Esterilización (microbiología)

Para otros usos de este término, véase Esterilización.

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Se denomina esterilización al proceso por el cual se obtiene un producto libre de

microorganismos viables. El proceso de esterilización debe ser diseñado, validado y llevado a
cabo para asegurar que es capaz de eliminar la carga microbiana del producto o un desafío
más resistente.
Dado que la esterilidad no puede demostrarse de manera absoluta sin causar la destrucción
completa de todas las unidades del lote de producto terminado, se define la esterilidad en
términos probabilísticos, en donde la probabilidad de que una unidad de producto esté
contaminada es aceptablemente remota. Se considera que un producto crítico es estéril
cuando la probabilidad de que un microorganismo esté presente en forma activa o latente es
igual o menor de 1 en 1.000.000 (coeficiente de seguridad de esterilidad 10^-6).
Los agentes que matan microbios son denominados microbicidas (cida= “matar”) o más
comúnmente denominados “germicidas”. Si el agente específicamente destruye bacterias, es
llamado bactericida; si mata hongos es denominado fungicida. Tras una exposición del objeto
esterilizado al aire o a sus alrededores, éste se habrá contaminado de nuevo con
microorganismos.
Los métodos térmicos de esterilización son comúnmente los más utilizados para eliminar los
microorganismos, incluyendo las formas más resistentes como lo son las endoesporas.

Índice
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 1 Terminología referente al control del crecimiento microbiano

 2 Tasa de muerte microbiana
 3 Factores que influyen en la efectividad de los tratamientos antimicrobianos
 4 Acciones de los agentes antimicrobianos
 5 Métodos de esterilización
o 5.1 Métodos químicos
o 5.2 Métodos físicos
o 5.3 Métodos térmicos
 5.3.1 Calor húmedo
 5.3.2 Calor seco
 6 Aplicaciones
 7 Véase también
 8 Referencias
 9 Enlaces externos
Terminología referente al control del crecimiento
microbiano[editar]
Terminología

Definición Comentarios

Las endoesporas más resistentes de las

Tratamiento de calor para matar
Esterilización bacterias termofílicas pueden sobrevivir, pero
endoesporas de Clostridium
comercial no van a crecer ni germinar bajo las
botulinum en comida enlatada
condiciones normales de almacenamiento

Destrucción de patógenos
Desinfección Puede hacerse por métodos físicos o químicos
vegetativos

Destrucción de patógenos El tratamiento regularmente es con métodos

Antisepsia
vegetativos en tejidos vivos químicos antimicrobiales

Remover los microbios de un área

Eliminación de Por lo general se hace mecánicamente
limitada, como la piel alrededor de
gérmenes removiendo con alcohol
un sitio para inyectar

Tratamiento para disminuir la cuenta

Se puede hacer con un baño a altas
microbiana en utensilios de comida y
Sanitización temperaturas o introduciéndolo en un
bebidas para mantener los niveles de
desinfectante químico
salud pública

 Calor seco: Comprende a su vez varias fases: el calor directo, el flameado y la

esterilización al horno.
 Calor húmedo: Comprende varias modalidades, ebullición, pasteurización y empleo del
autoclave.

Tasa de muerte microbiana[editar]

Cuando una población bacteriana es tratada con químicos o con calor, usualmente éstas
mueren a una tasa constante. Por ejemplo, si suponemos que tenemos una población de 2
millones de microorganismos que han sido tratados por un minuto, y 90 % de la población ha
muerto. Ahora nos quedan con 200,000 microorganismos. Si la población es tratada por otro
minuto, 90 % del remanente de la población será exterminada, resultando en 20,000
mocroorganismos. Si la curva de mortandad es trazada logarítmicamente, la tasa de muerte
es constante.
Factores que influyen en la efectividad de los tratamientos
antimicrobianos[editar]
El número de microorganismos: A mayor número de microorganismos que se tengan al
inicio, mayor tiempo para eliminar la población entera.
Influencias ambientales: La presencia de materia orgánica regularmente inhibe la acción de
antimicrobianos químicos. Microorganismos localizados en biopelículas, son difíciles de matar
por biosidas, porque la actividad de éste es dependiente de la temperatura de la reacción
química; los desinfectantes funcionan un poco mejor bajo temperaturas altas.
Tiempo de exposición: Los químicos antimicrobianos suelen requerir un mayor tiempo de
exposición para microorganismos más resistentes o endoesporas, esto con el fin de que sea
efectivo.
Características microbianas: Dependiendo las características del microorganismo se van a
tener que usar diferentes métodos para poder eliminarlo.

