CARACTERIZACION DE MATERIALES

1. LABORATORIO N°03:”ESPECTROSCOPIA VISIBLE”

2. OBJETIVOS
2.1 OBJETIVOS PRINCIPALES
 Preparar una solución concentrada a 50ppm de azul de metileno.
 Preparar solución estándar de azul de metileno a los siguientes
concentraciones: 5, 10, 15, 20, 30 y 40 ppm.
 Hacer un espectrograma de absorción para el azul de metileno
 Graficar una curva de calibración(ecuaciones Polinómica)

2.2 OBJETIVOS SECUNDARIOS

 Aprender el uso correcto del espectrofotómetro -Visible
 Aprender a calibrar adecuadamente el equipo(espectrofotómetro-visible)
para una óptima realización del experimento.

3. Fundamento Teórico:
3.1) Espectrofotómetro:
Definición: El espectrofotómetro es un instrumento usado en la física óptica
que sirve para medir, en función de la longitud de onda, la relación entre
valores de una misma magnitud fotométrica relativos a dos haces de
radiaciones. También es utilizado en los laboratorios de química para la
cuantificación de sustancias y microorganismos. Hay varios tipos de
espectrofotómetros, puede ser de absorción atómica o espectrofotómetro de
masa.Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz
monocromática a través de una muestra y medir la cantidad de luz que es
absorbida por dicha muestra.(1)
3.2) Espectroscopia visible:
Es una espectroscopia de emisión de fotones y una espectrofotometría.
Utiliza radiación electromagnética (luz) de las regiones visible, ultravioleta
cercana (UV) e infrarroja cercana (NIR) del espectro electromagnético, es
decir, una longitud de onda entre 380nm y 780nm. La radiación absorbida
por las moléculas desde esta región del espectro provoca transiciones
electrónicas que pueden ser cuantificadas.(2)
 3.3) Radiación electromagnética:
Es la propagación de energía a través del espacio sin soporte de materia, es
decir, a través de ondas producidas por la oscilación o aceleración de una
carga eléctrica (dualidad ondapartícula).

3.4) Espectro Uv-Visible

3.5) Espectrometría de absorción:

La espectrometría de absorción es una técnica en la cual la energía de un haz
de luz se mide antes y después de la interacción con una muestra. Cuando se
realiza con láser de diodo ajustable, se la conoce como espectroscopia de
absorción con láser de diodo ajustable. También se combina a menudo con
una técnica de modulación, como la espectrometría de modulación de
longitud de onda, y de vez en cuando con la espectrometría de modulación
de frecuencia a fin de reducir el ruido en el sistema.

3.6) Principios de la Espectrofotometría:

En la espectrofotometría se aprovecha la absorción de radiación
electromagnética en la zona del ultravioleta y visible del espectro. La
muestra absorbe parte de la radiación incidente en este espectro y promueve
la transición del analito hacia un estado excitado, transmitiendo un haz de
menor energía radiante. En esta técnica se mide la cantidad de luz absorbida
como función de la longitud de onda utilizada. La absorción de las
radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las
moléculas, y es característica de cada sustancia química.
3.7) Transmitancia:
Es la razón entre la luz monocromática transmitida (P) por una muestra y la
energía o luz incidente (Po) sobre ella. Tanto la energía radiante incidente
como la transmitida deben ser medidas a la misma longitud de onda.
T = P / P0 = 10-abc ó %T = 100 P / P0
Se acostumbra a considerar la transmitida como la razón de la luz
transmitida por la muestra y la luz transmitida por un estándar arbitrario.
Este estándar puede ser el líquido (solvente) en que esta disuelta la muestra,
aire, blanco analítico (solución que contiene todos los componentes de la
solución problema menos la sustancia problema) u otra sustancia elegida
arbitrariamente. Debido a que la transmitancia de este estándar no es
necesariamente 100%, es necesario especificar el estándar con el cual la
muestra es comparada.

