CUESTIONES Y PROBLEMAS

26-1 DEFINIR

a) ELUCIÓN

Implica el transporte de una especie atreves de una columna por la adición de la fase móvil.
Procedimiento en el que la fase móvil se pasa de forma continua a través o a lo largo del lecho
cromatográfico y la muestra se suministra al sistema de forma discreta, como una pequeña
cantidad en un tiempo breve. Es el proceso por el cual todos los solutos terminan por
abandonar la columna.

b) FASE MÓVIL

Es la fase que se mueve en una dirección definida. Puede ser un líquido (cromatografía de
líquidos o CEC). un gas (cromatografía de gases) o un fluido supercrítico (cromatografía de
fluidos supercríticos). La muestra que está siendo separada/analizada (formada de analito/s y
el disolvente) se inyecta en la fase móvil que se mueve a través de la columna. En el caso de la
cromatografía líquida de alta resolución, HPLC, la fase móvil es un disolvente no-polar como
el hexano (fase normal) o bien algún disolvente polar (cromatografía de fase reversa).

c) FASE ESTACIONARIA

Es la sustancia que está fija en una posición durante la cromatografía. Un ejemplo es la capa
de gel de sílice en la cromatografía en capa fina.

d) COEFICIENTE DE DISTRIBUCION

Los equilibrios de distribución implicados en cromatografía se describen por ecuaciones

simples que suponen la transferencia de un analito entre las fases estacionaria y móvil. Así
para una especie A

A móvil ⇔A estacionaria

La constante de este equilibrio K se denomina, constante de distribución y se define como:

K = CS/ CM

Donde CS es la concentración molar de analito en la fase estacionaria y CM es la concentración

molar de analito en la fase móvil.

e) TIEMPO DE RETENCION

Es el tiempo característico que tarda un analito particular en pasar a través del sistema (desde
la columna de entrada hasta el detector) bajo las condiciones fijadas. Véase también: Índice de
retención de Kovats
f) FACTOR DE RETENCION

Las características de retención de los componentes suelen describirse en la práctica por el

factor de retención o factor de capacidad, k', definido como,

k'=masadesolutoS / masadesolutoM=mS/mM

Y relacionado con el coeficiente de distribución y los volúmenes de fase móvil y fase

estacionaria por:

K=AS/AM=mS/VM /mM/VM=mS/mM*VM/VS=k'VM/VS

Donde VM y VS son los volúmenes de fase móvil y estacionaria respectivamente. La relación

VM/VS se denomina relación de fases, β, y es uno de los parámetros que se utilizan para
caracterizar una columna cromatográfico, particularmente en cromatografía de gases.

g) FACTOR DE SELECTIVIDAD

El factor de capacidad α de una columna, como su nombre lo indica, es un término que define
que tan selectiva es una columna para separar dos picos. Es de hacer notar, que la columna
puede ser selectiva a una separación, que se identifica por un valor alto de este factor, pero si
no se considera la mejora de los parámetros que pueden afectar el ancho de un pico, aun así
no se lograría la separación de los mismos.

Entonces el factor de selectividad de una columna para dos especies A y B se define como:

α = k’B /k’A

Donde k’B es el factor de capacidad del compuesto B, que es el más retenido y k’A es el factor
de capacidad del compuesto A, que es el menos retenido.

Con esta definición α siempre es mayor que la unidad.

En términos tomados a partir de un cromatograma α se puede calcular como sigue:

α = (tR)B – tM /(tR)A –tM

h) ALTURA DE PLATO
Se utilizan dos términos afines con frecuencia como medida cuantitativa de la eficacia de una
columna cromatográfica: la altura equivalente de plato teórico o H y el número de platos
teóricos N. Los dos están relacionados por la ecuación:

N=L/H

Donde L es la longitud (normalmente en centímetros) del relleno de la columna.

La eficacia de la columna cromatográfica aumenta cuando mayor es el número de platos, y

cuando menor es la altura de plato.

La evaluación experimental de H y N se puede realizar a partir de las siguientes ecuaciones:

H = LW2/ 16 tR2

Donde L es la longitud de la columna, W es el ancho del pico a considerar y tR es su tiempo de

retención.