Acciones de los agentes antimicrobianos[editar]

Alteración de la permeabilidad de la membrana: La membrana plasmática de los
microorganismos, localizada en la pared celular, es el objetivo de muchos agentes
antimicrobianos. Esta membrana regula activamente el paso de nutrientes a la célula y la
eliminación de desechos de la misma. El daño a los lípidos o proteínas de la membrana
plasmática por agentes antimicrobianos causa que el contenido celular salga al medio y esto
interfiere con el crecimiento de la célula.
Daño a las proteínas y ácidos nucleicos: Para que una proteína sea funcional se necesita
que se encuentre en su estructura terciaria por lo menos, ésta se encuentra constituida por
puentes de hidrógeno los cuales son susceptibles a romperse con calor o ciertos químicos; la
rotura de estos puentes nos da como resultado la desnaturalización de la proteína. Del mismo
los enlaces covalentes aunque son más resistentes también son objetivos de agentes
antimicrobianos.
Los ácidos nucleicos ADN y ARN son los que llevan la información genética de la célula. El
daño a estos por calor, radiación, o químicos es frecuentemente letal para la célula. La célula
no se puede replicar y tampoco puede tener sus funciones metabólicas normales como la
síntesis de enzimas. Las altas temperaturas a las que funcionan los autoclaves eliminan todo
tipo de microbios y bacterias, incluyendo las esporas.

Métodos de esterilización[editar]
Existen varios métodos de esterilización, detallados a continuación.1 2

 Métodos físicos
 Calor húmedo (en autoclave de vapor)
 Calor seco (en horno de esterilización)
 Flama directa
 Incineración
 Aire caliente
 Pasteurización
 Ebullición
 Vapor
 Tindalización
  Radiación
 Radiación ionizante
 Radiación no ionizante: (p. ej:Radiación infrarroja y Radiación ultravioleta)
 Métodos químicos
 Alcoholes
 Etanol
 Alcohol isopropílico
 Aldehídos
 Formol
 Glutaraldehído
 Fenoles
 Fenol (Ácido carbólico)
 Xilenol
 Óxido de etileno
 Peróxido de hidrógeno
Métodos químicos[editar]
Los métodos químicos de esterilización son aquellos que involucran el empleo de sustancias
letales para los microorganismos, tales como el óxido de etileno y el peróxido de hidrógeno. El
uso de este método es muy limitado para la Industria Alimentaria pero muy utilizado en otras
industrias como la farmacéutica.
Métodos físicos[editar]
Los métodos físicos son aquellos que no involucran el empleo de sustancias letales para los
microorganismos, sino procedimientos físicos como la radiación ionizante, el calor o
la filtración de soluciones con membranas que impiden el paso de microorganismos,
incluyendo virus. El método más usado en esta categoría es el calor que mata
microorganismos por la desnaturalización de las enzimas; el cambio resultante en la forma
tridimensional de las proteínas las inactiva. La resistencia al calor varía entre los diferentes
microorganismos; esta diferencia puede ser expresada como el punto térmico de muerte
(PTM) el cual se define como la temperatura más baja a la cual todos los microorganismos en
una suspensión líquida serán eliminados en 10 minutos.
Otro factor que debe ser considerado en una esterilización es el tiempo requerido. Este puede
expresarse como el tiempo de muerte térmica (TMT), el cual es el tiempo mínimo para que
toda bacteria en un cultivo líquido en particular sea exterminada a una temperatura
determinada.
Ambos PTM y TMT son guías útiles que indican la severidad del tratamiento requerido para
matar a una población de bacterias dada. El tiempo de reducción decimal (TRD, o valor D) es
el tercer concepto relacionado con la resistencia bacteriana al calor. TRD es el tiempo, en
minutos, en el cual el 90 % de una población bacteriana a cierta temperatura será eliminada.
Métodos térmicos[editar]
Los métodos térmicos suelen englobar todos los procedimientos que tienen entre sus fines la
destrucción de los microorganismos por el calor. Los métodos son tanto la pasteurización
como la esterilización, cuya finalidad principal es la destrucción microbiana, como al escaldado
y a la cocción, procesos en los que también se consigue una cierta reducción de la flora
microbiana, pero que sus objetivos principales son la
variación de las propiedades físicas.
Esterilización por calor seco
Temperatura (°C) Tiempo (minutos)
Calor húmedo[editar] 121 360
Las condiciones de temperatura y presión de un 140 180
proceso de esterilización por vapor de agua en
150 150
un autoclave van de 121 °C a 134 °C y 40-50 psi. Para
el tratamiento de residuos hospitalarios se emplean 160 120
tiempos de operación entre 20 y 30 minutos. El método
170 60
de esterilización por autoclave utiliza pruebas
microbiológicas, las cuales se ingresan dentro del ciclo 180 30
de operación y posteriormente por medio de una
incubadora se busca detectar si hay crecimiento de
microorganismos. Uno de los microorganismos utilizados en estas pruebas es el Bacillus
stearothermophilus.
Calor seco[editar]
Artículo principal: Calor seco