3.8) Absorbancia:
Se define como la cantidad de energía radiante absorbida por una sustancia
pura o en solución. Matemáticamente, corresponde al logaritmo negativo de
la transmitancia (T), transmitancia expresada como fracción decimal %T,
transmitancia expresada como porcentaje.
A = - log T = 2 – log %T
Pero: T = P / P0 = 10-abc
Luego: A = - log (P / P0) = - log 10-abc
A=abc
Esta ecuación indica que la absorbancia es una función lineal de la
concentración, donde a es una constante de proporcionalidad llamada
absortividad. La magnitud de a depender de las unidades de b y c. Si la
concentración c está expresada en moles por litro y la longitud de la cubeta b
en centímetros, la constante a recibe el nombre de absortividad molar (ξ).
Luego: A = ξ b c.
3.9) Curva de Calibración:
La curva de calibración es un método muy utilizado en química analítica
para determinar la concentración de una sustancia (analito) en una muestra
desconocida, sobre todo en disoluciones. El método se basa en la relación
proporcional entre la concentración y una determinada señal analítica
(propiedad). Conociendo esta relación, será posible conocer la concentración
en una muestra dada mediante la medida de esa señal. La relación
concentración – señal se suele representar en una gráfica a la que se le
conoce como curva de calibración o curva de calibrado.

Es imprescindible que la señal analítica utilizada mantenga una relación

proporcional con la concentración. Las señales más utilizadas son aquellas cuya
relación con la concentración es lineal, al menos en el rango de trabajo. Por
ejemplo, una de las propiedades más utilizadas es la absorbancia (absorción
lumínica) que suele mantener una relación lineal con la concentración de solutos
en disoluciones. Al ser una relación lineal, se puede representar mediante una
recta, de ahí que este tipo específico de curva de calibración se conozca también
como recta de calibración.[3)

Figura N°01 “Curva de calibración”

 4. Materiales, Instrumentos y Equipos:

Tabla N°01:Instrumentos y materiales usados en el laboratorio.

Nombre Cantidad Característica
especial
Balanza Analítica Modelo 01 unid Precisión 0.001g
Instrumentos TE3102S
Espectrofotómetro -Visible 01 unid T80-UVV5

Probeta 01 unid Pírex

recipientes 06 unid Liber
Materiales Matraz Aforado 01 unid Pírex
Fiola 01 unid 1000ml
Agua Destilada 01 unid 4000ml
Azul de metileno - 0.0256gr
5. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:

5.l) Medición del Azul de metileno a través de la balanza analítica:

 Calibración de la balanza analítica.
Marca: AND
Modelo: TE3102S
1. Conectar la balanza de la red eléctrica como mínimo una hora.
2. Verificar que no haya ningún peso sobra la balanza.
3. Presione y mantenga presionado la tecla CAL hasta que aparezca CAL y
OUT y después suelte la tecla.
4. La balanza muestra Cal 0 y luego se presiona PRINT y en la balanza
aparecerá 200.
5. Colocar la pesa de calibración y posterior presionar PRINT.
6. Finalmente esperar hasta que aparezca END.
7. Sacar la pesa y verificar que la lectura sea de 0.000 .

 Preparación de la solución patrón:

 Luego en una fiola de 500 ml agregamos 0.0256 gr de azul de
metileno (C16H18CIN3S) y agua destilada.
 Preparación de las muestras de soluciones con azul de metileno para
análisis de un espectro de absorción.
 Lavamos los 6 recipientes con agua destilada, de manera interna y
externo.
 Rotulamos estos envases con los siguientes datos: 0, 10, 15, 20, 30 y
40 ppm
 Medición de la absorbancia de muestras a diferentes Ppm de Azul de
metileno (C16H18CIN3S) mediante el espectrofotómetro.
 Limpieza de los tubos de ensayo del espectrómetro
Usamos agua destilada y de manera intercalada , de manera que los
tubos de ensayo estén libres de impurezas, y que al momento de
realizar la curva de calibración para las muestras a diferentes Ppm de
Azul de metileno (C16H18ClN3S) obtengamos los resultados
esperados.
 Calibración del espectrómetro.
 Antes de utilizar el espectrofotómetro o fotocolorímetro es
indispensable realizar rutinas básicas de calibración para asegurarnos
que el aparato proporcione datos y lecturas confiables. Antes de usar
sus equipos debe hacer lo siguiente:
 Limpieza de la superficie del instrumento.
 Limpieza de los filtros y fuente de luz (lámpara y
condensador).
 Verificar instalaciones eléctricas.
Los pasos para probar la operatividad del equipo son los siguientes:
 Se enciende el equipo y se deja que caliente por lo menos 15
minutos (sí el aparato es automático, dará una señal cuando
esté listo para funcionar).
 También se observa las funciones F1, F2, F3, F4 en el menú
principal, cuyas funciones consisten en
 F1: Medidas fotométricas y con espectros, encontramos la
función MODO TRABAJO que se subdivide en :
(1) Longitud y porcentaje de absorbancia o transmitancia (%). Si el
aparato que se va a utilizar tiene las dos escalas (absorbancia y
transmitancia) se ajustan las lecturas a cero de absorbancia y 100%
de transmitancia utilizando los controles grueso y fino en vacío. Se
selecciona la función absorbancia o transmitancia.
(2) Introducimos la longitud de onda “ 𝝀” Se selecciona la longitud de
onda deseada (esto depende de la muestra a ser leída y del reactivo
utilizado). Para nuestro caso es Se selecciona la longitud de onda
deseada (esto depende de la muestra a ser leída y del reactivo
utilizado). Para nuestro caso es 𝝀 = 610a 705 nm.
(3) Factor de corrección. Nos permite verificar la toma de datos y
realizar correcciones.
(4) Equipo de otro ambiente.
F2: ELIMINAR los datos anteriores.
F3: PARÁMETROS DE CONTROL para 8 tubos de ensayos.
F4: MEDICIÓN, donde nos muestra los resultados obtenidos por el
equipo

