Fundación H.A.

 Barceló – Facultad de Medicina 

Licenciatura en Nutrición
Bioquímica
Primer año
Módulo 14
Lección 2

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La mitocondria

1. Anatomía de la mitocondria
Las mitocondrias varían considerablemente en su tamaño y en su forma
dependiendo de su origen y de su estado metabólico. Son típicamente elipsoides de
~0,5 µm de diámetro y 1 µm de largo (aproximadamente el tamaño de una bacteria).
La mitocondria está rodeada por una fina membrana externa y contiene una
membrana interna ampliamente invaginada. El número de las invaginaciones,
llamadas crestas, varía con la actividad respiratoria de un tipo particular de célula.
Esto se debe a que las proteínas que median la cadena de transporte de electrones
y la fosforilación oxidativa están unidas a la membrana mitocondrial interna, por lo
tanto la velocidad de respiración varía con el área de la superficie de la membrana.
El hígado, por ejemplo, que tiene una velocidad de respiración relativamente baja,
contiene, relativamente, mitocondrias con pocas crestas, mientras que las del
músculo cardíaco contienen muchas crestas.
El compartimiento interno mitocondrial consiste en una sustancia tipo gel de
<50% de agua, llamada matriz, que, notablemente, tiene altas concentraciones de
enzimas solubles del metabolismo oxidativo (ej. enzimas del ciclo de Krebs, así
como sustratos, cofactores nucleotídicos y iones inorgánicos). La matriz también
contiene la maquinaria genética mitocondrial (ADN, ARNA y ribosomas), que
expresan solo unas pocas proteínas de la membrana mitocondrial interna.

1.1 La membrana mitocondrial interna y las crestas compartimentalizan las

funciones metabólicas
La membrana mitocondrial externa contiene porina, una proteína que forma
poros no específicos que permiten la libre difusión de moléculas de hasta 10 kDa. La
membrana mitocondrial interna, que contiene un ~75% de su masa en proteínas, es
considerablemente más rica en proteínas que la membrana externa. La membrana
interna es libremente permeable solo al O2, CO2, H2O y contiene, además de las
proteínas de la cadena respiratoria, numerosas proteínas transportadoras que
controlan el pasaje de metabolitos como ATP, ADP, piruvato, Ca2+ y fosfato. Este
control de la impermeabilidad de la membrana mitocondrial interna a la mayoría de
los iones, metabolitos y compuestos de bajo peso molecular permite la generación
de gradientes iónicos a través de esta barrera dando como resultado la
compartimentación de las funciones metabólicas entre el citosol y la mitocondria.
Las micrografías electrónicas en dos dimensiones de la mitocondria como se
observa en las figuras, sugieren que las crestas se asemejan pliegues y los espacios
intercrestales se comunican libremente con el espacio intermembrana de la
mitocondria.

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Sin embargo, la microscopía electrónica basada en

los métodos de reconstrucción de imágenes
tridimensionales han revelado que las crestas pueden
variar en su forma desde un simple entidad tubular hasta
ensamblajes laminares más complicados que emergen
con la membrana interna a través de estructuras
tubulares estrechas. Evidentemente, las crestas forman
microcompartimentos que restringen la difusión de los
sustratos y de los iones entre los espacios intercrestales
e intermembrana. Esto tiene importantes implicancias
funcionales porque daría como resultado localmente un mayor gradiente de pH a
través de las membranas de las crestas, que a través de las membranas internas
que no son parte de las crestas, por consiguiente influenciando significativamente la
velocidad de la fosforilación oxidativa.

2. Sistemas de transporte mitocondrial

La membrana mitocondrial interna es impermeable a la mayoría de las sustancias
hidrófilas, por lo tanto debe contener sistemas de transporte específicos que
permitan los siguientes procesos:
1. El NADH citosólico producido a través de la glucólisis debe acceder a al
cadena de transporte de electrones para la oxidación aeróbica.
2. Los metabolitos producidos en la mitocondria como el oxalacetato y el acetil-
CoA, los precursores respectivos de la biosíntesis citosólica de la glucosa y
de los ácidos grasos, deben alcanzar sus destinos metabólicos.
3. El ATP producido en la matriz mitocondrial debe alcanzar el citosol, donde
ocurren la mayoría d las reacciones que utilizan ATP, mientras que el ADP y
el Pi, sustratos para la fosforilación oxidativa, deben ingresar la mitocondria.

2.1 Transporte del Pi

El ATP se genera a partir de ADP + Pi en la mitocondria pero es utilizado en
el citosol. El Pi producido es devuelto a la mitocondria por medio del transportador
de fosfato, un simporte Pi-H+ electroneutral que es conducido por el ∆pH. El protón
que acompaña al Pi adentro de la mitocondria, de hecho, ha sido previamente
expelido de la mitocondria por las bombas conducidas por el proceso redox de la
cadena de transporte de electrones. Por lo tanto, el gradiente de potencial
electroquímico generado por estas bombas de protones es responsable del
mantenimiento de las latas concentraciones mitocondriales de ADP y Pi, además de
proporcionar la energía libre para la síntesis de ATP.

