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INFORME

FACULTAD DE CIENCIAS 4
DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

INFORME 4: Observación de Hongos


PROFESOR: Ramos Chaupin, Roberto Raul
MESA: “ 3 “
INTEGRANTES:

20150340 - Cornejo Tasayco, César


20140410 - Gonzalez Ortega, Abel
20150106 - Lopez Sarmiento, Stephany
20140436 - Zegarra Villanueva, Pamela -
AULA: LABORATORIO B-1
TURNO: JUEVES DE 11 A 01 (E*)
I.INTRODUCCIÓN
Los hongos se desarrollan en la mayoría de los ecosistemas y tienen una gran función como
descomponedores. Algunos hongos son acuáticos y colaboran a la descomposición de la materia
orgánica. La mayoría son de vida terrestre, en el suelo o sobre plantas muertas y estos tipos
juegan un papel importante en la mineralización del carbono orgánico en la naturaleza.
Un gran número de hongos son parásitos en la naturaleza, de hecho son la causa principal de
pérdidas importantes en la producción agrícola. Muchos de ellos forman asociaciones con
plantas como las micorrizas y otros forman asociaciones con algas como los líquenes. (Benson,
2000)
Los hongos son microorganismos eucariotas con un nivel de complejidad biológica superior al
de las bacterias; representan un grado mayor de diferenciación. Existen unas 250.000 especies
de hongos en la naturaleza, aunque tan sólo se conocen poco más de 150 especies que puedan
producir patología en el ser humano. Las micosis son las enfermedades producidas por los
hongos y tienen características clínicas y microbiológicas exclusivas que los hacen diferentes de
otros microorganismos. Se han encontrado algunos que son de agua dulce o marinos, muchos
de estos son patógenos e infectan plantas y animales. Los hongos se desarrollan y crecen mejor
en medios húmedos y oscuros, pero siempre estarán presentes en donde se encuentre materia
orgánica disponible. La mayoría de estos organismos son saprofitos; es decir, obtienen sus
nutrientes a partir de materia orgánica muerta. Al igual que numerosas bacterias, los hongos
liberan exoenzimas hidrolíticas que digieren sustratos externos y luego absorben los productos
solubles. (Benson, 2000)
En la presente práctica se observó diversas muestras de hongos a través del microscopio,
debido a su forma y mediante la comparación con las gráficas del manual se determinó el género
de hongo.

II.OBJETIVOS
 Observar e identificar si una colonia de hongos es filamentosa o levaduriforme; asimismo,
sus características macroscópicas y microscópicas.
 Observar y diferenciar el crecimiento de levaduras y mohos en medios de cultivo en placa.
 Observar la consistencia de la superficie de la colonia, el plegamiento, la nitidez del borde
de las colonias.
 Aislar hongos del aire y conocer sus características morfológicas y estructurales para
lograr su identificación.
 Observar si existe presencia de pigmento en la superficie o el reverso de la colonia o su
difusión hacia el medio circundante.
 Conocer qué es un medio de cultivo, utilidad, clasificación y ejemplos.
III. MARCO TEÓRICO
HONGOS
1. Penicillium
Penicillium es un hongo filamentoso, perteneciente al filo Ascomycota, su temperatura óptima de
crecimiento es de 23 °C, pero crece entre 5 y 37 °C. Las especies del género Penicillium son
abundantes y frecuentes en la Naturaleza. Entre ellas figuran mohos muy comunes, que se
desarrollan en la superficie de materias orgánicas húmedas, feculentas, azucaradas, pectínicas,
etc. (Pitt & Leistner 1991).

Las especies de Penicillium presentan hifas septadas hialinas, con conidióforos simples o
ramificadas, métulas, fiálides y conidias. Las métulas son ramificaciones secundarias que se
forman sobre los conidióforos. Las métulas acarrean fiálides en forma de frasco. La organización
de las fiálides en la punta de los conidióforos es típica (llamadas "penicilli" o pincel). Las conidias
son redondas, unicelulares y observadas como cadenas no ramificadas en el extremo de las
fiálides. (Pitt 1980).