 Cuando nos encontramos en F3, vertimos la solución de la muestra 1,

con 5 Ppm de Azul de metileno (C16H18ClN3S) en un tubo de
ensayo, de manera que nuestros dedos estén sujetando la parte opaca
de este.
  Repetimos dos veces de modo que la solución este contenida en las
paredes del tubo de ensayo. A la tercera vez, colocamos la solución
para la medición con el espectrofotómetro.
 De tal manera que para esta primera muestra, se obtuvo como
longitud de onda inicial 𝝀 = 664.5 nm, y con absorbancia de 0.814.
 Asimismo, realizamos consecutivamente este procedimiento para las
siguientes muestras de 5,10, 15, 20, 30, 40 y Ppm de Azul de
metileno (C16H18CIN3S).
 Observamos en el espectrofotómetro que las curvas que se forman
para cada una de las muestras va en ascenso y simula una parábola
que abre hacia abajo (sentido negativo) en el eje de las ordenadas
“Y”.

6. RESULTADOS Y DISCUSION:

 Cálculo del volumen de la solución patrón.

Tabla N°01 “Datos Experimentales”
N° Volumen de la Solución Ppm Volumen de
Patrón (C16H18CIN3S) Agua (ml)
1 5 5 45
2 10 10 40
3 15 15 35
4 20 20 30
5 30 30 20
6 40 40 10

Empleamos la siguiente formula C1V1=C2V2 para hallar el volumen de la

solución patrón.

También tenemos en cuenta que cada frasco debe contener 50 ml entre (Ppm
de azul de metileno + H2O destilada), y para eso hacemos uso de la pipeta de
10ml y una probeta de 100ml.

 Para 1:
C1 = 5ppm de sol C16H18CIN3S; V1 = 50 mL; C2 = 50ppm sol
C16H18CIN3S ; V2=?
C1 V1 = C2 V2
(5)(50) = (50) V2
𝐕2= 5 mL
  Para 2:
C1 = 10ppm de sol C16H18CIN3S; V1 = 50 mL; C2 =50ppm sol
C16H18CIN3S; V2=?
C1 V1 = C2 V2
(10)(50) = (50) V2
𝐕2= 10mL
 Para 3:
C1 = 15ppm de sol C16H18CIN3S; V1 = 50 mL; C2 =50ppm sol
C16H18CIN3S; V2=?
C1 V1 = C2 V2
(15)(50) = (50) V2
𝐕2= 15mL

 Para 4:
C1 = 20ppm de sol C16H18CIN3S; V1 = 50 mL; C2 =50ppm sol
C16H18CIN3S; V2=?
C1 V1 = C2 V2
(20)(50) = (50) V2
𝐕2= 20mL
 Para 5:
C1 = 30ppm de sol C16H18CIN3S; V1 = 50 mL; C2 =50ppm sol
C16H18CIN3S; V2=?
C1 V1 = C2 V2
(30)(50) = (50) V2
𝐕2= 30mL
 Para 6:
C1 = 40ppm de sol C16H18CIN3S; V1 = 50 mL; C2 =50ppm sol
C16H18CIN3S; V2=?
C1 V1 = C2 V2
(40)(50) = (50) V2
𝐕2= 40mL
Datos de absorbancia en las muestras.