N = tR16 (tR/W)2

i) DIFUSIÓN LONGITUDINAL

Este es un término más importante en cromatografía de gases. Se debe a que las moléculas del
soluto se mueven en distintas direcciones en la fase estacionaria debido a la porosidad de las
partículas que la forman. Esto hace que algunas moléculas del soluto salgan retrasadas de la
columna respecto a la mayoría

j) DIFUSIÓN EN REMOLINO

Se debe a los distintos caminos que toman las moléculas del soluto al atravesar la fase
estacionaria. Aquellas partículas de soluto que atraviesen canales más amplios, viajarán más
rápido con la fase móvil, y aquellas que vayan por canales más estrechos viajarán más
lentamente.

k) RESOLUCION DE UNA COLUMNA

La resolución RS de una columna constituye una medida cuantitativa de su capacidad para

separar dos analitos, en este término si se toma en cuenta el ensanchamiento de los picos, así
que la magnitud de este valor si permite asegurar la separación de dos picos.

Rs = 2[(tR)B – (tR)A] / WA + WB

Donde WA y WB son los anchos de banda de las bandas A y B respectivamente.

Estadísticamente se puede demostrar que una resolución de 1,5 permite una separación
esencialmente completa de los dos componentes, mientras que no es así con una resolución
de 0,75, por supuesto siempre y cuando las bandas sean gausseanas, es decir simétricas en
ambos lados. Así con una resolución de 1,0; la zona de A contiene aproximadamente 4% de B,
y la zona B contiene una cantidad similar de A. Con una resolución de 1,5, el solapamiento es
del orden de un 0,3%

La resolución expresada en términos teóricos se presenta a continuación:

Rs = √N / 4 (α / α – 1)2 (1+k’B / k’B)

l) ELUYENTE

Es la fase móvil que atraviesa la columna.

Eluyentes polares: Arrastran más eficazmente los compuestos más retenidos en la fase
estacionaria. Arrastran más rápidamente a los compuestos.

Eluyentes menos polares: Arrastran muy lentamente a los compuestos.

26-2 DESCRIBIR EL PROBLEMA GENERAL DE LA ELUCION

La siguiente figura muestra unos cromatogramas hipotéticos para una mezcla de seis
componentes formada por tres pares de sustancias que difieren ampliamente en sus
coeficientes de distribución y por tanto en sus factores de retención. En el cromatograma (a),
las condiciones se han ajustado de tal forma que los factores de retención de los componentes
1 y 2 están en el intervalo óptimo de 2 a 5. Sin embargo, los factores de retención
correspondientes a los otros componentes están muy alejados del intervalo óptimo. De este
modo, los picos de los componentes 5 y 6aparecen tras un tiempo desmesurado; además esos
picos están tan ensanchados que puede ser difícil identificarlos inequívocamente. Como se
muestra en el cromatograma (b), el cambio de las condiciones para optimizar la separación de
los componentes 5 y 6 hace que los picos de los cuatro primeros componentes se agrupen de
tal modo que su resolución no sea satisfactoria. Sin embargo, en estas circunstancias el tiempo
de elución resulta ser ideal. En una tercera serie de condiciones en las que los valores de k’
son óptimos para los componentes 3 y 4 se obtiene el cromatograma (c). De nuevo, la
separación de los otros dos pares de componentes no es enteramente satisfactoria.

El fenómeno ilustrado en la figura anterior se da con la suficiente frecuencia como para darle
un nombre el problema general de la elución.

26-3 ENUMERAR LAS VARIABLES QUE ORIGINAN EL ENSANCHAMIENTO DE BANDA:

La teoría cinética considera que el ensanchamiento de las bandas (o picos) cromatográficos se

produce como consecuencia de que los distintos procesos de transferencia de masa durante el
desplazamiento de una especie a lo largo de la columna ocurren a velocidad finita. Según esta
teoría, la forma de los picos depende de los siguientes factores:

* Difusión por turbulencia y trayectorias seguidas por la fase móvil.

* Difusión longitudinal del soluto a lo largo de la columna.

* Equilibrio del soluto entre las fases móvil y estacionaria no suficientemente rápido.
Los tres factores mencionados normalmente se identifican con los parámetros A, B y C y su
contribución al ensanchamiento de las bandas cromatográficas conducen a la ecuación de van
Deemter:

H=A+B/u+Cu

Donde u es la velocidad lineal media de la fase móvil (u=L/tM; L=longitud de la columna;

tM=tiempo muerto). Este modelo es el clásico, y puede considerarse anticuado, si bien, se
expondrá aquí por su sencillez y valor didáctico. Por otra parte, la teoría se desarrolló
inicialmente para cromatografía de gases con columnas empacadas, pero puede extenderse
sin demasiadas dificultades a otros tipos de cromatografía, incluyendo columnas tubulares
abiertas e incluso a cromatografía plana.