Figura 1. Penicillium: Fiálide, conidias,


métula.

Fuente: http://www.telmeds.org/wp-content/uploads/2009/09/penicillium_draw1.jpg

Las colonias de Penicillium son de crecimiento rápido, filamentosas y vellosas, lanosas o de textura
algodonosa. Son inicialmente blancas y luego se convierten en verde azuladas, gris verdosas, gris
oliva, amarillentas o rosadas con el tiempo. El reverso de la colonia es pálido o amarillento. Son
circulares si no hay impedimento alguno para su crecimiento, con un borde neto muchas veces
sin fructificación y mostrando el color del micelio. (Pitt 1980)
Figura 2. Vista macroscópica de
Penicillium.

Fuente: http://scienceforlife.altervista.org/blog/il-fungo-della-pennicillina-si-riproduce-
sessualmente/

Los penicilios crecen sobre los alimentos preparados o sus materias primas, ya sean de origen vegetal o
animal, si hallan la actividad del agua (aw) y los nutrientes necesarios.

TABLA 1. Temperatura y actividad del agua para el crecimiento de algunas especies de


Penicilium (Corry 1987, Lacey 1989)

Figura 3. Vista microscópica de


Penicillium.

Fuente: http://botanyphoto.botanicalgarden.ubc.ca/2014/11/penicillium-chrysogenum.php
2. Fusarium

Fusarium es un hongo filamentoso, perteneciente al filo Ascomycota, ampliamente distribuido


en el suelo y plantas. Debido a su capacidad de crecer a 37°C, son considerados oportunistas.
Su amplia distribución se atribuye a su capacidad para crecer en gran número de substratos y a
su eficaz mecanismo de dispersión; el viento y la lluvia juegan un importante papel en su
diseminación. Se ha demostrado que el aire puede llevar las esporas hasta 400 km de distancia.
(Leslie, 2006)
Al microscopio, la fiálide es generalmente fina, con forma de botella; simple o ramificada; cortas
o largas; monofialídica (que emergen esporas de un poro de la fiálide) o polifialídica (de varios
poros).

Las especies del género pueden producir varios tipos de esporas asexuales: macroconidios y
microconidios. El macroconidio es la espora principal en la caracterización. Su forma y tamaño
varían según la especie. El microconidio es un carácter taxonómico primario y se considera su
presencia o ausencia. Si está presente las características consideradas son forma, modo de
formación, si están solos, en falsas cabezas, cabezas o cadenas. Pueden formarse en el micelio
aéreo a partir de mono o polifiálides pero no en esporodoquios. (Nelson, 1994)

Figura 4. Fusarium: Fiálide,


microconidio y macroconidio.

Fuente: http://cdn.biologydiscussion.com/wp-content/uploads/2016/02/clip_image008-
114.jpg
Macroscópicamente forma colonias lanosas que crecen rápido. Al dorso de la placa Petri la
colonia es blanca o salmón pálido, con su centro de color púrpura o azul oscuro. (Nelson, 1983)

Figura 5. Vista macroscópica de


Fusarium.

Fuente:
http://www.mycology.adelaide.edu.au/Fungal_Descriptions/Hyphomycetes_(hyaline)/Fusariu
m/

Figura 6. Vista microscópica de


Fusarium: macroconidios.

Fuente: http://www.medical-labs.net/wp-content/uploads/2015/03/Fusarium-culmorum.jpg

3. Cladosporium
Cladosporium es un hongo filamentoso, perteneciente al filo Ascomycota, caracterizado por
presentar una coloración oscura. Microscópicamente presenta hifas finas, septadas, ramificadas
de color hialino a marrón. Las hifas sostienen cadenas ramificadas de conidios unicelulares,
elipsoides o cilíndricos, algunos con forma de escudo debido a las cicatrices de unión entre ellos.
Los conidios se forman por gemación sucesiva del conidio anterior, estando el conidio más joven
y pequeño al final de la cadena. (Borrego y Perdomo, 2011)
Figura 7. Cladosporium: Conidióforo,
ramoconidio, conidio.

