RESISTENCIA ANTIMICROBIANA

 Fenómeno por el cual un microorganismo deja

de verse afectado por un antimicrobiano al
que anteriormente era sensible, son inmunes a
los efectos de los antimicrobianos, de modo que
los tratamientos habituales se vuelven
ineficaces y las infecciones persisten y
pueden transmitirse a otras personas”.

Fuente: WHO, Resistencia Antimicrobiana

FORMACIÓN DE LA PARED BACTERIANA

Fuente: Suárez C.(2009). Enferm Infecc Microbiol Clin. 27(2):116–129

Mecanismo de acción de los betalactámicos
 Biológico
Origen Sintético
Clasificación de los
antibióticos Semisintetico

Reducido
Espectro de acción Amplio

Bacteriostático
Actividad Bactericida
Bacteriolítico

1. B-lactámicos
2. Glicopeptidos
3. Aminoglucócidos
Estructura Química 4. Macrólidos
5.Tetraciclinas
6.Fluoroquinolonas
 MECANISMO DE ACCION DE LOS
ANTIBIOTICOS SOBRE LA ESTRUCTURA
BACTERIANA
 MECANISMO GRUPO DE ANTIBIOTICO EJEMPLO

INACTIVACION Betalactámicos Penicilinasas,

ENZIMATICA Cefalosporinasas,
carbapenemasas
Aminoglucósidos Enzimas
modificadoras de los
aminoglucosidos
RECEPTORES Betalactámicos Proteínas fijadoras
ALTERADOS de penicilina
alteradas en
bacterias gram
negativas y Gram
positivas
Tetraciclinas, eritromicina, Alteraciones
aminoglucósidos ribosomicas
Quinolonas Alteración del ADN
girasa

Sulfametazol y TMS Enzimas bacterianas

alteradas

TRANSPORTE Alteración en las proteínas Bacterias gram

ALTERADO DEL de la membrana (porinas) negativas
ANTIBIOTICO
Fuerza motora protónica aminoglucósidos

MECANISMOS
disminuida.
Transporte activo desde la Tetraciclinas,
célula bacteriana Eritromicina, flujo al
exterior activo.
DE RESISTENCIA
 Mecanismos producido por
Staphylococcus
 Enzimas extracelulares por β- lactamasas
 Alteraciones en el sitio de diana (modificación
de las PBP)
 Resistencia de los Macrólidos inducida por la
Eritromicina
 VISA o VRSA
MECANISMO DE
RESISTENCIA
GRAM POSITIVAS

Fuente: Arias C, Murray B. Nature Review, 2012 Vol 10; P 266-278

Staphylococcus sp. Resistentes a los
B-lactamicos
PRODUCCION DE β- LACTAMASAS

ALTERACION DE PROTEINAS DE MEMBRANA

 Prueba de la β-lactamasa
Cefinasa

 Es una cefalosporina nitrocefina de color

amarillo pálido, pero adquiere el color rojizo
cuando el enlace del anillo β- lactámico es
eliminado por la enzima presente en el
microorganismo
 Resistencia Bacteriana: mecA PBP2a
S. aureus
Penicillinas
Ampicilina
Amoxicilina
Cefalosporinas
Proteína ligadora de
PBP 2a
A. Clavulanico PBP
PLP
penicilina

bb-lactam
-lactam
Ribosoma

DNA Membrana
PBP Celular

PBP
Citoplasma
b-lactam PBP
PBP 2a PBP 2a Pared Celular

Inhibición de PBP
 Resistencia Staphylococcus Sp. A Los Betalactamicos Por
Modificacion Del Sitio Diana (PBP)
S. aureus, S. lugdunensis y staphylococcus coagulasa negativas