Las temperaturas de esterilización van desde 121 °C a 180 °C, teniendo en cuenta los tiempos
de esterilización para cada caso.3

Aplicaciones[editar]
En investigación de laboratorios científicos es empleado principalmente para eliminar
microorganismos de los elementos de trabajo, evitando así la contaminación de la muestra,
recipientes y material de trabajo.
En la industria alimentaria se emplea para aumentar la vida útil de los alimentos. Los
alimentos esterilizados más comunes son los enlatados.
Se usa también para la conservación y alargamiento de la vida de libros, muebles, obras de
arte y otros bienes.
En los hospitales es empleado principalmente para eliminar agentes patógenos de los
instrumentos quirúrgicos reutilizables.
Los fabricantes de productos sanitarios esterilizan los productos para poder utilizarlo con
asepsia en un procedimiento quirúrgico o de laboratorio por los profesionales sanitarios.
En el tratamiento de residuos peligrosos hospitalarios, se utiliza la esterilización de alta
eficiencia, con el fin de eliminar todos los microorganismos patógenos y así disminuir los
riesgos de infección asociados.

ce
1. Introducción
2. Métodos Químicos
3. Métodos físicos
4. Filtración
5. Bibliografía
1. Introducción
Comprende todos los procedimientos físicos, mecánicos y preferentemente químicos, que se emplean para
destruir gérmenes patógenos. A través de esta, los materiales quirúrgicos y la piel del enfermo alcanzan
un estado de desinfección que evita la contaminación operatoria.
Métodos:
Químicos: Con oxido de etileno
Aldehídos
 Gas-plasma de Peroxido de Hidrogeno
Físicos: Calor Radiaciones
Filtración
Agentes esterilizantes y desinfectantes
2. Métodos Químicos
Estos métodos provocan la perdida de viabilidad de los microorganismos.
Con oxido de etileno:
Es un agente alquilante que se une a compuestos con hidrógenos lábiles como los que
tienen grupos carboxilos, amino, sulfhidrilos, hidroxilos, etc.
Es utilizado en la esterilización gaseosa, generalmente en la industria farmacéutica. Destruye todos los
microorganismos incluso virus. Sirve para esterilizar material termosensibles como el descartable
(goma, plastico, papel, etc.), equipos electrónicos, bombas cardiorrespiratorias, metal, etc. Es muy peligroso
por ser altamente inflamable y explosivo, y además cancerigeno.
Con aldehídos:
Son agentes alquilantes que actúan sobre las proteínas, provocando una modificación irreversible
en enzimas e inhiben la actividad enzimática. Estos compuestos destruyen las esporas.
Glutaraldehído:
Consiste en preparar una solución alcalina al 2% y sumergir el material a esterilizar de 20 a 30 minutos, y
luego un enjuague de 10 minutos.
Este método tiene la ventaja de ser rápido y ser el único esterilizante efectivo frío. Puede esterilizar plástico,
goma, vidrio, metal, etc.
Formaldehído:
Se utilizan las pastillas de paraformaldehido, las cuales pueden disponerse en el fondo de una caja envueltas
en gasa o algodón, que después pueden ser expuesta al calor para un rápida esterilización (acción del gas
formaldehído). También pueden ser usadas en Estufas de Formol, que son cajas de doble fondo, en donde se
colocan las pastillas y se calienta hasta los 60° C y pueden esterilizar materiales de látex, goma,plásticos, etc.
Las pastillas de formalina a temperatura ambiente esterilizan en 36 hs.
Esterilización por gas-plasma de Peróxido de Hidrógeno
Es proceso de esterilización a baja temperatura la cual consta en la transmisión de peróxido de hidrógeno en
fase plasma (estado entre líquido y gas), que ejerce la acción biocida.
Posee como ventajas:
 No deja ningún residuo tóxico.
 Se convierte en agua y oxígeno al final del proceso.
 El material no precisa aireación.
 El ciclo de esterilización dura entre 54 y 75 minutos.

