Fundación H.A.

 Barceló – Facultad de Medicina 

Licenciatura en Nutrición
Bioquímica
Primer año
Módulo13
Lección 3

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 Fundación H. A. Barceló - Facultad de Medicina

Radicales libres y toxicidad del oxígeno

Los radicales libres son especies químicas que tienen un electrón desapareado,
que las habilita como fragmentos moleculares muy reactivos. La producción
controlada de radicales libres permite la realización de varios procesos fisiológicos,
incluyendo la fertilización del óvulo por el espermatozoide y la activación de genes,
también participan en los mecanismos de defensa del organismo durante una
infección. Sin embargo, un exceso de estas especies reactivas en ausencia o
disminución de la actividad d los sistemas antioxidantes que las regulan, puede
llevar a una condición metabólica denominada estrés oxidante que propicia desde el
daño molecular hasta la muerte celular.

1. Radicales libres
Podemos definir:
- Radical: Molécula o átomo con un electrón único desapareado.
- Radical libre: Radical capaz de tener una existencia independiente y estable.
Los radicales libres son muy reactivos, reaccionan con glúcidos, lípidos,
proteínas y ácidos nucleicos.
Los radicales libres se pueden formar por dos mecanismos:
1. Rompimiento homolítico de un enlace covalente de una molécula estable, en
el que cada fragmento retiene un electrón no apareado:
X:Y Æ X• + Y•
2. Transferencia de electrones, en la cual una molécula estable gana un
electrón:
A + e– Æ A•–
La ruptura hemolítica y la transferencia de electrones se realizan por los
siguientes mecanismos:
- Radiaciones ionizantes, ultravioleta y térmicas.
- Reacciones redox.
- Reacciones catalizadas por enzimas, por ejemplo la formación de óxido
nítrico.

2. Características del oxígeno

- Es un birradical: Tiene dos e– únicos en orbitales diferentes, pero con espines
paralelos.
- Es por ello que el oxígeno no puede oxidar fácilmente un enlace covalente.
- Las reacciones en las que interviene el oxígeno son lentas, implican un único
e– y deben estar catalizadas (por metales o por metaloproteínas).

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2.1 Especies reactivas

El oxígeno es capaz de generar dos tipos de especies químicas reactivas, que
son muy perjudiciales para los seres vivos.
Especies reactivas de oxígeno (ROS)
• Radical superóxido (O2-) (radical libre)
• Peróxido de hidrógeno (H2O2)
• Radical hidroxilo (OH•) (radical libre)
Especies reactivas de oxígeno y nitrógeno (RNOS)
• Óxido nítrico (NO•) (radical libre)
• Trióxido de nitrógeno (N2O3)
• Peroxinitrito (ONOO-)
• Nitrito (NO2-)
• Ácido peroxinitroso (HONO2)
• Dióxido de nitrógeno (NO2•) (radical libre)
Se conocen más de 100 enfermedades en las que están implicados los
radicales libres. En algunas son la causa primaria y en otras aumentan las
complicaciones clínicas (causa secundaria). Algunos ejemplos de enfermedades
asociadas a las especies reactivas:
- Enfermedad de Alzheimer - Diabetes
- Enfermedad de Parkinson - Insuficiencia renal aguda
- Enfermedad hepática - Cáncer de cérvix
- Esclerosis lateral amiotrófica - Aterogénesis
- Esclerosis múltiple - Distrofia muscular tipo Duchenne
- Síndrome de Down - Enfermedades cardiovasculares

Especies reactivas de oxígeno (ROS)

Para su total reducción a agua, el oxígeno es capaz de aceptar cuatro
electrones. Se ha calculado que, del total del oxígeno consumido por la mitocondria,
un 0,1% - 4% no es reducido totalmente a agua.
Por ejemplo: en la cadena de transporte de electrones mitocondrial, el par CoQ•-
/CoQ es altamente reductor. El O2 tiene acceso al sitio CoQp, por lo que es posible
que CoQ•- done su e– al O2 y no lo haga al citocromo bL. Eso genera un radical
superóxido, O2–.
La generación de radicales libre es un fenómeno natural en la célula.
- El oxígeno es capaz de aceptar uno a uno, hasta cuatro electrones. Pero si el
proceso no es completo, podrá aceptar uno, dos o tres electrones únicamente.
• Si acepta un único e–, genera O2– (radical superóxido)
• Si acepta solo dos e–, genera H2O2 (peróxido de hidrógeno)
• Si acepta solo tres e–, genera OH• (radical hidroxilo)

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Radical superóxido (O2-)