Fuente:https://atrium.lib.uoguelph.ca/xmlui/bitstream/handle/10214/6031/Cladosporium_diagr
am.jpg?sequence=1&isAllowed=y

Macroscópicamente forma colonias aterciopeladas, pulverulentas o vellosas, con pliegues radiales, de


color blanco o crema que tienden a oscurecerse en tonos verde oliva y, a veces, gris verdoso o marrones.
(Maggi et. al., 2000)

Figura 8. Vista macroscópica de


Cladosporium.

Fuente: http://thunderhouse4-yuri.blogspot.pe/2014/06/cladosporium-species-revisitied.html

Muchas especies son patógenos de plantas o saprofíticas, normalmente se encuentra colonizando las
plantas o en el suelo. Puede crecer en paja y madera húmeda, alimentos, combustibles fósiles, cosméticos
(cremas), pinturas, plásticos, papel y tejidos (ropa, alfombras, cuero). Su temperatura óptima de
crecimiento es de 18ºC a 28ºC, la mayoría de las especies no crecen a temperaturas superiores a 35ºC.
Normalmente requieren humedad relativa alta del 80% al 90%. Las esporas se encuentran en el aire,
principalmente a finales de verano y principios de otoño, sobre todo en zonas templadas, siendo un
contaminante habitual en los edificios o en los lugares de trabajo. (Payam and Ramanathan, 2004)
Figura 9. Distribución porcentual de los géneros fúngicos encontrados en depósitos.

Figura 10. Vista microscópica de Cladosporium.


Fuente: http://www.microbiologybook.org/mycology/mycology-5.htm

4. Aspergillus sp.

Aspergillus sp. es un hongo que pertenece a la división Deuteromycota, clase Hyphomycetes,


orden de los Hyphomycetales y familia Moniliaceae (Ortega, 2000).Los Aspergillus sp. se
caracterizan o tener micelio vegetativo de hifas septadas, ramificadas, incoloras, estructura
conidial desarrollada como pedicelos y cabezuelas de origen en células hifales especializadas
(células del pie), de paredes gruesas, las cuales producen conidióforos como ramas
aproximadamente perpendiculares al eje longitudinal de la célula del pie (Verastegui, 2001)
Figura 11. Aspergillus sp. Conidios,
Fiválides, conidióforo.

La clasificación se hace por las estructuras de reproducción y color de sus colonias.Los miembros de éste
género son aerobios de crecimiento rápido, la colonia es inicialmente plana, blanca que crece haciéndose
algodonosa. A medida que evejece y va appareciendo la esporulación, el cetro de la colonia se va tornando
de color distinto según la especie, así: amarillo A. flavus, verdoso A, glaucus, negro A. niger, gris A.
fumigatus (Guzman, 1977)

En una vision macroscópica los hongos Aspergillus sp pueden ser negras, marrones, verdes, amarillas.
Blancas o de otro color en función de la especie y de las condiciones de crecimiento. El aspecto de la
colonia puede orientar a la identificación inicial, pero la identificación definitiva precisa del estudio
micrbiológico de las hifas y la estructura de la cabeza conidial. (Arias Cifuentes & Piñeros Espinosa, 2013)

Figura 12. Visión macroscópica de


Aspergillus sp.

E una visión microscópica los aspergilos forman hifas tabicadas que producen cabezas conidiales cuando
se exponen a aire en condiciones in vitro e in vivo. Cada cabeza conidial se compone de un conidióforo
con una vesícula terminal, la cual porta una o dos capas de fiálides, o esterigmas. Asu vez, fiálides
alargadas generan columnas de conidias esféricas. (Arias Cifuentes & Piñeros Espinosa, 2013)
Figura 13. Visión macroscópica de
Aspergillus sp.