26-4 ¿CUAL ES LA DIFERENCIA ENTRE LA CROMATOGRAFIA GAS –LIQUIDO Y LIQUIDO –

LIQUIDO?

La cromatografía gas-líquido el método es gas líquido donde la fase estacionaria es líquido

absorbido sobre un sólido el tipo de equilibrio es la distribución entre un gas y un líquido, en
cambio la cromatografía de líquidos se lo realiza por un método específico liquido-liquido o
reparto donde la fase estacionaria es un líquido absorbido sobre un sólido y el tipo de
equilibrio es la distribución entre líquidos inmiscibles.

26-5¿CUAL ES LA DIFERENCIA ENTRE LA CROMATOGRAFIA LIQUIDO–LIQUIDO Y

LIQUIDO – SOLIDO

La cromatografía de líquidos se lo realiza por un método específico liquido-liquido o reparto

donde la fase estacionaria es un líquido absorbido sobre un sólido y el tipo de equilibrio es la
distribución entre líquidos inmiscibles, en cambio la cromatografía de líquido-solido se lo
realiza por un método específico liquido-solido o adsorción donde la fase estacionaria es un
sólido y el tipo de equilibrio es la adsorción.

26-6 ¿QUE VARIABLES SON LAS QUE MAS PROBABLEMENTE AFECTAN AL VALOR DE α
CORRESPONDIENTE A UN PAR DE ANALITOS?

Cuando α se aproxima a la unidad, optimizar k’ y aumentar N no suele ser suficiente para

conseguir una separación satisfactoria de dos solutos en un tiempo razonable. En estas
circunstancias se ha de buscar un procedimiento para aumentar α mientras k’ se mantiene en
el intervalo óptimo de 1 a 10. Se dispone de varias opciones en orden decreciente de
conveniencia, determinada por sus expectativas y comodidad, las opciones incluyen: 1)
cambiar la composición de la fase móvil, incluyendo los cambios en el pH; 2) cambiar la
temperatura de la columna; 3) cambiar la naturaleza de la fase estacionaria, 4) utilizar efectos
químicos especiales.

26-7 ¿CÓMO PUEDE MODIFICARSE EL FACTOR DE RETENCION DE UN SOLUTO?

Con fases móviles gaseosas k’ puede modificarse y/o mejorarse a menudo aumentando la
temperatura. Con fases móviles liquidas, el cambio en la composición del disolvente muchas
veces permite la manipulación de k’ de tal manera que se obtiene mejores separaciones.

26-8 DESCIRBIR UN METODO PARA LA DETERMINACION DEL NÚMERO DE PLATOS DE

UNA COLUMNA

N = 16 (tR/W)2

De este modo, N se puede calcular a partir de dos medidas de tiempo tR y W para calcular H
se ha de conocer también la longitud del relleno de la columna L.

Otro método para evaluar N, que algunos autores creen más fiable se basa en determinar
W½, la anchura del pico a la mitad de su altura máxima. El número de platos viene entonces
dado por:

N = 5.54 (tR/W½)2

El número de platos teóricos N y la altura de plato H se utilizan con frecuencia, tanto en la

bibliografía como por los fabricantes de instrumentos, para evaluar la eficiencia de la
columna. Para que esos números tengan sentido en la comparación de dos columnas es
esencial que se haya determinado utilizando el mismo compuesto.

26-9 ¿CUÁLES SON LOS EFECTOS DE LA VARIACION DE TEMPERATURA EN LOS

CROMATOGRAMAS?

Los incrementos en la temperatura normalmente causan aumentos en k’ pero tienen poca

influencia sobre los valores deα en cromatografía liquido – líquido y liquido – solido. Por el
contrario en la cromatografía de intercambio iónico puede tener efectos lo suficientemente
grandes como para explorar esta valiosa opción antes que recurrir al cabio del relleno de la
columna.

En cromatografía de gases, el incremento de la temperatura permite conseguir las condiciones

óptimas para las separaciones.