2.2 Transporte de Ca2+

Dado que el Ca2+, al igual que el AMPc, funciona como un segundo
mensajero, su concentración en los diferentes compartimentos celulares debe ser
controlada con precisión. La mitocondria, el retículo endoplasmático y los espacios
extracelulares actúan como reservorios de almacenamiento de Ca2+.
Los sistemas de la membrana mitocondrial interna median la entrada y la
salida de Ca2+ en forma separada. La entrada de Ca2+ es conducido por el potencial
de membrana (∆ψ, adentro negativo) de la membrana mitocondrial interna, que atrae

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iones con carga positiva. La velocidad de la entrada varía con la [Ca2+] externa
porque la KM para el transporte de Ca2+ es mayor que el concentración de Ca2+
citosólico.
En las mitocondrias del corazón, del cerebro y del músculo esquelético la
salida de Ca2+ es conducida en forma independiente por el gradiente de Na+ a través
de la membrana mitocondrial interna. El Ca2+ deja la matriz solo por intercambio con
Na+, de este modo, este es un sistema de antiporte. Normalmente, este proceso de
intercambio opera a su máxima velocidad.
Por consiguiente, la mitocondria (al
igual que los retículos endoplasmático y
sarcoplasmático) pueden actuar como un
"buffer" para el Ca2+ citosólico: si la [Ca2+]
citosólica aumenta, la velocidad de ingreso Espacio
mitocondrial de Ca2+ aumenta, mientras que la intermembrana
velocidad del salida de Ca2+ permanece
constante, causando que la [Ca2+]
mitocondrial aumente mientras que la [Ca2+]
citosólica disminuya a su nivel original (su
punto de ajuste de la concentración de Ca2+).
De manera contraria, una disminución de la
[Ca2+] citosólica reduce la velocidad de
ingreso mitocondrial, causando una salida
neta de Ca2+ y un aumento de la [Ca2+] Matriz
citosólica llevándola nuevamente a su punto
de ajuste.
La oxidación llevada a cabo por el ciclo de Krebs en la matriz mitocondrial es
controlada por la [Ca2+] de la matriz. Por lo tanto, es interesante destacar que en
respuesta a los aumentos de la [Ca2+] citosólico causados por un incremento de la
actividad muscular, la [Ca2+] de la matriz aumenta, activando en consecuencia las
enzimas del ciclo del ácido cítrico. Esto conduce a un incremento en la [NADH], cuya
reoxidación a través de la cadena de transporte de electrones acoplada a la
fosforilación oxidativa genera el ATP necesario para este aumento en la actividad
muscular.

2.3 Los sistemas citoplasmáticos de lanzaderas de sustrato "transportan" al

NADH a través de la membrana mitocondrial interna
A pesar de que la mayoría del NADH generado por oxidación de la glucosa se
forma en la matriz mitocondrial a través del ciclo de Krebs, el generado por la
glucólisis se encuentra en el citosol. Sin embargo, la membrana mitocondrial interna
carece de una proteína transportadora de NADH. Todos los tejidos con células que
contienen mitocondrias tienen la capacidad de lanzar equivalentes de reducción
desde el citosol a la matriz mitocondrial. Sin embargo, la membrana mitocondrial
interna carece de una proteína transportadora de NADH. Solo los electrones del
NADH citosólico son transportados adentro de la mitocondria por dos sistemas de
lanzaderas:
La lanzadera del malato-aspartato, que funciona en el corazón, el hígado y el
riñón, donde el NAD+ mitocondrial es reducido por el NADH citosólico a través de la
reducción intermedia y la subsiguiente regeneración del oxalacetato:

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Transporte de electrones adentro de la matriz:

1. En el citosol el NADH reduce al oxalacetato para generar NAD+ y malato en
una reacción catalizada por la malato deshidrogenasa citosólica.
2. El transportador malato-α-cetoglutarato transporta al malato, desde el citosol
hacia la matriz mitocondrial, en intercambio por un α-cetoglutarato desde la matriz
hacia el citosol.
3. En la matriz, el NAD+ reoxida al malato para generar NADH y oxalacetato en
una reacción catalizada por la malato deshidrogenasa mitocondrial.
Regeneración del oxalacetato citosólico:
4. En la matriz, una transaminasa convierte el oxalacetato en aspartato con la
concomitante conversión del glutamato en α-cetoglutarato.
5. El transportador glutamato-aspartato, transporta aspartato desde la matriz
hacia el citosol, en intercambio por un glutamato citosólico.
6. En el citosol, una transaminasa convierte al aspartato en oxalacetato con la
concomitante conversión del α-cetoglutarato a glutamato.

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Por lo tanto, los electrones del NADH citosólico son transferidos al NAD+
mitocondrial para formar NADH, el cual, experimenta la reoxidación por medio de la
cadena de transporte de electrones. La lanzadera malato-aspartato genera cerca de
3 ATP por cada NADH citosólico.

La lanzadera de glicerofosfato, más simple pero energéticamente menos

eficiente, se encuentra en el cerebro y en el músculo esquelético. La glicerol-3-
fosfato deshidrogenasa cataliza la oxidación del NADH citosólico por la DHAP para
producir NAD+, el cual ingresa nuevamente a la glucólisis. Los electrones del
glicerol-3-fosfato resultante son transferidos a la flavoproteína deshidrogenasa para
formar FADH2. Esta enzima, que se ubica en la cara externa de la membrana
mitocondrial interna, provee electrones a la cadena de transporte de electrones de
una forma similar a la succinato deshidrogenasa. Por lo tanto, la lanzadera de
glicerofosfato da como resultado la síntesis de ~2 ATP por cada NADH
citoplasmático reoxidado. La ventaja de la lanzadera glicerofosfato es que, al ser
esencialmente irreversible, opera eficientemente aún cuando la concentración de
NADH citoplasmática sea baja; mientras que la lanzadera malato-aspartato es
reversible y en consecuencia, es conducida por los gradientes de concentraciones.