Desventajas:
 No se pueden esterilizar objetos que contengan celulosa, algodón, líquidos, humedad, madera o instrumental
con lúmenes largos y estrechos.
 Es el método de esterilización más caro de entre los descritos.

3. Métodos físicos
Calor
La utilización de este método y su eficacia depende de dos factores: el tiempo de exposición y la temperatura.
Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la acción del calor. El calor provoca
desnaturalización de proteínas, fusión y desorganización de las membranas y/o procesos oxidantes
irreversibles en los microorganismos.
Calor Húmedo:
El calor húmedo produce desnaturalización y coagulación de proteínas. Estos efectos se debe principalmente
a dos razones:
*El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones
que eliminan agua.
*El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire.
 Autoclave
Se realiza la esterilización por el vapor de agua a presión. El modelo más usado es el de Chamberland.
Esteriliza a 120º a una atmósfera de presión (estas condiciones pueden variar)y se deja el material durante 20
a 30 minutos.
Equipo:
Consta de una caldera de cobre, sostenida por una camisa externa metálica, que en la parte inferior recibe
calor por combustión de gas o por una resistencia eléctrica, esta se cierra en la parte superior por una tapa de
bronce. Esta tapa posee tres orificios, uno para el manómetro, otro para el escape de vapor en forma de
robinete y el tercero, para una válvula de seguridad que funciona por contrapeso o a resorte.
Funcionamiento:
Se coloca agua en la caldera, procurando que su nivel no alcance a los objetos que se disponen sobre una
rejilla de metal. Se cierra asegurando la tapa, sin ajustar los bulones y se da calor, dejando abierta la válvula
de escape hasta que todo el aire se desaloje y comience la salidÔ9de vapor en forma de chorro continuo y
abundante.
Tyndalización
Esterilización por acción discontinua del vapor de agua, se basa en el principio de TyndalÑ Las bacterias que
resisten una sesión de calefacción, hecha en determinadas condiciones, pueden ser destruidas cuando la
misma operación se repite con intervalos separados y en varias sesiones.
Se efectúa por medio del autoclave de Chamberland, dejando abierta la válvula de escape, o sea funcionando
a la presión normal. Puede también realizarse a temperaturas más bajas, 56º u 80º ocúpara evitar la
descomposición de las sustancias a esterilizar, por las temperaturas elevadas.
Ventajas del calor húmedo:
 Rápido calentamiento y penetración
 Destrucción de bacterias y esporas en corto tiempo
 No deja residuos tóxicos
 Hay un bajo deterioro del material expuesto
 Económico

Desventajas:
 No permite esterilizar soluciones que formen emulsiones con el agua
 Es corrosivo sobre ciertos instrumentos metálicos