Su deteccion se realiza mediante la SARM

(Staphylococcus
prueba con el disco de cefoxitin. utilizada aureus resistente
para predecir la presencia del Gen mecA a meticilina)
que media la resistencia a los B-lactámicos
incluyendo a la oxacilina.
SARM
Cuando la oxacilina es resistente se dice: SARM
(Asociado a la
que hay modificación del PBP, y se reporta (Hospitalario)
comunidad)
como Meticilino resistente.
Resistencia a los 4 grupos de
antibióticos β-lactámicos
Cuando la oxacilina es sensible, se debe (penicilinas, cefalosporinas,
realizar test confirmatorio con el Cefoxitin monobactámicos y carbapenemes)
30 ug (FOX).
Resistencia al cefoxitin
 Resistencia al grupo MLSB
Macrólidos (eritromicina), lincosamidas (clindamicina) y
estreptograminas B.

Tipos de resistencia:
Prueba “D”:
• Constitutiva (MLSBc)
• Inducible (MLSBi)
Relacionadas con la
expresión de los genes
erm (erythromycin
ribosome methylation).
 Prueba “D” positiva
Eritromicina puede inducir a que la bacteria induzca resistencia sobre la
Clindamicina.

Se realiza cuando la eritromicina es resistente y la clindamicina sensible.

20 mm
Interpretación:
Si se observa una prueba positiva se debe informar
resistencia a clindamicina a pesar de que parezca
sensible.
 S. aureus Vs. Vancomicina
Sensibilidad reducida a Vancomicina por adq. de vanA:
.
VRSA: Resistentes (CIMs > ó =16 μg/ml)
VISA: Intermedio (CIM 4-8 μg/ml)
h-VISA: CIM VAN < 2 μg/ml (sensible) pero capaces
de seleccionar subpoblaciones VISA.

El mecanismo de resistencia se encontró asociado a una

alteración en la regulación de la síntesis y degradación de
la pared producida que genera cambios en la misma.

En algunas cepas se observa crecimiento lento y

coagulasa débil.
 Resistencia Enterococcus Sp A La
Penicilinas
Presenta dos mecanismos diferentes: B-lactamasas e
hiperproduccion de PBP de baja afinidad

E. faecalis. Suelen producir enzimas penicilasas.

resistentes a penicilina, ampicilinas y ureidopenicilinas.

E faecium suele ser resistente a penicilinas por

hiperproduccion PBP de baja afinidad.

Para la deteccion de enzimas secretoras extracelulares como

la Betalactamasa se realiza el TEST DE CEFINASA
• E. faecalis
Usualmente susceptible a ampicilina y penicilina.
Puede adquirir resistencia a vancomicina,
usualmente por van A o van B.
Ocasionalmente produce beta-lactamasa.

• E. faecium
Con frecuencia resistente a ampicilina y penicilina.
Puede adquirir resistencia a vancomicina,
usualmente por van A o van B.

• E. raffinosus, E. avium y E. durans

Puede adquirir resistencia a vancomicina por los
genes vanA o vanB o, menos frecuentemente, por
los genes van D, van E, o van G.
Enterococcus sp.
 Eleccion De Antibioticos
Enterococcus spp Enterococcus Enterococcus spp
procedentes de resistentes a recuperados de
infección severa vancomicina infecciones
Ampicilina Linezolid urinarias no
complicadas
Teicoplanina Minociclina
Ampiclina
Vancomicina Tigeciclina
Teicoplanina
Gentamicina alta
carga Vancomicina
Espectinomicina Ciprofloxacina
alta carga Nitrofuranos
Ampicilina – Ampiclina
Sulbactam
MECANISMO DE RESISTENCIA GRAM NEGATIVAS
 Mecanismo De Resistencia A Los
B- Lactámicos
Enzimas inactivantes (betalactamasas)

Alteración de permeabilidad de la
membrana externa (perdida o reducción de
porinas).

 Aumento de bombas de extrusión

Modificación de dianas de acción (Mutación

en las proteínas de unión a la penicilina).
 Clasificación De Las Betalactamasas

Los esquemas más utilizados para la clasificación de las

betalactamasas son:

Clasificación Funcional según Bush-Jacoby-Medeiros

Clasificación molecular según Ambler (clases A, B, C y D).