5. Alternaria

Alternaria es un hongo filamentoso dematiáceo, aislado de suelos, plantas, comida y aire.Este género
posee más de 50 especies siendo, Alternaria alternata la especie más implicada. Es uno de los
agentes causales de feohifomicosis, y en algunas ocasiones causa onimicosis y queratitis.

La morfología de la Alternaria consta de hifas septadas dematiáceas. El Conidióforo tiene una


apariencia en zigzag con cicatrices planas donde se produce la conidia. Estas son de color café, de un
tamaño aproximado de 7-10 x 23-34 um, con septos transversales y longitudinales, organizadas
solitarias, rugosas u ovoides. (Arias Cifuentes & Piñeros Espinosa, 2013)

Figura 14. Alternaria. Conidia, Opexo,


Tabicado

En una visión macroscópica las colonias de Alternaria alcanzan 4.5 cm de diámetro en agar PDA. Estos
hongos tienen apariencia algodonosa, color crema- grisáceo en la parte joven, en el centro se
oscurece a café- amarillo y en el reverso amarillo- grisáceo. No presenta exudación. (Arias Cifuentes
& Piñeros Espinosa, 2013)
Figura 15. Visión macroscópica de
Alternaria

Fuente: www.aprende enlinea.udea.edu.com

En una visión microscópica la Alternaria consta de un conidióforo simple o algunas veces ramificados,
rectos o flexibles; con uno o algunos apicales con aproximadamente un tamaño de 50x 3-6 um. Los
conidióforos y conidios se observan de color café- amarillos. Conidios largos, algunas veces ovoides o
elipsoides. Se observa la característica forma de una granada, presenta un poro basal, picos cortos y
cónicos, de paredes lisas, con aproximadamente 8 septos transversales y en menoscantidad
longitudinales. (Arias Cifuentes & Piñeros Espinosa, 2013)

Figura 16. Visión microscópica de


Alternaria

Fuente: KSU Faculty Member websites

6. Rhizopus
Rhizopus es un hongo que pertenece a la división Zygomycota, clase Zygomycetes,
orden Mucorales y familia Mucoraceae

Figura 17. Alternaria. Conidia, Opexo,


Tabicado

Fuente: Fungi the fifth kingdom


En una visión macroscópica de Rhizopus son de color blanco tonándose café grisáceo con el tiempo,
alcanzando una altura de 1 cm en agar Czapeck. De textura algodonosa, reverso incoloro, No presenta
exudación. (Arias Cifuentes & Piñeros Espinosa, 2013)

Figura 18 y 19. Visión macroscópica de


Rhizopus sp.

En una visión microscópica de Rhizopus se observan estolones lisos o ligeramente rugoso, incoloras o
amarillo-cafés. También se observan Rizoides cafés, esporangióforos solitarios o en grupos de 5 de
paredes con lisas, ligeramente cafés o hialinos. Esporangios globosos o subglobosos de color café oscuro
aproximadamente de 50- 120 um de diámetro. Columnela ovoide o globosa de diámetro aproximado
entre 30-120 um. Las esporangiosporas son globosas u ovoides, estriadas longitudinales
aproximadamente de 4-10 um. (Arias Cifuentes & Piñeros Espinosa, 2013)

Figura 20 y 21. Visión microscópica de Rhizopus sp.


