Examenes de laboratorio

para Hepatitis B y C
2015

Dr. Eliecer Villagra Cornejo

Sección Virus Hepáticos y Emergentes
Subdepartamento Enfermedades Virales
Laboratorio Biomédico Nacional de Referencia.
 Virus Hepatitis B
Antígeno “e” (HBeAg)
Antígeno core (HBcAg)
Antígenos de
superficie (HBsAg)

ADN

ADN Polimerasa
 Generalidades
• La hepatitis B es una enfermedad causada por VHB.

• Alrededor de 400 millones de personas persisten con

una infección crónica, con riesgo de evolucionar a
falla hepática, cirrosis y carcinoma hepatocelular

• Se estima que al año, es responsable de un millón de

muertes
 Prevalencia HBsAg en el Mundo

• Es una enfermedad de distribución universal que se presenta

en forma endémica en todo el mundo, en nuestro país la
endemia es baja

• La prevalencia de HBsAg (+), estimada para la población

adulta chilena de 17 a 45 años de edad es de 0.15% (*).

*Ministerio de Salud de Chile. Encuesta Nacional de Salud 2009.

 Evolución de la infección
por VHB

Niños Adultos
• 98% Crónico • 1-10% Crónico
• 2% Aguda • 90-99% Agudo
Métodos diagnósticos VHB
Test Rápido: Inmunocromatografía
• Detección de Antígeno
• Dispositivos individuales

Inmunoensayo: EIA y CLIA

• Detección Antígeno o Anticuerpo
• Pueden ser automatizados, semiautomatizados o manual.

Nucleic Acid Testing (NAT)

• Detección de partículas del ADN viral, independientemente
de la fase de la enfermedad
Algoritmo Confirmación
HBsAg

Antígeno de
superficie (HBsAg)

Anti-Core Total
(Anti-HBc total)
Serología

Neutralización
HBsAg
 Perfil serológico de los
marcadores (Fase Aguda)
Síntomas

HBeAg Anti-HBe

ADN
HBsAg Anti-HBc Total
Titulo

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 100

Semanas post a la exposición

 Perfil serológico de los
marcadores (Fase Crónica)
HBeAg Anti-HBe
ADN

HBsAg

Anti-HBc Total
Titulo

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 Años
Semanas post a la exposición
 Marcadores virales
Período Inf. Inf. pasada/ Inf.
Marcadores incubación aguda resuelta crónica Vacunación

HBsAg ± + - + -§
Anti-HBs - - + - +

Anti-HBc Total - ± + + -

Anti-HBc IgM - + - ±* -

HBeAg ± + - ± -

Anti-HBe - - ± ± -

* Puede encontrarse positivo en individuos crónicos.

§ vacunación reciente VHB (1-2 semanas), los test pueden dar un falso
positivo.
Resultado Confirmación
HBsAg
2012-2014
 Algoritmo confirmación de HBsAg
Doble Tamizaje HBsAg
Tamizaje HBsAg “A”

Reactividad ≥ 2.000 Reactividad < 2.000 Negativo

Anti-HB Core Total

Anti-HB Core Total

Positivo Negativo

Técnica Confirmatoria “A” Negativo Positivo

Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo

Informe: Positivo Informe: No

HBsAg Informe:
concluyente
Negativo HBsAg
 Algoritmo confirmación de HBsAg
Doble Tamizaje HBsAg
Tamizaje HBsAg “A”

Reactividad ≥ 2.000 Reactividad < 2.000 Negativo

Anti-HB Core Total

Anti-HB Core Total

Positivo Negativo

Técnica Confirmatoria “A” Negativo Positivo

Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo

Informe: Positivo Informe: No

HBsAg Informe:
concluyente
Negativo HBsAg
 Algoritmo confirmación de HBsAg
Doble Tamizaje HBsAg
Tamizaje HBsAg “A”

