RESUMEN

Identificación de los métodos y técnicas de esterilizacion más comunes en el

laboratorio con el fin de obtener una asepsia microbiológica adecuada. Para lo cual
se procedió a realizar un acondicionamiento previo del material más usual,
utilizando papel empaque para envolver los instrumentos de manera adecuada y
tapones de algodón y gasa para asegurar que no entre líquido al material, luego se
procedió a la esterilización del mismo mediante distintos métodos entre ellos con
vapor de agua a presión constante, con calor en seco a una alta temperatura y
mediante contacto directo con el fuego. Se obtuvo así el material libre de
microorganismos, concluyendo que la esterilización del material es de gran
importancia para evitar el riesgo de contagio de enfermedades causada por las
bacterias.
PALABRAS CLAVES
ACONDICIONAMIENTO_DEL_MATERIAL/ESTERILIZACIÓN/ASEPSIA_
MICROBIOLÓGICA/CONTAGIO_DE_ENFERMEDADES
 PRÁCTICA 2
ACONDICIONAMIENTO DE MATERIAL Y MÉTODOS DE
ESTERILIZACIÓN
1. OBJETIVOS
1.1. Reconocer, preparar los equipos y material de uso común en el laboratorio.
1.2.Aprender a utilizar apropiadamente equipos de esterilización para evitar la
contaminación cruzada de muestras.
1.3.Conocer los métodos y técnicas de esterilización más comunes en el laboratorio
con el fin de obtener una asepsia microbiológica adecuada.

2. TEORÍA
2.1.Acondicionamiento de material de laboratorio
2.2.Esterilización
2.2.1. Definición
2.2.2. Fundamentos de esterilización
2.2.3. Tipos de esterilización (Físicos y Químicos)
2.2.4. Controles de calidad de esterilización
2.3.Equipos de esterilización
2.3.1. Autoclave
2.3.2. Estufa
2.3.3. Cámara de flujo laminar
2.3.4. Mechero Bunsen
2.3.5. Baño maría
2.4.Materiales comunes en laboratorio de microbiología
3. PARTE EXPERIMENTAL
3.1. Materiales y Equipos
3.1.1. Autoclave
3.1.2. Estufa
3.1.3. Mechero de alcohol
3.1.4. Varilla de vidrio
3.1.5. Frascos autoclavables
3.1.6. Cajas petri
3.1.7. Matraces Erlenmeyer R: 250 [𝑚𝐿] Ap: ± 50 [𝑚𝐿]
3.1.8. Asa de cultivo
3.1.9. Aguja de cultivo
3.1.10. Papel empaque
3.1.11. Piola delgada
3.2.Sustancias y Reactivos
3.2.1. Agua destilada H2O(l)
3.2.2. Alcohol C2H6O(l)

3.3.Procedimiento

ACONDICIONAMIENTO DE MATERIAL
3.3.1. Verificar que el material este lavado y seco
Pipetas y caja petri
3.3.1.1. Envolver completamente el material con papel empaque.
3.3.1.2.Colocar el material empacado en el equipo de esterilización.
Vasos de precipitación, matraz Erlenmeyer y probetas
3.3.1.3.Realizar un tapón de algodón y gasa, para esto:
3.3.1.3.1. Abrir la gasa y colocar el algodón de forma uniforme sobre la misma.
3.3.1.3.2. Doblar los extremos y a la mitad
3.3.1.4.Enrollar conjuntamente y cubrir con un pedazo de papel empaque. El
empaque puede ser: Papel poroso, tela o polipropileno.
3.3.1.4.1. Taponar el material y asegurar el tapón con piola

ESTERILIZACIÓN DE MATERIAL
3.3.2. PARTE A: Autoclave

CARGA DE DEPÓSITO DE AGUA:

3.3.2.1.El nivel del agua debe estar como máximo a 2cm de la base de la válvula de
seguridad.
3.3.2.2.La carga del agua del autoclave es de 350ml debe ser incrementada por el
frente del autoclave.
3.3.2.3.Sus laterales y tapa trasera deben estar despejados como mínimo 25mm para
su correcta ventilación.
3.3.2.4.El agua deber ser agua destilada o estéril para evitar problemas de corrosión
en el equipo.
3.3.2.5.El tamaño y la densidad de los paquetes deberá ser tal que permita una
penetración uniforme y completa del vapor, con un apreciable margen de
seguridad, en un tiempo promedio de 30 minutos a una temperatura de 121°C.