26-10 ¿PORQUE EL MINIMO EN EL GRAFICO DE LA ALTURA DE PLATO FRENTE EL

CAUDAL SE ENCUENTRA A MENORES VALORES DE CAUDAL EN CROMATOGRAFIA DE
LIQUIDOS QUE EN CROMATOGRAFIA DE GASES?

Los mínimos para la cromatografía de líquidos generalmente se dan con caudales bastante
menores que para la cromatografía de gases y a menudo son tan bajos que en las condiciones
de trabajo habituales no llegan a observarse. Tal como se indica en la figura siguiente las
velocidades lineales de la fase móvil en cromatografía de líquidos son significativamente
menores que las que se utilizan en cromatografía de gases. Esto significa que las separaciones
por cromatografía de gases se completan en tiempos menores que las separaciones por
cromatografía de líquidos.
26-11 ¿QUÉ ES LA ELUCION CON GRADIENTE?

Cuando una muestra está constituida por un gran número de componentes, puede ocurrir que
se consigan las condiciones óptimas para la separación de algunos, pero ello vaya en
detrimento de otros. En estos casos suele recurrirse a cambiar las condiciones mientras se
realiza la separación, para lo cual, puede utilizarse la elución con gradiente (variación gradual
de la composición de la fase móvil durante la elución) o la programación de temperatura
(variación de la temperatura durante la elución).

26-12 LOS SIGUIENTES DATOS CORRESPONDEN A UNA COLUMNA PARA

CROMATOGRAFIA DE LIQUIDOS:

Longitud del relleno=24.7 cm

Caudal =0.313 mL/min

VM=1.37 mL

VS=0.164 mL

El cromatograma de una mezcla de especies A, B, C y D proporciona los siguientes datos:

TIEMPO DE RETENCIÓN, ANCHURA DEL PICO EN LA

MIN BASE (W), MIN
No retenido 3.1 -
A 5.4 0.41
B 13.3 1.07
C 14.1 1.16
D 21.6 1.72

Calcular:

a) El número de platos para cada pico.

N = 16 (tR/W)2

NA = 16 (5.4/0.41)2 = 2775.49

NB = 16 (13.3/1.07)2 = 2472.04

NC = 16 (14.1/1.16)2 = 2363.97

ND = 16 (21.6/1.72)2 = 2523.31

b) La media y la desviación estándar de N.

Ṅ = (2775.49 + 2472.04 + 2363.97 + 2523.31)/4 = 2533.65

 ∑𝐧 (𝐍𝐢 − Ṅ)𝟐
𝐬 = √ 𝐢=𝟏
𝐧−𝟏

(2775.49 − 2533.7)2 + (2472.04 − 2533.7)2 + (2363.97 − 2533.7)2 + (2523.31 − 2533.7)2

s= √
4−1

s = 174.34

c) La altura de plato de la columna.

H = L/N

24.7cm
𝐇= = 9.749X10−3cm
2533.65

26-13 CON LOS DATOS DEL PROBLEMA 26-12, CALCULAR PARA LOS PICOS A, B, C Y D

a) El factor de retención.

k = (tR - tM)/tM

kA = (5.4 – 3.1)/3.1 = 0.74

kB = (13.3 – 3.1)/3.1 = 3.3

kC = (14.1 – 3.1)/3.1 = 3.5

kD = (21.6 – 3.1)/3.1 = 6.0

b) El coeficiente de distribución.

K = k(VM/VS)

VM/VS = 1.37/0.164 = 8.35

KA = 0.74 * 8.35 = 6.2

KB = 3.3 * 8.35 = 27

KC = 3.5 * 8.35 = 30

KD = 6.0 * 8.35 = 50

26-14 CON LOS DATOS DEL PROBLEMA 26.12 PARA LAS ESPECIES B Y C, CALCULAR

a) La resolución.
 𝟐[(𝐭 𝐑 )𝐂 − (𝐭 𝐑 )𝐁 ]
𝐑𝐒 =
𝐖𝐁 + 𝐖𝐂

RS = (2(14.1-13.3)/(1.07+1.16)) = 0.72

b) El factor de selectividad, α.

(𝐭 𝐑 )𝐂 − 𝐭 𝐌
∝𝐂,𝐁 =
(𝐭 𝐑 )𝐁 − 𝐭 𝐌

αC,B = (14.1 - 3.1)/(13.3 – 3.1) = 1.8

c) La longitud de columna necesaria para tener una resolución de 1.5.