IV. MATERIALES Y MÉTODOS
EJERCICIO N°1: OBSERVACIÓN DE HONGOS FILAMENTOSOS Y LEVADURAS

MATERIALES:

 Material infectado: tomate y cultivo de Cladosporium

 Estilete

 Láminas porta y cubre objetos

 Placa petri con agar sabouraud

 Microscopio

 Mechero Bunsen

 Piseta con agua

PROCEDIMIENTO:

Colocar una gota Hacer un Depositar la Cubrir la muestra


raspado de la
de agua en una muestra
muestra en con el cubre
lámina porta el porta objeto y observar
infectada con
objetos objeto al microscopio
el asa de koll

EJERCICIO N°2: AISLAMIENTO DE HONGOS DEL MEDIO AMBIENTE

Exponer el medio de
cultivo durante 15 Rotular la placa,
Elejir un punto del para fianlmente
minutos. Para
ambiente a evaluar.
continuamente cerrar incubar.
la placa
VI.DISCUSIONES

 En el medio de cultivo brindado


por el laboratorio, se reconocen
estructuras características del
Cladosporium sp como hifas muy
gruesas y tabicadas, conidias,
conidióforo y principalmente las
conidiosporas.

 En el caso tomate, se
encontraron hongos con
estructuras en forma de conidios
con septos transversales y
longitudinales de color pardo y de
forma picuda, estas características
fueron determinantes para
reconocer a la Alternaria sp
VII. CONCLUSIONES
 Se logró identificar a hongos del género Cladosporium sp y Alternaria sp en los el medio
de cultivo y el tomate.

 Se reconoció la diferencia estructural entre los géneros apreciados en el microscopio y


la diferencia en tamaño generando la necesidad de ir aumentando el ente objetivo hasta
40x

 Se comprendió que los hongos tienen una gran capacidad de adaptación y desarrollo en
sustratos alimenticios destinados al consumo humano y animal.

VIII. CUESTIONARIO
1-. ¿Cuáles son las formas características de desarrollo de los hongos filamentosos
y levaduriformes?
Las levaduriforme, son células aisladas, ovales, en cambio los filamentosos son células
alargadas y cilíndricas.
 Hongos filamentosos (MOHOS) :

Las esporas del moho germinan para producir los filamentos largos de ramificación
conocida como hifas. Las hifas pueden ser:
 Hifas septadas, debido a que poseen unos tabiques o septos de separación que las
dividen en células uninucleadas.
 Hifas no septadas, en este caso las hifas crecen formando una masa de ramificación y
su conjunto se llama Micelio. Los micelios pueden ser a su vez, vegetativos o aéreos

 Levaduras :

Son hongos unicelulares con forma oval o esférica. Se


pueden multiplicar mediante la llamada fisión binaria o por
gemación o división asimétrica.

Los hongos dimórficos son algunos hongos que pueden


presentar forma de moho o de levadura (dimorfismo). Su
forma suele depender de factores ambientales tales como;
Temperatura, así son levaduriformes a 37º y filamentosos
a temperatura ambiente.
Otros factores son por ejemplo la concentración de CO2,
crecimiento en suero, etc.

La tinción de PAS colorea intensamente la pared


polisacárida de los hongos y permite la detección rápida de
los elementos fúngicos en los tejidos. Las tinciones
argénticas permiten igualmente reconocer los elementos
fúngicos ya que la pared se tiñe en negro. En los tejidos de los hongos pueden observarse como
levaduras aisladas, o como filamentos ramificados infiltrantes. (CURTO, A. 2013).

2. ¿Qué elementos del cuerpo vegetativo de los hongos ha conseguido identificar al


microscopio? Tienen estos las mismas características en todas las muestras observadas?

Se han logrado identificar hifas en las muestras observadas, como elementos del cuerpo vegetativo.
Sin embargo, lo más importante para destacar, es la diferencia entre hifas de diversas especies.
Algunas hifas tenían la característica de ser septadas (posiblemente del grupo Acomycetes), y otras
tenían la características de ser aceptadas (posiblemente del grupo Zigomycetes)

3. ¿Cuáles son los valores promedio de las dimensiones de cada elemento del cuerpo
vegetativo en hongos filamentosos?

El tamaño de los micelios es notablemente variable entre las familias, géneros y especies puede
variar desde 0.1 um a varios metros de longitud

4.¿Cuál es el tamaño promedio de las levaduras?