- Se origina principalmente en la cadena de transporte electrónico mitocondrial.
- Puede ser producido por la xantina oxidasa (degradación de bases púricas).
- Tiene muy baja solubilidad, por lo que no difunde lejos de donde se produce.
- Puede originar el radical hidroxilo, de forma no enzimática (Reacción de
Haber-Weiss): O2– + H2O2 + H+ Æ O2 + H2O + OH•

Peróxido de hidrógeno (H2O2)

- No es un radical libre pero, al ser un oxidante débil, puede formarlos por
interacción con metales, en una reacción no enzimática (Reacción de Fenton)
H2O2 + Fe2+ Æ Fe3+ + OH– + OH•
- Participa en la reacción de Haber-Weiss.
- Difundir a través de las membranas biológicas.
- Es producido por muchas enzimas que unen O2, presentes en peroxisomas,
mitocondrias y retículo endoplasmático.

Radical hidroxilo (OH•)

- Es el radical libre más reactivo que existe entre las moléculas biológicas.
- Se puede originar a partir de las radiaciones ionizantes sobre el agua:
H2O + h⌡ Æ H• + OH•

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2.2 Daños producidos por las ROS

Las ROS provocan la oxidación de multitud de compuestos celulares,
produciendo lo que se denomina daño oxidativo.
- Producen peroxidación de los lípidos de las membranas celulares y
subcelulares, mediante una serie de reacciones en cadena. La peroxidación
lipídica implica unas reacciones en cadena, que tienen cuatro pasos:

1.- Iniciación Un radical libre extrae un átomo de hidrógeno de un lípido

y origina un radical lípido
2.- Propagación El O2 reacciona con el radical lípido y origina radicales
peroxilo y peróxidos lipídicos
3.- Degradación Los radicales peroxilo y peróxidos lipídicos se degradan
originando malondialdehído (de ácidos grasos con 3 o
más dobles enlaces) etano y pentano (de los C ω-
terminales de ácidos grasos de 3 y 6 dobles enlaces)
4.- Terminación El proceso finaliza cuando los radicales peroxilo y
peróxidos lipídicos se reducen totalmente:
- Reaccionando entre sí.
- En presencia de Vitamina E.

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La peroxidación de los lípidos de las membranas produce una serie de lesiones

celulares graves.
- Daño a péptidos y proteínas: Los aminoácidos Pro, Arg, Cis y Met son
susceptibles al ataque del radical OH•. Se dañan las enzimas y proteínas
respiratorias, con lo que se afecta gravemente al proceso de respiración celular.
La oxidación de los sulfhidrilos de las Cis del glutatión (γ-Glu-Cys-Gly) aumenta
el daño oxidativo.
- Daño al ADN celular y la mitocondria: La unión no específica del Fe2+ al ADN
facilita la formación de radical hidroxilo, el cual altera el ADN. Se han identificado
unos 20 tipos distintos de moléculas de ADN alteradas por oxidación de sus
bases. La oxidación también puede afectar el esqueleto de la desoxirribosa y
producir rupturas en la cadena.

2.3 Especies reactivas de oxígeno y nitrógeno (RNOS)

Éstas especies de oxígeno y nitrógeno también son muy reactivas y muchas de
las cuales son radicales libres.
Se originan por muy diversas causas, aunque todas parten del óxido nítrico:
- Óxido nítrico (NO•)
- Trióxido de nitrógeno (N2O3)
- Peroxinitrito (ONOO-)
- Nitrito (NO2-)
- Ácido peroxinitroso (HONO2)
- Dióxido de nitrógeno (NO2•)

Radical libre óxido nítrico (NO•)

Este radical es tanto necesario como tóxico a determinadas concentraciones.
- Bajas concentraciones: Neurotransmisor y vasodilatador.
- Altas concentraciones: Forma RNOS tóxicas para la célula y el organismo.
Al ser un gas, difunde fácilmente al citosol y las membranas celulares y
subcelulares.

3. Defensas celulares contra la toxicidad del oxígeno y sus

especies reactivas
Los organismos vivos disponen de mecanismos de defensa para evitar el daño
oxidativo de las ROS y RNOS.
Cuando la producción de especies reactivas supera la tasa de su eliminación, se
dice que existe un estrés oxidativo.