3.3.3. PARTE B: Estufa.MEMMERT

3.3.3.1.Mantener conectado el equipo a un tomacorriente estándar de 110V

3.3.3.2.Encender el equipo presionando el PULSADOR GIRATORIO
3.3.3.3.Fijar la temperatura de operación presionando la tecla SET y PULSADOR
GIRATORIO hasta que la pantalla indique la temperatura deseada.
3.3.3.4.Dejar de presionar la tecla SET, girar EL PULSADOR GIRATORIO hacia la
izquierda hasta que titile el indicador del tiempo
3.3.3.5.Para fijar el tiempo, mantener presionada la tecla SET y girar EL
PULSADOR GIRATORIO hasta que la pantalla indique el tiempo deseado
3.3.3.6.Abrir la puerta metálica de la estufa halando la perilla negra delantera
3.3.3.7.Colocar el material a esterilizar dentro del equipo sobre las bandejas
3.3.3.8.No colocar las bandejas pegadas a la pared del fondo de la incubadora, dejar
un espacio de 1cm para que el aire circule fácilmente
3.3.3.9.Cerrar la puerta asegurándo la con la perilla delantera
3.3.3.10. Abrir o cerrar el paso de aire moviendo a la izquierda o a la derecha LA
REGLETA DE AIRE ubicado junto al PULSADOR GIRATORIO

3.3.4. PARTE C: Esterilización del medio de trabajo

3.3.4.1.Lavarse las manos con jabón

3.3.4.2.Colocarse los guantes y desinfectarlos con alcohol
3.3.4.3.Limpiar el área de trabajo con alcohol
3.3.4.4.Colocar el papel empaque sobre el área de trabajo
3.3.4.5.Colocar los mecheros en la mitad de área de trabajo para mantener un área
estéril( Radio=15cm).
3.3.4.6.Encender el mechero y seguir con la parte D

3.3.5. PARTE D: Mechero y esterilización de asa y aguja de cultivo

3.3.5.1.Encender el mechero
3.3.5.2.Poner en contacto directo el asa de cultivo hasta que adquiera una tonalidad
de rojo vivo que indicará esterilización (realizarlo antes y después de su uso)
3.3.5.3.Realizar el procedimiento anterior para la aguja de cultivo.
3.3.5.4.Apagar el mechero, retirar el papel y dejar limpia el área.

4. DISCUSIÓN
5. CONCLUSIONES
6. RECOMENDACIONES (Mínimo 3)
7. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
7.1.Citas bibliográficas
7.2.Bibliografía

8. ANEXOS
8.1.Reporte fotográfico

9. CUESTIONARIO
9.1.¿Qué ocurre en cada método de esterilización?
Los métodos utilizados en la práctica se emplearon para eliminar
microorganismos en el material de laboratorio, en el primer método utilizamos un
autoclave que es un recipiente de presión metálico de paredes gruesas con un
cierre hermético que nos permitió trabajar a alta presión para realizar
una esterilización con vapor de agua. En el segundo método utilizamos una estufa
memmert, un equipo que utilizó calor en seco a altas temperaturas para eliminar
las bacterias en los materiales, luego se empleó calor por contacto directo para
matar las bacterias y finalmente se recurrió al empleo de sustancias químicas
(desinfectantes) para eliminar los virus.

9.2.¿Cuál es la diferencia entre bacteriostático y bactericida?

El propósito de utilizar bacteriostáticos es conseguir detener el crecimiento de
las bacterias en el organismo para dar tiempo a que éste reaccione desarrollando
sus propios mecanismos de defensa para destruir los microorganismos nocivos
invasores. Bactericida, por otro lado, es aquel que produce la muerte a
una bacteria. Estas sustancias son secretadas por los organismos como medios
defensivos contra las bacterias antimicrobianos de efecto lísico o lítico en las
 bacterias, provocan una reducción en la población bacteriana en el huésped o en
el uso de sensibilidad microbiana. (Suárez, 2018)

9.3.¿Cuál es el propósito de la presión en el autoclave?

La presión elevada permite que el agua alcance temperaturas superiores a los 100
°C. La acción conjunta de la temperatura y el vapor produce la coagulación de las
proteínas de los microorganismos, entre ellas las esenciales para la vida y la
reproducción de éstos, hecho que lleva a su destrucción. (Rosales Barrera, 2002)

9.4.¿Qué método de esterilización es el más común en los alimentos?

La pasteurización es un proceso tecnológico que se lleva a cabo mediante el uso
de calor. Es un tratamiento térmico suave, aspecto que lo diferencia de la
esterilización, mucho más intenso. Su principal objetivo es la eliminación de
patógenos en los alimentos para alargar su vida útil. La pasteurización emplea
temperaturas bajas pero que aseguran la eliminación de patógenos, aunque
algunos puedan aguantarlas y resistirlas. El valor nutricional de los alimentos y
sus características organolépticas no se ven tan alteradas. (Gimferrer, 2012)