Reactividad ≥ 2.000 Reactividad < 2.000 Negativo

Anti-HB Core Total

Anti-HB Core Total

Positivo Negativo

Técnica Confirmatoria “A” Negativo Positivo

Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo

Informe: Positivo Informe: No

HBsAg Informe:
concluyente
Negativo HBsAg
 Algoritmo confirmación de HBsAg
Doble Tamizaje HBsAg
Tamizaje HBsAg “A”

Reactividad ≥ 2.000 Reactividad < 2.000 Negativo

Anti-HB Core Total

Anti-HB Core Total

Positivo Negativo

Técnica Confirmatoria “A” Negativo Positivo

Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo

Informe: Positivo Informe: No

HBsAg Informe:
concluyente
Negativo HBsAg
 Algoritmo confirmación de HBsAg
Doble Tamizaje HBsAg
Tamizaje HBsAg “A”

Reactividad ≥ 2.000 Reactividad < 2.000 Negativo

Anti-HB Core Total

Anti-HB Core Total

Positivo Negativo

Técnica Confirmatoria “A” Negativo Positivo

Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo

Informe: Positivo Informe: No

HBsAg Informe:
concluyente
Negativo HBsAg
 EVALUACIÓN TECNICAS
COMERCIALES DE HBsAg (1)
RECOMENDADO
TECNICA FABRICANTE BS LAB.

Murex HBsAg version 3 Murex X X

Bioelisa HBsAg Biokit S.A. X X
HBsAg Uni Form II Organon Teknika X X
IMX HBsAg Abbott X X
Merck Magia HBsAg Biotrol Diagnostic X X
ETI-MAK-4 (HBsAg) Dia Sorin s.r.l. X X
Inmulite (**) Diagnostic Products X X
Corporation
Hepatitis B sAg/eAg (**) Glaxo SmithKline X
Hepatitis B (HBsAg) Elisa Wiener Lab. X X
 EVALUACIÓN TECNICAS
COMERCIALES DE HBsAg (2)
AÑO TECNICA FABRICANTE RECOMENDADO

BS LAB.
1999 Axsym System HBsAg Abbott X X

1999 HBsAg ELISA Test System3 Ortho X X

2000 Cobas core HBsAg II EIA Roche X X

2001 Vitros Kit HBsAg Ortho X X

2003 Bioelisa HBsAg colour Biokit S. A. X X

2003 VIDAS HBsAg Ultra Biomerieux X X

2004 Monolisa AgHBs Plus Bio-Rad X X

 EVALUACIÓN TECNICAS
COMERCIALES DE HBsAg (3)
RECOMENDADO
AÑO TECNICA FABRICANTE
BS LAB.

2004 Monolisa HBsAg Ultra Bio Rad X X

2005 Architect HBsAg Abbott X X

2005 Hepanostika HBsAg Ultra Biomerieux X X

2007 Vikia HBsAg (**) Biomerieux X X

2008 Smart Comb HBsAg (**) Orgenics Ltd. X X

2008 Cobas-Elecsys HBsAg Roche X X

2008 Boioelisa HBsAg 3.0 Biokit S.A. X X

2012 Architect HBsAg II * Abbott X X

2013 Liaison XL Murex HBsAg Quant DiaSorin X X

2013 Access HBsAg Galénica X X
 Virus Hepatitis C (VHC)
Familia Flaviviridae. Género Hepacivirus

55 -60 nm
 Características VHC

Familia Flaviviridae. Género Hepacivirus

Descrito por Choo y Hougton en 1989

Su genoma:

Una molécula de RNA monohebra lineal.