Tabla N°02 “Datos Obtenidos por la espectroscopia visible”

N° Ppm Longitud de Picos de

(C16H18CIN3S) Onda(nm) Absorbancia
1 5 664.5 0.814
2 10 664 1.433
3 15 665 2.183
4 20 664.5 2.500
5 30 669 2.761
6 40 675,5 2.883
 Grafica N°01 “Espectrograma de absorción del azul de metileno”

Concentracion ppmC 16 H 18 CIN 3 S VS

Absorvancia
CONCENTRACION PPM DE C16H18CIN3S

y = 10.659x2 - 25.28x + 20.277

45
40
35
30
25
20
15
10
5
0
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5
ABSORVANCIA

Grafica N°02 “ Curva de calibración del azul de metileno(polinómica)”

 La curva que más se ajusta a los puntos es una polinómica cuadrática cuya
ecuación es la siguiente: y = 10.659x2 – 25.28x + 20.277, siendo la variable
independiente “y” la concentración de azul de metileno en ppm y la variable
dependiente “x” la absorbancia.
 En grafica se observa que los puntos correspondientes a las concentraciones
de 5,10, y 15 ppm están más alejados que el resto de puntos, por lo que
hubiera sido conveniente realizar el experimento con más pruebas entre el
rango de concentración de 0 a 15 ppm, por ejemplo, cada 2.5 ppm en lugar
de cada 5 ppm.
7. CONCLUSIONES:
 Se logro la preparación correcta de las muestras en este experimento.
 Se logró aprender el procedimiento de análisis de espectroscopia visible.
 Se logro realizar un espectrograma de absorción para el azul de metileno.
 Se determino la grafica de la curva de calibración(ecuación polinómica)

8. RECOMENDACIONES:
 Medición de peso con la balanza
 Es recomendable pesar con la mayor precisión y exactitud posible.
 Tener cuidado al momento de agregar la muestra ya que podría caer dentro
de la balanza y posiblemente llegar a malograrla.
 El cuarto de pesaje debe estar limpio y libre de polvo.
 La mesa de pesaje debe ser sólida y sin vibraciones, corrientes de aire (como
por ej. la apertura constante de ventanas, puertas o encendido/apagado de
aire acondicionado) y tan nivelada como sea posible.
 Mantenga nivelada la balanza utilizando nivelador de burbuja.
 No instale la balanza cerca de calentadores, salidas de aire acondicionado.
 No instálela balanza en un lugar donde reciba la luz directa del sol.
 No utilice la balanza cerca de otro equipo que genere campos magnéticos.
 Una esquina es la mejor área para colocar su balanza puesto que es el lugar
menos dispuesto a vibraciones.
 Calibre su balanza antes de utilizarla y después de moverla a otro lugar.
 Volumen de las muestras
 Tratar de suministrar en los recipientes las cantidades indicadas si no fuese
así sería recomendable realizar el experimento nuevamente.
 Limpieza de los recipientes
 Antes de llevar a cabo el experimento es recomendable limpiar
correctamente los recipientes o instrumentos a utilizar (pipeta, probeta,
balón, fiola), no debe quedar ningún residuo de uso posterior antes de
realizar el experimento, ya que posiblemente si esto llega a suceder será
notable al momento de observar los resultados en el equipo
(espectrofotómetro).
 Uso correcto del espectrofotómetro
Antes de usar el equipo se recomienda leer el manual para aprender bien los
pasos a seguir en la medición.
 Hay que ser cuidadosos al usar el equipo.
 No olvidar enjuagar más de una vez el tubo de ensayo del equipo.
 Siempre secar correctamente por fuera el tubo de ensayo con mucho
cuidado sin que los dedos de la mano lleguen a tocar la parte clara de este.
 Colocar el tubo de ensayo dentro del espectrofotómetro sin rebalsar el
contenido y cerrar la tapa del equipo lentamente.
9. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:

(1) http://ocw.uc3m.es/ciencia-e-oin/caracterizacion-de-materiales (Trujillo, 11 de

Junio del 2018).
(2) .Askelad D. Ciencia e Ingeniería de los Materiales. 4ta ed. Internacional
Thomson Editores S.A. México D.F. México. 2004.
(3) http://materias.fi.uba.ar/6305/download/Espectrofotometria.pdf

10. ANEXOS:

 MATERIALES

Figura N°02” Recipientes de las muestras estándar”

Figura N°03” Probeta”

 Figura. N°4.” Fiola de 50ml”

Figura N°5. “Vaso de precipitación de 250ml”

Figura N° 6.” Pipeta de 10 ml”

Figura N° 7. “Agua Destilada”

 Equipos

Figura N°8 “Balanza Analitica”

Figura N°9 “Espectrofotómetro”