 Clasificación De Las Betalactamasas
INHIBIDO POR
GRUPO BUSH- GRUPO BUSH-
AMBLER SUSTRATO REPRESENTANTE
JACOBY (2009) JACOBY (2009) Ac. Clav. EDTA

1 C Cefalosporinas y cefamicinas No No AmpC, CMY-2, FOX, MIR, ACT,

1
1e C Cefalosporinas No No GCI, CMY-37
2a A Penicilinas Si No PC-1
Penicilinas y cefalosporinas de primera
2b A Si No TEM-1, TEM-2, SHV-1
generación
Cefalosporinas de espectro extendido y
2be A Si No TEM-3, SHV-2, CTX-M-15, PER-1
monobactámicos
2br A Penicilinas No No TEM-30, SHV-10
Cefalosporinas de espectro extendido y
2ber A No No TEM-50
monobactámicos
2c A Carbenicilinas Si No PSE-1, CARB-3
2 2ce A Carbenicilina y cefepime Si No RTG-4
2d D Cloxacilina Variable No OXA-1, OXA-10
Cloxaxilina y cefalosporinas de espectro
2de D Variable No 0XA-11, OXA-15
extendido

2df D Cloxacilina y carbapenemes Variable No OXA-23, OXA-24, OXA-48

Cefalosporinas de espectro extendido (no

2e A Si No CepA
actúa sobre monobactámicos)

2f A Carbapenemes Variable No KPC, IMI, SME

3a B Carbapenemes No Si IMP, VIM, GIM, SPM, SIM, NDM

3
3b B Carbapenemes No Si CAU, GOB, FEZ
Fuente: Bush K. et al (1995). AAC. 39(6): 1211–1233. Bush, K. (2010). AAC. 54 (3): 969 - 976
Enzimas derivadas del grupo 2be: SHV-2 a SHV-6, TEM-3 a TEM-26,CTX-M,
PER-1, MEN-1, VEB-1.
TEST CONFIRMATORIO PARA DETECCIÓN DE
BLEE
La prueba tamiz y la prueba confirmatoria fenotípica para la detección de BLEE
está recomendada para Klebsiella pnuemoniae, Klebsiella oxytoca, E. coli y
Proteus mirabilis.

El test confirmatorio se realiza con Ac.

Clavulanico, cefotaxime, ceftazindima.
Prueba positiva:
Un incremento ≥ 5 mm en la zona de
diámetro para cualquiera de los agentes
antimicrobianos probados en combinación
con acido clavulánico.

Ejemplo:
Ceftazidime (CAZ): 16 mm

Ceftazidme + Ac. clavulánico

(CAZ/CLA): 21
Betalactamasa BLEE
 MECANISMO DE RESISTENCIA BLES
MICROORGANISMOS ASOCIADOS Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae,
Proteus mirabilis
GEN DE RESISTENCIA Sin gen especifico

LOCALIZACIONES DE LOS GENES Plásmidos extracromosomicos

EXPRESION GENETICA Constitutiva

ENZIMAS RELACIONADAS Tem3, SHV

TEST CONFIRMATORIO Acido clavulánico

ANTIBIOTICOS INDICADORES Cefalosporinas de 3era y 4ta generación,

(SUSTRATO) Aztreonam
ANTIBIOTICOS PARA DETECTAR Cefoxitim: Sensible
MECANISMO DE RESISTENCIA Pipercilim-Taxobactam: Sensible

Dra. María Luisa Ramírez. Universidad de Santander – Catedra de Correlación Clínica (Microbiología) - 2015
 Betalactamasa Ampc, Cefalosporinasas
Este tipo de B- lactamasas puede ser inducido por la exposición a antibióticos B-
lactamicos.

