UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTIN

FACULTAD DE INGENIERIA DE PROCESOS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA QUIMICA

CURSO:
MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL

DOCENTE:
ING. MARCIA QUEQUEZANA B.

INTEGRANTES:
1. ROQUE BORDA MAGALI YESEBEL
2. SALCEDO HINOJOSA MARCO ANTONIO
3. DELGADO CHIPANA IVANNA
4. ROJAS VARGAS ANDREA
5. LOPEZ CUTIPA MILAGROS

2019
MICROBIOLOGIA
INDUSTRIAL

MICROSCOPIA LASER CONFOCAL

 MICROSCOPIA LASER CONFOCAL

1. OBJETIVOS:

 Dar a conocer sobre las partes y funcionamiento del microscopio laser confocal.

2. FUNDAMENTO TEORICO:
La mayor parte de las muestras observadas con microscopía óptica son traslúcidas o, en el
caso de ser opacas, su superficie de reflexión no se encuentra perfectamente pulida. En
ambos casos la luz interacciona con la muestra a varias profundidades por lo que la imagen
que llega al observador presenta áreas borrosas debidas a la luz procedente de zonas fuera
del plano de enfoque, lo que produce una degradación en el contraste y resolución de la
imagen (figura 1 A).

La microscopía láser confocal es una nueva técnica de observación microscópica que

permite obtener imágenes de un único plano confocal. El principio en el que se basa el
microscopio confocal es eliminar la luz procedente de los planos fuera del foco. El
microscopio confocal trabaja con epiluminación, es decir, con muestras que reflejan la luz
o emiten fluorescencia. El concepto de imagen confocal fue patentado por Marvin Minsky
en 1957. El científico estadounidense Marvin Minsky al estudiar el sistema nervioso pensó
que si podía verlo en sus diferentes niveles podría entender cómo funcionaban los circuitos
neuronales. Así que Marvin construyo y patento su técnica llamada “Microscopio de Barrido
por etapas de doble enfoque” que le permitió observar con claridad capas sucesivas de una
muestra sin rebanar en cortes finos. Treinta años después su método es conocido como
“Microscopio de Barrido Confocal” pero no fue hasta 1987 cuando se comercializó por
primera vez, y se desarrolló durante los años ’90 debido al avance en óptica y en
electrónica.
• Combina el microscopio de fluorescencia con la imagen electrónica.

• Además de puntos de luz suministrados por láser dirigido al espécimen en particular

para obtener imágenes tridimensionales.

• En este tipo de microscopio la fuente de luz es un láser que ilumina el a diferentes

alturas, generando secciones ópticas. Uno de sus componentes fundamentales es
el pinhole, que filtra la luz proveniente de planos fuera de foco.
• El pinhole es una apertura localizada delante del fotomultiplicador que evita el
pasaje de fluorescencia de las regiones de la muestra que no están en foco, la luz
que proviene de regiones localizadas por encima o por debajo del plano focal no
converge en el pinhole y no es detectada por el fotomultiplicador.
• Con relación al microscopio de epifluorescencia, una ventaja de la utilización de un
láser es que su intensidad puede ser regulada, reduciendo así la pérdida de
fluorescencia por "fluorescente fading", que consiste en la pérdida de fluorescencia
del fluoruro.
 3. METODOLOGIA:
4. APLICACIONES:
USOS:
La microscopia confocal es una herramienta ampliamente utilizada y de apoyo en el área
biomédica que ofrece la posibilidad de obtener imágenes con una alta resolución espacial.
Lo anterior se debe al principio de confocalidad que permite dirigir el haz de luz láser que
ilumina la muestra a un plano focal limitado por el usuario, lo que evita que la adquisición
de información quede fuera de foco.
• Permite localizar anticuerpos para estudios de inmunocitoquímica con mayor
resolución.
• Monitoriza los movimientos de moléculas dentro de las células.
• Estudios de ADN y ARN.
• Procesos celulares
• Investigación biomédica.
• Campo Biología Celular

APLICACIONES
La microscopía confocal es muy útil para el estudio de muchos problemas en biología,
permitiendo un nuevo conocimiento de la estructura celular y sus procesos. Entre otras
aplicaciones la microscopía confocal se utiliza en:
• Estudios de estructura celular y citoesqueleto
• Medida de actividad intracelular (ph e iones)
• Producción de reconstrucciones tridimensionales
• Análisis perfilométrico y topográfico de superficies en 2D y 3D de múltiples
materiales inorgánicos
• Estudio de estructuras y sustancias fotosensibles y auto fluorescentes en
biomateriales.
• Estudio cualitativo y cuantitativo de tejidos vegetales y animales, así como de sus
estructuras celulares.
• Estudio de emulsiones de distinta complejidad y localización de microorganismos.
• Estudio de muestras in vivo a lo largo de una secuencia temporal o para la
colocalización de distintos marcadores en una región concreta.

5. CONCLUSIONES :
6. BIBLIOGRAFIA :
• Lichtman J. 1994. Investigación y Ciencia. La ciencia de la luz. Microscopía confocal.
29:36-41
• Cooper, G. 1997. The cell. London. Oxford University. p. 23-24.
• Albert, B. Biología molecular y celular. Como se estudian las células. pg. 154-157.
• Art, J.J., Goodman, M.B., (1993). Rapid Scanning Confocal MIcroscopy. Cell
Biological Applications of Confocal Microscopy. Edited by M. Matsumoto. Academic
Press, Inc.
• Boyde, A. (1988). Confocal optical microscopy. Microscopy and analysis, Enero, pp
7-13.
• González-Río, F., Martínez-Nistal, A., Alonso, M., Astorga, R. (1967)
Caracterización de fibras de celulosa mediante microscopía láser confocal y proceso
digital de imágenes. Inv. Téc. Papel, núm, 131, pp. 112-129.
• Haugland, R. (1992). Intracellular Ion Indicators. Fluorescent and Luminiscent
Probes for Biological Activity. Edited by W.T. Mason. Academic Press.
• Martinez, A. Microscopia Laser Confocal. Universidad de Oviedo
• Resino, S. (2011) Microscopio Confocal.

• Microscopía Láser Confocal ( 27 de Marzo del 2019) Recuperado de:

http://www.vet.unicen.edu.ar/ActividadesCurriculares/Microbiologia/images/Docum
entos/Microcopia%20de%20laser%20confocal%20PDF.pdf
• Microscopía Confocal de Barrido Láser (MCBL) (27 de Marzo del 2019)
Recuperado
de:http://nanoipn.herokuapp.com/productos%20servicios%20cnmn%20confocal%2
00 2.pdf