(𝐑 𝐒 )𝟏 √𝐍𝟏 𝟎. 𝟕𝟏𝟕 √𝟐𝟓𝟑𝟒

= = =
(𝐑 𝐒 )𝟐 √𝐍𝟐 𝟏. 𝟓 √ 𝐍𝟐

N2= 2534 * (1.5)2/(0.717)2 = 11090 platos

L = HxN = 9.749 * 10-3 * 11090 = 108cm

d) El tiempo necesario para separar B y C con una resolución de 1.5.

(𝐭 𝐑 )𝟏 (𝐑 𝐒 )𝟐𝟏 𝟏𝟒. 𝟏 (𝟎. 𝟕𝟏𝟕)𝟐

= = =
(𝐭 𝐑 )𝟐 (𝐑 𝐒 )𝟐𝟐 (𝐭 𝐑 )𝟐 (𝟏. 𝟓)𝟐

(tR)2 = 14.1 * (1.5)2/(0.717)2 = 61.7min

26-15 CON LOS DATOS DEL PROBLEMA 26.12 PARA LAS ESPECIES C Y D, CALCULAR

a) La resolución.

𝟐[(𝐭 𝐑 )𝐃 − (𝐭 𝐑 )𝐂 ]
𝐑𝐒 =
𝐖𝐂 + 𝐖𝐃

RS = (2(21.6 – 14.1)/(1.72 + 1.16)) = 5.2

b) La longitud de columna necesaria para tener una resolución de 1.5.

N2= 2534 * (1.5)2/(5.21)2 = 210 platos

L = HN = 9.749 * 10-3 * 210 = 2cm

26-16 CON UN CROMATOGRAFO GAS-LIQUIDO Y CON UNA COLUMNA DE RELLENO DE

40cm SE OBTUVIERON LOS SIGUIENTES DATOS:
Compuesto tR, min W, min
Aire 1.9 -
Metilciclohexano 10.0 0.76
Metilciclohexeno 10.9 0.82
Tolueno 13.4 1.06
Calcular

a) El número de platos promedio a partir de los datos.

N = 16 (tR/W)2

NA = 16 (10/0.76)2 = 2770.08

NB = 16 (10.9/0.82)2 = 2827.13

NC = 16 (13.4/1.06)2 = 2556.92

Ṅ = (2770.08 + 2827.13 + 2556.92)/3 = 2718.04

b) La desviación estándar para el promedio en a).

∑𝐧 (𝐍𝐢 − Ṅ)𝟐
𝐬 = √ 𝐢=𝟏
𝐧−𝟏

(2770.08 − 2718.04)2 + (2827.13 − 2718.04)2 + (2556.92 − 2718.04)2

s= √
3−1

s = 142.42

c) La altura promedio de plato para la columna. H=

L/N

H = 40 cm / 2718.04 platos = 0.0147 cm

26-17 EN RELACIÓN AL PROBLEMA 26-16, CALCULAR LA RESOLUCIÓN PARA

2[(t R )2 − (t R )1 ]
RS =
W1 + W2

a) El metilciclohexeno y el metilciclohexano.

RS = (2(10.9-10.0)/(0.82+0.76)) = 1.14

b) El metilciclohexeno y el tolueno.

RS = (2(13.4-10.9)/(1.06+0.82)) = 2.66

c) El metilciclohexano y el tolueno.
RS = (2(13.4-10.0)/(1.06+0.76)) = 3.74

26-18 SI FUERA NECESARIA UNA RESOLUCION DE 1.5 PARA RESOLVER EL

METILCICLOHEXANO Y EL METILCICLOHEXENO EN EL PROBLEMA 26-16

a) ¿Cuántos platos se necesitarían?

(𝐑 𝐒 )𝟏 √𝐍𝟏
=
(𝐑 𝐒 )𝟐 √𝐍𝟐

N2= 2718.14 * (1.5)2/(1.14)2 = 4705.92 o 4.7*103 platos

b) ¿Qué longitud debería tener la columna si se utiliza el mismo relleno?

L=N*H

L = 4.7*103 * 0.0147 = 69.09cm

c) ¿Cuál sería el tiempo de retención del metilciclohexeno en la columna cuya

longitud se ha calculado en el problema 26-18b?