Las levaduras son hongos unicelulares. Presentan forma esférica o elíptica y su tamaño se sitúa
entre 3 y 12 micras de longitud, por lo que son considerados. Al contrario que la mayoría de los
hongos, las levaduras se desarrollan y crecen en su estado unicelular, aunque algunas,
como Candida albicans, necesitan formar filamentos (estructuras multicelulares) para poder llevar
a cabo su ciclo vital. En conclusión, el tamao de las levaduras variaría dependiendo de si la levadura
está en estado (joven, no yemado y yemado)

5. ¿Qué géneros de hongos ha podido encontrar infectando más de un sustrato?

a) Penicilium
Las especies de Penicilium son consideradas como contaminantes habituales de diferentes
substratos y pueden presentar la capacidad de producir diversas micotoxinas. (Del Castillo,
2007) Estos hongos degradan sustratos como la celulosa, quitna, almidón, azucares y lignina
(Déctor, 2014)

Fuente: De la web slideshare.net/ferchohuertadector/penicillium-34153581

Las especies P. camemberti, P. commune y P. palitans crecen abundantemente en medios con


creatinina (CREA Y CSN) (Del Castillo, 2007)
b) Aspergillus

.El Aspergillus se ha detectado en una amplia variedad de alimentos, como distintos tipos de
frutas (manzanas, albaricoques, melocotones, peras, uvas, etc) y derivados de zumos de frutas
y también en cereales y ensilados. La especie Aspergillus alliaceus se aíslan en zonas templadas
y cálidas de sustratos como café, cacahuetes y otros fruto secos (Del Castillo, 2007).

Aspergillus niger pueden utilizar diferentes sustratos como fuente de carbono encontrando que
degradan polietileno, cemento, papel, madera, mármol, entre otros. (Litoral, 2009)

c) Monascus ruber

Esta especie tiene una amplia distribución y su islamiento se ha citado de una serie de
sustratos como suelo, arroz, semillas, soja, olivas y ensilados.

d) Fusarium

El género Fusarium presenta una amplia distribución, tanto en suelos como en sustratos
orgánicos. Fusarium graminearum se aisla a partir de gramíneas, suelos y semillas de
cereales(cebada, maíz) y Fusarium culmorum es más frecuente en zonas templadas y se aísla a
partir de suelos y cereales. (Del Castillo, 2007)

6. ¿Cuáles son las características de las especies de hongos consideradas como


cosmopolitas?

Colonizan los más variados sustratos y se dispersan mediante diminutas esporas de 2,3 micrómetros
de diámetro.

 Sus esporas caen en un lugar cualquiera y compiten germinando con ventaja con otros
hongos más exigentes en cuanto a humedad.
 Son pobladores preferenciales de silos y depósitos de granos, se les encuentra en suelos,
bulbos, productos alimenticios con bajos índices de agua (mermeladas, cortezas de jamones,
embutidos, frutos secos, etcétera).
 Son sumamente vistosas por los colores de sus colonias: verdes, blancas, negras, ocres y a
veces con gotitas de exudado que se acumulan sobre su superficie semejando cristales.
 Sintetizan unos compuestos llamados aflatoxinas, cuya toxicidad puede desencadenar
episodios cancerígenos.
 Desintegran el petróleo, cuyo carbono orgánico emplea para su nutrición.
 Son capaces de crecer de manera óptima a temperaturas relativamente elevadas, por lo cual
se encuentra en nidos y esófagos de muchos pájaros.
 Son especies muy temidas en laboratorios farmacéuticos que trabajan con ciertas sustancias
a las que no se puede someter a procesos drásticos de esterilización, por lo cual siempre
existe el peligro de que algunas esporas de este hongo conserven su viabilidad y luego se
desarrollen en los productos ya elaborados, debido a su termotolerancia.

Ejemplo: Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Aspergillus fumigatus, Aspergillus ochraceus.


IX. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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