Esto se debe a la presencia en estos microorganismos de un gen regulador

denominado AmpR, el cual en condiciones de crecimiento normal tiene la función de
reprimir la expresión de AmpC.
.
La sigla AMPCES hace referencia a los siguientes microorganismo en el cual se
observan este tipo de resistencia.

Acinetobacter
Morganella
Proteus/Providencia
Citrobacter
Enterobacter
Serratia
 pueden ser constitutivas o inducibles.

 Hidrolizan las cefalosporinas de 1, 2, 3, generación , en algunos casos

en menor medida al cefepime, incluyendo resistencia a las cefamicinas,
aztreonam y a los inhibidores B-lactamicos

 Actualmente no se tiene estandarizada una técnica por el laboratorio

para la detección de AmpC sin embargo la prueba tamiz de BLEE puede
ser usada para detectar B-lactamasa de tipo AmpC.

 Otras pruebas para la detección son:

Prueba de Disco para AmpC. Tris EDTA

Prueba de Disco con ácido borónico

Prueba con Agar suplementado con Cefoxitín, permite la

diferenciación de AmpC de otros mecanismos de resistencia como
K.Pneumoniae y E.coli
MECANISMO DE RESISTENCIA CEFALOSPORINASAS

MICROORGANISMOS ASOCIADOS Acinetobacter sp. Morganella morganii,

Proteus indol positivo, Citrobacter sp.
Enterobacter sp. Serratia sp.

GEN DE RESISTENCIA AmpR

LOCALIZACIONES DE LOS GENES Cromosomicos

EXPRESION GENETICA Constitutiva e Inducible

ENZIMAS RELACIONADAS Ampc

TEST CONFIRMATORIO Acido fenil-boronico

ANTIBIOTICOS INDICADORES Cefalosporinas, Cefamicinas, Cefoxitin

(SUSTRATO)
ANTIBIOTICOS PARA DETECTAR Cefepime: Sensible
MECANISMO DE RESISTENCIA
Dra. María Luisa Ramírez. Universidad de Santander – Catedra de Correlación Clínica (Microbiología) - 2015
Betalactamasas
 BETALACTAMASA TIPO CARBAPENEMASA

 Son una familia versátil de B-lactamasas

 Tienen la habilidad de hidrolizar carbapenemes y en su gran

mayoría hidrolizan casi todo los betalactamicos de uso clínico
incluyendo las cefamicinas.

 Las carbapenemasas se clasifican en 2 grandes grupos de acuerdo

al mecanismo hidrolitico de su sitio activo.

 1.Carbapenemasas clase A y clase D (oxacilinasas) poseen serina.

 2.Carbapenemasas de clase B (Metalobetalactamasas) necesitan

de zinc para su actividad enzimática.
 Carbapenemasas

Metalobetalactamasas Enzimas tipo Enzimas tipo serina

MBL –clase B serina clase A clase D -
KPC, GES, Oxacilinasas
VIM, NDM, IMP, Sme, IMI/NMC OXA-23, OXA-24,
SPM. GIM, SIM, AIM,
Enterob>>BGNNF OXA-51, OXA-58,
KHM, DIM, FIM
OXA-143, OXA-48
BGNNF >> Enterob. KPC y GES: Acinetob>> Enterob.
R a C3G y C4G R a C3G, C4G y
AZT No perfil típico
S a AZT hidrólisis variable
Inh. por EDTA Inh. por APB Sin inhibidores

Grupo 3 Grupo 2f Grupo 2d

 KPC.(Klebsiella pneumoniae
carbapenemasa).
Carbapenemasas tipo KPC: variantes KPC-2 y KPC-3 (1, 2, 3, 4, 5)

Son de naturaleza plasmidica asociada a transposón Tn4401.

Las KPC hidrolizan de forma eficiente penicilinas, carbapenémicos, cefalosporinas,

no se inhiben por el ácido clavulánico, pero si por el acido Borónico.