Calor seco:
El calor seco produce desecación de la célula, es esto tóxicos por niveles elevados de electrolitos, fusión de
membranas. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos
que están en contacto con éstos.
La acción destructiva del calor sobre proteínas y lipidos requiere mayor temperatura cuando el material está
seco o la actividad de agua del medio es baja.
Estufas
Doble cámara, el aire caliente generado por una resistencia, circula por la cavidad principal y por el espacio
entre ambas cámaras, a temperatura de 170º C para el instrumental metálico y a 140º C para el contenido de
los tambores.
Se mantiene una temperatura estable mediante termostatos de metal, que al dilatarse por el calor, cortan el
circuito eléctrico.
Ventajas del calor seco:
 No es corrosivo para metales e instrumentos.
 Permite la esterilización de sustancias en polvo y no acuosas, y de sustancias viscosas no volátiles.

Desventajas:
 Requiere mayor tiempo de esterilización, respecto al calor húmedo, debido a la baja penetración del calor.

Radiaciones
Su acción depende de:
 El tipo de radiación
 El tiempo de exposición
 La dosis

Ionizantes:
Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los ácidos nucleicos, estructuras proteicas y
lipídicas, y componentes esenciales para la viabilidad de los microorganismos.
Tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales termolábiles (termosensibles) como
jeringas descartables, sondas, etc. Se utilizan a escala industrial por sus costos.
Rayos Ultravioletas:
Afectan a las moléculas de DNA de los microorganismos. Son escasamente penetrantes y se utilizan para
superficies, se utilizan para la esterilización en quirófanos.
Rayos Gamma:
Su empleo esta basado en los conocimientos sobre la energia atomica. Este tipo de esterilización se aplica
a productos o materiales termolábiles y de gran importancia en el campo industrial. Puede esterilizar
antibióticos, vacunas, alimentos, etc.
4. Filtración
Se usan membranas filtrantes con poros de un tamaño determinado. El tamaño del poro dependerá del uso al
que se va a someter la muestra. Los filtros que se utilizan no retienen virus ni micoplasmas, estos últimos
están en el límite de separación según el diámetro de poro que se utilice.
La filtración se utiliza para emulsiones oleosas o soluciones termolábiles. Su usa para esterilizar aceites,
algunos tipos de pomadas, soluciones oftálmicas, soluciones intravenosas, drogas diagnósticas,
radiofármacos, medios para cultivos celulares, y soluciones de antibióticos y vitaminas.
Existen tres tipos básicos de filtros:
Filtros profundos o Filtros de profundidad:
Consisten de un material fibroso o granular prensado, plegado, activado, o pegado dentro de los canales de
flujo. En este tipo de filtros la retención de las partículas se produce por una combinación de absorción y de
retención mecánica en la matriz.
Membranas filtrantes:
Tienen una estructura continua, y la retención se debe principalmente al tamaño de la partícula. Partículas
más pequeñas al tamaño del poro quedan retenidas en la matriza del filtro debido a efectos electrostáticos.
Filtros de huella de nucleación (Nucleoporo):
Son películas muy delgadas de policarbonato que son perforadas por un tratamiento conjunto con radiación y
sustancias químicas. Son filtros con orificios muy regulares que atraviesan la membrana verticalmente.
Funcionan como tamices, evitando el paso de toda partícula con un tamaño mayor al del poro.
Agentes Esterilizantes
Alcoholes
Iodo
Antisépticos Agentes catiónicos, aniónicos y anfóteros
Organo Mercuriales
Colorantes
Cloro y Compuestos clorados
Aldehídos
Desinfectantes y/o Esterilizantes Oxido de Etileno
Compuestos Fenólicos
Acidos y Alcalis
5. Bibliografía
www.microbiologia.com.ar
www.google.com
apuntes Facultad de Ciencias Exactas (UNLP)
Autor:

Lorena
6° Año Secundaria En Escuela Técnica
Argentina

Leer más: http://www.monografias.com/trabajos10/meste/meste.shtml#intro#ixzz3oCAdLvgC