(𝐭 𝐑 )𝟏 (𝐑 𝐒 )𝟐𝟏
=
(𝐭 𝐑 )𝟐 (𝐑 𝐒 )𝟐𝟐

t2= 10.9 * (1.5)2/(1.14)2 = 18.87min

26-19 SI VS Y VM PARA LA COLUMNA DEL PROBLEMA 26-16 FUERON RESPECTIVAMENTE

19.6 Y 62.6 mL Y EL PICO DE AIRE NO RETENIDO APARECIO A LOS 1.9min, CALCULAR

a) El factor de retención para cada uno de los tres compuestos.

k1 = (10.0 – 1.9)/1.9 = 4.26

k2 = (10.9 – 1.9)/1.9 = 4.74

k3 = (13.4 – 1.9)/1.9 = 6.05

b) El coeficiente de distribución para cada uno de los tres compuestos.

K1 = 4.26*62.6/19.6 = 13.61

K2 = 4.74*62.6/19.6 = 15.14

K3 = 6.05*62.6/19.6 = 19.32

c) El factor de selectividad para el metilciclohexano y metilciclohexeno.

(𝐭 𝐑 )𝟐 − 𝐭 𝐌
∝𝟏,𝟐 =
(𝐭 𝐑 )𝟏 − 𝐭 𝐌
α1,2 = (10.9 – 1.9)/(10.0 – 1.9) = 1.11

d) Factor de selectividad para el metilciclohexeno y el tolueno.

(𝐭 𝐑 )𝟐 − 𝐭 𝐌
∝𝟏,𝟐 =
(𝐭 𝐑 )𝟏 − 𝐭 𝐌

α1,2 = (13.4 – 1.9)/(10.9 – 1.9) = 1.28

26-20 ENUMERAR LAS VARIABLES QUE CONDUCEN A) AL ENSANCHAMIENTO DE BANDA

Y B) A LA SEPARACIÓN DE LAS BANDAS

La teoría cinética considera que el ensanchamiento de las bandas (o picos) cromatográficos se

produce como consecuencia de que los distintos procesos de transferencia de masa durante el
desplazamiento de una especie a lo largo de la columna ocurren a velocidad finita. Según esta
teoría, la forma de los picos depende de los siguientes factores:

* Difusión por turbulencia y trayectorias seguidas por la fase móvil.

* Difusión longitudinal del soluto a lo largo de la columna.

* Equilibrio del soluto entre las fases móvil y estacionaria no suficientemente rápido.

Las variables que conducen la separación de las bandas:

 Constantes de distribución

 Tiempo de Retención

 La velocidad de migración del soluto: el factor de retención

 Velocidades de migración relativas: el factor de selectividad

26-21¿CUAL SERIA EL EFECTO SOBRE UN PICO CROMATOGRAFICO DE LA

INTRODUCCION DE LA MUESTRA A UNA VELOCIDAD DEMASIADO LENTA?

La altura de un pico cromatográfico se obtiene uniendo las líneas base a cada lado del pico por
una línea recta y midiendo la distancia vertical desde esta línea al pico. Esta medida
normalmente se puede hacer con una precisión razonablemente buena. Es importante
considerar, sin embargo que las alturas de pico están inversamente relacionadas con las
anchuras de pico. Por ello, con las alturas de pico se obtienen resultados exactos solo si las
variaciones en las condiciones de la columna durante el tiempo necesario para obtener los
cromatogramas de la muestra y de los patrones no alteran las anchuras de pico. Las variables
que deben controlarse estrechamente son la temperatura de la columna, el caudal del
eluyente y la velocidad de inyección de la muestra. Además se ha de tener mucho cuidado
para evitar la sobrecarga de la columna. El efecto de la velocidad de inyección de la muestra
es particularmente crítico para los primeros picos del cromatograma. Al efectuar la inyección
con jeringa no es extraño que se originen errores relativos del 5 al 10 por 100.

DETECTORES, Ultravioleta (UV), Fluorescencia, Espectrometría de masas, Detección del índice

de refracción (IR).

26-22 A partir de estudios de distribución se sabe que las especies M y N tienen

coeficientes de distribución entre el agua y el hexano de 6.01 Y 6,20 (K=[M]H2O/[M]hex).
Las dos especies se separan por elución con hexano en una columna rellena con el gel
de sílice que contiene agua adsorbida. La relación VS/VM para el relleno resulta ser de
0.422.

a) Calcular el factor de retención para cada uno de los solutos.