Detectadas en enterobacterias (principalmente K, pneumoniae, E coli) y no

fermentadores como P. aeruginosa.

Diseminación de KPC-3 en hospitales de diferentes ciudades de Colombia

 Test De Hodge - TMH
Recomendada por CLSI, para
enterobacterias, se debe realizar
cuando se cumplan los siguientes
criterios (únicamente para
enterobacterias):

 Resistencia a una o más

cefalosporinas de la subclase III.
(ceftriaxone, cefotaxime, ceftazidime,
cefoperazone, ceftizoxime)

Resistencia o susceptibilidad
intermedia a por lo menos un
1. Control negativo para producción de carbapenemasas
2. Control positivo para producción de carbapenemasas carbapenémico:
3. Aislamiento positivo para producción de carbapenemasas
 Microdilución (CIM):
 Difusión de disco:
CIM de Ertapenem
Ertapenem (19-21mm) y meropenem
2µg/mL
(16-21mm), no imipenem.
CIM de Imipenem y/o
Meropenem 2 – 4 µg/mL.
Test Modificado de Hodge (TMH)
A partir de la suspensión 0,5
Mac Farland realizar una
dilución 1/10 con solución
salina
MECANISMO DE RESISTENCIA CARBAPENEMASAS

MICROORGANISMOS ASOCIADOS Clase A: Klebsiella pneumoniae y otras enterobacterias

Clase B: Pseudomonas sp. y otras enterobacterias
Clase D: Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter sp.
GEN DE RESISTENCIA Transposón Tn 4401

LOCALIZACIONES DE LOS GENES Plásmidos

EXPRESION GENETICA Inducible

ENZIMAS RELACIONADAS Clase A: KPC, GES, SME

Clase B: VIM, NDM Clase D: OXA
TEST CONFIRMATORIO Clase A: Test de Hodge1
Clase B: Dependientes de Zinc: EDTA
Clase D: No hay test relacionado
ANTIBIOTICOS INDICADORES (SUSTRATO) Meropenem, Ertapenem2, Imipenem, Doripenem

ANTIBIOTICOS PARA DETECTAR MECANISMO DE Clase A: Meropenem: R. Ertapenem: R

RESISTENCIA Clase B: Astronam: Sensible
Clase D: Resistente a todos los antibioticos
1: Son inhibidos por el acido fenil-boronico. 2: Se aconseja el uso de Ertrapenem ya que no induce tanta resistencia en comparación al Meropenem

Dra. María Luisa Ramírez. Universidad de Santander – Catedra de Correlación Clínica (Microbiología) - 2015
Test de Hodge modificado
 E-test MBL

Prueba positiva:

Un incremento en la CIM ≥ 3 diluciones dobles en la

elipse de imipenem en combinación con EDTA (IPI)
vs la zona de elipse con imipenem solo.

Ejemplo:
Imipenem (IP): 64mg/mL
Imipenen / EDTA (IPI): ≤1mg/mL

Se han reportado falsos positivos en

Walsh T. (2005). CMR. 18: 306-25 P. aeruginosa y A. baumannii
 Las especies Proteus sp, Providencia sp y Morganella sp, pueden
presentar CIMs elevados a imipenem por mecanismos no relacionados a la
producción de carbapenemasas, por lo cual sugiere iniciar la búsqueda de
carbapenemasas en estos géneros a partir de una CIM de 4µg/mL para
imipenem y 2µg/mL para ertapenem y meropenem

 Reporte en caso de prueba positiva: “Organismo con posible producción

de carbapenemasas” y no cambie la interpretación de susceptibilidad a
carbapenémicos.

Nota :
No todos los aislamientos de Enterobacteriacea productores de
Carbapenemasas son TMH (+) y resultados de MHT (+) pueden encontrarse
en aislamientos con mecanismos de resistencia a carbapenémicos diferentes
a la producción de carbapenemasas