Polaridad positiva.
9.600 bases de longitud
 Virus de Hepatitis C

El VHC es el agente más importante

causante de las hepatitis no A no B
postransfusionales

Vía de transmisión parenteral

(principalmente)

Primera causa de transplante hepático

Región estructural Región no estructural

Knipe, David M.; Howley, Peter M

2007 Lippincott Williams & Wilkins
 Diagnóstico de Infección por VHC

• Detección de anticuerpos: ELISAs (3ª

generación)

• Detección de Ag/Ac: ELISAs (4ª generación)

• Técnicas suplementarias: RIBA o LIA

• Detección genómica: RT-PCR

ELISAS VHC 3 GENERACIÓN
ELISAS VHC 4 GENERACIÓN
INMUNOBLOT VHC (Técnica suplementaria) INNOLIA
 RT-PCR VHC

•Amplificación de la parte más conservada del genoma (región 5’ UTR o 5’ no codificante)

Evolución de la infección por VHC
Estabilidad de las muestras de Suero y Plasma para
realización de algoritmo de confirmación de VHC

Reducción del titulo de RNA en plasma guardado a 4ºC y 25ºC por 7 días

Tº 4ºC 25ºC

% RNA 70,9% 25,1%

- Luego de 4 ciclos de congelación - descongelación del plasma el

RNA viral se redujo a 61,9%

Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 2006 Dec;14(6):1238-43.

[Stability of hepatitis C virus RNA in various processing and storage conditions].
Liu CL1, Ren FR, Lü QS, Liu JH, Zhuang H.
Author information
1Department of Blood Transfusion, General Hospital of PLA, Beijing 100853, China.
RESULTADOS INDETERMINADOS CON TECNICAS
SUPLEMENTARIAS DE INMUNOBLOT

- Los resultados indeterminados en poblaciones de baja prevalencia

tales como los donantes de sangre pueden estar relacionados con
reactividades cruzadas con antígenos virales o con anticuerpos en
caso de desordenes inmunológicos.

- Resultados falsos – negativos pueden obtenerse en pacientes

inmunodeprimidos, pacientes con VIH, pacientes receptores de
órganos solidos, hipoglobulinemia o agamaglobulinemia y
pacientes en hemodialisis.
 EVALUACIÓN TECNICAS
COMERCIALES DE VHC(1)

RECOMENDADO
TECNICA FABRICANTE
BS LAB.

ETI-AB-HCVK-3 (anti-VHC) Dia Sorin S. A. X X

Cobas Core Anti-VHC EIA II Roche X X

Monolisa Anti-HCV plus (V2) Bio-Rad X X

Test ELISA para Hepatitis C Bios Chile I.G.S.A X X

 EVALUACIÓN TECNICAS
COMERCIALES DE VHC (2)
RECOMENDADO
AÑO TECNICA FABRICANTE
BS LAB.

1998 Serodia-HCV (**) Fujirebio inc. X X

1999 Enzymuntest HCV Boehriger X X

1999 HCV 3.0 Elisa Ortho Ortho X X

1999 IMX HCV 3.0 Abbott X X

1999 Axsym System HCV 3.0 Abbott X X

1999 Murex anti HCV 4.0 Abbott X X

2000 Cobas Core Anti-VHC EIA Roche X X

2001 Vitros Anti-VHC Ortho X X

 EVALUACIÓN TECNICAS
COMERCIALES DE VHC (3)
RECOMENDADO
AÑO TECNICA FABRICANTE BS LAB.
2006 Architect anti-VHC Abbott X X
2006 Murex HCV Ag/Ab combination Abbott X X
2006 Hepanostika HCV Ultra Biomerieux X X
2006 Advia Centaur Anti-HCV Bayer X X
2006 Monolisa HCV Ag/Ab ultra Bio-Rad X X
2008 Bioelisa HCV Biokit X X
2008 SmartComb HCV (**) Organics. Ltd. X X
2008 Cobas Elecsys Anti-HCV Roche X X

2009 Test ELISA HCV Acon X X

2012 Cobas Elecsys Anti –HCV II Roche X X
2012 Vidas Anti-VHC Biomerieux X X
2013 Liaison XL Murex HCV Ab DiaSorin X X