universidad Central de Venezuela. Facultad de Ciencias. Escuela de Biología.

Departamento de Tecnología de Alimentos. Asignatura Análisis de Alimentos.
Actualizado por Prof. Jaime Valls P. (2010). URL, disponible en
http://www.ciens.ucv.ve:8080/generador/sites/mmedina/archivos/Practi
ca5.pdf

FISCHER & PETERS., Compendio de análisis espectrofotométrico; Nueva

Editorial Interamericana, S. A. de C. V.; 1ª edición; 1971; pp. 400 - 450.

GILBERT H. AYRES., Análisis químico cuantitativo; Ediciones del Castillo, S.

A.; 1970; pp 459-514.

GONZALEZ DE BUITRIAGO, J. M y col., Problemas de Bioquímica. Primera

edición. editorial ALHAMBRA. 1979. pp.24-41.

MCKEE, J.; MCKEE, T., Bioquímica, la base molecular de la vida. Tercera

edición. Editorial McGraw – Hill Interamericana. España. 2003.pp. 424-426.
SKOOG, DOUGLAS A., y COL. Química analítica. McGraw Hill. México 1995. pp.
257-281