Expresión génica

tejido – específica.
 La regulación de la expresión génica permite
controlar qué genes se expresan y en qué magnitud,
permitiendo así que en cada célula se sintetice un
determinado conjunto de proteínas que dan cuenta
de sus propiedades estructurales y funcionales.
 De esta manera, al comparar células de diferente
tipo, podemos encontrar variación en el tipo y
cantidad de proteínas. Por ejemplo, de los
aproximadamente 30.000 genes contenidos en el
genoma humano, solo una parte corresponde a
genes que se expresan en cantidades relativamente
constantes en todas las células.
 El resto de los genes presentan variaciones
que pueden depender no solo del tipo celular,
sino también de la etapa del desarrollo, los
requerimientos metabólicos, la existencia de
parásitos, estado nutricional, entre otros
factores.
Cada tipo celular posee un conjunto de proteínas distintas, lo
que se debe a la expresión de genes distintos, según el
fenotipo.
 La regulación de la expresión génica puede ocurrir
en diferentes niveles, tanto durante la transcripción
de ADN a ARNm como durante la traducción del
ARNm a proteínas.
Los mecanismos de regulación de la expresión génica pueden
favorecer o reprimir la transcripción o traducción.
 La metilación del ADN, por ejemplo, consiste en la adición de
grupos metilo (CH3) en los nucleótidos a través de enzimas
llamadas metilasas, lo que produce el bloqueo de la transcripción
de los genes así modificados.
 De esta manera, la metilación reprime la expresión génica, y la
desmetilación, a través de otras enzimas, puede revertir este
estado.
 Al contrario, la acetilación de histonas, es decir, la incorporación
de grupos acetilo (CH3CO) a las histonas, proteínas estrechamente
asociadas con el ADN, inducen la transcripción de los genes
acetilados. Esta modificación química, también reversible, se
produce gracias a la enzima acetilasa.
 Hoy en día es posible analizar el patrón de la expresión de
los genes en diferentes tipos celulares y bajo diferentes
condiciones metabólicas.
 Una forma de analizar este patrón es a través de
microarreglos. Los Microarreglos son placas que contienen
cientos o miles de microscópicos puntos, cada uno de los
cuales contiene trozos de ADN correspondientes a un
fragmento de un gen. Así, un microarreglo puede contener,
por ejemplo, 5 mil muestras de ADN, cada una
representando un fragmento de un gen diferente.
 Esta técnica permite detectar qué genes están
“encendidos” o bien “apagados”, vale decir, cuáles se
expresan y cuáles no. Los microarreglos también permiten
realizar la cuantificación de la expresión génica.
 Otra forma de analizar el patrón de expresión génica en un
tipo celular es a través del uso de sustancias que inducen la
diferenciación celular. Las células C3H 10T, por ejemplo,
corresponden a fibroblastos (células poco diferenciadas) que
al ser expuestos a la sustancia 5-azacitidina (nucleósido que
inhíbela acción de la metilasa del ADN), se diferencian en
miocitos (células musculares estriadas). De esta manera
induce la desmetilación, es decir, la activación de la
expresión génica de ciertos genes que participan en la
diferenciación de fibroblasto a miocito. El ADN de las células
sometidas a desmetilación puede ser fácilmente extraído e
inyectado a una célula C3H 10T, lo que obviamente produce
diferenciación de estas células hacia miocitos.
 De la misma manera se puede extraer el ARNm de las células
tratadas con 5-azacitidina y usarlas para producir sondas
(fragmentos cortos de ADN o ARN marcados con un isótopo
radioactivo o con una sustancia química que sirven para detectar
secuencias específicas de ácidos nucleicos), marcadas con
radiactividad. Estas sondas pueden ser aplicadas a células C3H
10T no sometidas a 5-azacitidina, para luego verificar la existencia
de la señal radiactiva. Al analizar la señal de cada sonda, en las
células, se obtienen dos tipos de resultados:
1) sondas que hibridan: corresponden a genes no relacionados
con la diferenciación de fibroblasto a miocito.
2) Sondas que no hibridan: corresponden a genes que se
expresaron como consecuencia de la actividad de la 5-azacitidina,
por lo que participan en la diferenciación celular hacia miocito.