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-- apparati
-- organi
-- TESSUTI (sostanza vivente organizzata)
-- cellule
-- nucleo (cromatina, nucleolo) & citoplasma (organuli, inclusi)
-- molecole (DNA, RNA, proteine, glucidi, lipidi,...)
-- legami
-- atomi
differenziamento cellulare
gametogenesi:
ovaio - espulsione uovo (ovocita) - tubi - fecondazione con spermatozoo
accumulo di:
X emoglobina (556 AA) -> globulo rosso (120 giorni di vita, non può più dividersi)
X cheratina -> citoscheletro -> epidermide (idrofoba, cellule morte del tutto riempite)
Più elevato il differenziamento, minore è la capacità di dividersi. Le cellule diventano meno proliferanti.
Una biopsia può rilevare la probabilità di riprodursi velocemente.
Fattori di differenziamento - modulazione, fattori locali (molecole), sollecitazioni meccaniche dall’esterno (zb
Hornhautbildung) --> alterazione
sul vitrino. sminuzzare campione, trattare con enzimi (es. tripsinizzare), contare, centrifugare e rimuovere
enzimi, seminarle in un recipiente, aggiungere terreno nutritivo.
X Milza: distruzione eritrociti attraverso macrofaghi -> Emacateresi. Fagocitosi (gl. rosso perde la membrana)
PV-6-3-96
PREPARATI STABILI
diagnostica, istopatologia.
vetrino istologico (confronto, documentazione)
X cellule nervose - morte dopo poche decine di secondi senza rifornimento di ossig.
(A) FISSAZIONE
--CONGELAMENTO RAPIDO
espansione rapida di CO2 (g): H2O (l) -> H2O (s) solidificazione.
Protoplasma: 90% costituito da H2O
Non possibile nel freezer. Si deve evitare lo svantaggio dello stato cristallino!
ESTEMPORANEO - diagnosi di cellule tumorali
Vantaggi:
-- velocità
-- nessun trattamento chimico, ma solo fisico -> dimostrazione della presenza di determinate sostanze.
Temperatura alta - rottura delle proteine (60 gradi), aumento della velocità di reazione.
(B) DISIDRATAZIONE
Passaggi graduali in alcoli di concentrazione sempre aumentata --> alcool assoluto <-> H2O completamente
sostituito.
XILOLO - solvente intermedio tra alcol e paraffina.
Nel termostato per un intervallo di tempo con paraffina --> cubo di paraffina con campione incluso.
(E) COLORAZIONE
A base di
-- ELETTROSTATICA (cariche opposte)
-- CHIMICA (ac-b, b-ac, forza ionica)
(F) DISIDRATAZIONE
Goccia di balsamo di Canada (resina) - indurisce con indice di rifrazione uguale al vetro
--> rifrazione solo sulle strutture cellulari!
Vetrini portaoggetto & coprioggetto
spessore unitario
microscopio tarato
EMATOSSILINA:
violetto/blu
a carattere basico --> strutture acide (basofile)
X nucleotidi, polisaccaridi
EOSINA
rosso/rosa
a caratt. acido --> sost. acidofile (eosinofile)
X globuli bianchi (granuli eosiofili). Contagggio percentuale (malattie allergiche, parassitarie)
ISTOCHIMICA
X Fegato:
bile nel duodeno
vena porta dall’ intestino --> proteine, AA, zuccheri
glicogeno si accumula nella cellula epatica (misura dell’attività metabolica)
cellule epatiche (diametro 30 micron) disposte radialmente attorno a venule.
confronto
X trattamento con ribonucleasi: nucleoli e citoplasma non si colorano più con Toluidine Blue o Ematossilina.
MICROSCOPIO A LUCE:
Semplificato: d = / 2
Lunghezza d’onda della luce visibile: (IR...) 400-750 nm (...UV)