𝐕𝐒
𝐤 = 𝐊𝐱
𝐕𝐌

kA = 6.01 x 0.422= 2.54

kB = 6.20 x 0.422= 2.62

b) Calcular el factor de selectividad.

𝐤𝐁
∝ =
𝐤𝐀

∝ = 2.62/2.54 = 1.03

c) ¿Cuántos platos se necesitaran para tener una resolución de 1.5?

N = 16RS2(∝/∝-1)2 x (1+ kB/kB)2

N=16 x 1.52 x (1.03/1.03-1)2 x (1+2.62/2.62)2

N= 8.10x104

d) ¿Qué longitud de columna se necesita si la altura de plato para este relleno es

2.2x10-3 cm?

L=N*H

L = 8.10x104 x 2.2x10-3 cm

L = 1.78x102 cm.

e) Si se utiliza una velocidad lineal de flujo de 7.10cm/min, que tiempo se

necesitara para eluir las dos especies.

u = L/tM
 tM = L/u

tM = 1.78x102 cm/7.10cm/min

tM =25.07 min.

26-23 Repetir los cálculos del problema 26.22 suponiendo que KM=5.81 Y KN=6.20.

a) Calcular el factor de retención para cada uno de los solutos.

𝐕𝐒
𝐤 = 𝐊𝐱
𝐕𝐌

kA = 5.81 x 0.422= 2.45

kB = 6.20 x 0.422= 2.62

b) Calcular el factor de selectividad.

𝐤𝐁
∝ =
𝐤𝐀

∝ = 2.62/2.45 = 1.07

c) ¿Cuántos platos se necesitaran para tener una resolución de 1.5?

N = 16RS2(∝/∝-1)2 x (1+ kB/kB)2

N=16 x 1.52 x (1.07/1.07-1)2 x (1+2.62/2.62)2

N= 1.60x104

d) ¿Qué longitud de columna se necesita si la altura de plato para este relleno es

2.2x10-3 cm?

L=N*H

L = 1.60x104 x 2.2x10-3 cm

L = 35.2cm.

e) Si se utiliza una velocidad lineal de flujo de 7.10cm/min, que tiempo se necesitara

para eluir las dos especies.

u = L/tM

tM = L/u

tM = 35.2 cm/7.10cm/min
tM =4.96 min.

26.24 Las aéreas relativas de pico obtenidas por cromatografía de gases para una
mezcla de acetato de metilo, propionato de metilo y n-butirato de metilo fueron 17.6;
44,7 y 31.1, respectivamente.

Calcular el porcentaje de cada compuesto si las respuestas relativas de detección fueron

respectivamente 0.65; 0.83 y 0.92.

Compuesto Área relativa de pico Resp relativa del detector

Acetato de metilo 17.6 0.65
Propionato de metilo 44.7 0.83
n-butirato de metilo 31.1 0.92

Compuesto Área * Detector %

Acetato de metilo 17.6 * 0.65 = 11.440 11.440/77.153*100 = 14.83
Propionato de metilo 44.7 * 0.83 = 37.101 37.101/77.153*100 = 48.09
n-butirato de metilo 31.1 * 0.92 = 28.612 28.612/77.153*100 = 37.08
Total=77.153

26-25 LAS AREAS RELATIVAS DE PICO PARA LOS CINCO PICOS OBTENIDOS POR
CROMATOGRAFIA DE GASES EN LA SEPARACION DE 5 ESTEROIDES SE MUESTRAN MAS
ABAJO, ASI COMO LAS RESPUESTAS RELATIVAS DEL DETECTOR A LOS 5 COMPUESTOS.
CALCULAR EL PORCENTAJE DE CADA COMPUESTO EN LA MEZCLA.

Compuesto Área relativa de pico Resp relativa del detector

Dehidroepiandrosterona 27.6 0.70
Estradiol 32.4 0.72
Estrona 47.1 0.75
Testosterona 40.6 0.73
Estriol 27.3 0.78
Compuesto Área * Detector %
Dehidroepiandrosterona 27.6 * 0.70 = 19.32 19.32/128.91*100 = 14.99
Estradiol 32.4 * 0.72 = 23.33 23.33/128.91*100 = 18.10
Estrona 47.1 * 0.75 = 35.33 35.33/128.91*100 = 27.40
Testosterona 40.6 * 0.73 = 29.64 29.64/128.91*100 = 22.99
Estriol 27.3 * 0.78 = 21.29 21.29/128.91*100 = 16.52
Total=128.91