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Nuestras defensas contra las especies reactivas se encuadran en seis

categorías:
1. Enzimas de la defensa antioxidante
2. Antioxidantes endógenos
3. Antioxidantes de la dieta
4. Compartimentación celular de procesos productores de especies reactivas
5. Secuestro de metales
6. Reparación de los componentes dañados

1) Enzimas de la defensa antioxidante

Las más importantes son:
Superóxido dismutasa (SOD): Cataliza la dismutación del oxígeno
2 O2- + 2H+ Æ O2 + H2O2
Catalasa: Se encuentra fundamentalmente en los peroxisomas y, en menor
proporción, en el citosol y el retículo endoplasmático. Reduce el peróxido de
hidrógeno a agua y oxígeno:
2 H2O2 Æ O2 + 2 H2O
Glutatión peroxidasa: El glutatión, el tripéptido γ-glu-cis-gli, es uno de los
antioxidantes endógenos principales. La enzima glutatión peroxidasa cataliza la
reducción del peróxido de hidrógeno a agua y de los peróxidos lipídicos a
alcoholes no tóxicos.

2) Antioxidantes endógenos
Ácido úrico: Se origina en la degradación de las
purinas por la xantina deshidrogenasa. Es
particularmente importante en las vías aéreas, en donde
existen pocos antioxidantes diferentes. Los productos
originados por reacción del ácido úrico con los radicales
son eliminados por la orina.

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Melatonina: Una neurohormona secretada por la glándula pineal (participa

regulando los ciclos circadianos). Cede un electrón (en forma de hidrógeno) a los
radicales libres. También es capaz de reaccionar con ROS y RNOS formando
productos de adición.
Glutatión: Es uno de los instrumentos principales que posee el organismo para
protegerse del daño oxidativo. Actúa en conjunción con la enzima Glutatión
peroxidasa.

3) Antioxidantes de la dieta
Vitamina E: Engloba múltiples
tocoferoles, de los cuales el más
importante es el α-tocoferol. Esta
vitamina liposoluble funciona
principalmente como protección
contra la peroxidación lipídica,
donando un electrón a un radical
peroxilipídico.
Ácido ascórbico (Vitamina C):
Es una coenzima redox que actúa
como defensa ante los radicales
libres. El ácido ascórbico reducido
puede regenerar la forma reducida
de la vitamina E, donándole
electrones en un ciclo redox.
Carotenoides: Este término se
aplica al β-caroteno (precursor de
la Vitamina A) y a compuestos
similares que presentan dobles
enlaces conjugados.
Flavonoides: Son un grupo de compuestos, similares estructuralmente, que
contienen anillos aromáticos en los que hay dobles enlaces conjugados.

4) Compartimentación celular
La célula procura confinar todo proceso que genere especies reactivas (ROS y
RNOS) en orgánulos subcelulares. Esta compartimentación es esencial para
controlar las especies reactivas y evitar que se extiendan por toda la célula.
La localización de las enzimas de defensa contra los radicales libres está
adaptada a la compartimentación subcelular de los procesos que las producen.

5) Secuestro de metales
Ciertos metales (como Fe2+ y Cu+) pueden donar electrones únicos en la
reacción de Fenton, la cual genera radical hidroxilo (OH•).
El Fe2+ es almacenado como Fe movilizable en la proteína ferritina. El exceso
de Fe2+ es almacenado como Fe no movilizable en depósitos de hemosiderina.

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4. Formación de radicales libres durante la fagocitosis y la

inflamación
En respuesta a la presencia de agentes infecciosos y otros estímulos, ciertas
células del sistema inmune muestran un rápido consumo de oxígeno (el llamado
"estallido respiratorio").
La generación de estas especies oxidantes es una parte del sistema de defensa
antimicrobiano humano y está diseñado para destruir los microorganismos invasores,
células tumorales y otras células señaladas para ser eliminadas.
En este proceso intervienen varias
enzimas y procesos no enzimáticos:
1. La NADPH deshidrogenasa cataliza la
transferencia de un electrón del
NADPH al O2, para formar radical
superóxido (O2–).
2. El O2– liberado en el interior del
fagolisosoma es luego transformado
en H2O2 por la SOD.
3. El H2O2 es luego transformado en ácido
hipocloroso (HOCl) por acción de la
enzima mieloperoxidasa:
H2O2 + Cl– + H+ Æ HOCl + H2O
El ácido hipocloroso es una poderosa toxina que destruye las bacterias en
segundos, gracias a las reacciones de halogenación y oxidación que produce.
Cuando los neutrófilos son activados para producir NO, también se activa la
NADPH deshidrogenasa. El NO reacciona rápidamente con el O2– y origina
peroxinitrito (ONOO–), el cual puede formar otros radicales. El en H2O2 formado a su
vez por la SOD, origina radical hidroxilo (OH•) en presencia de Fe2+. El peroxinitrito y
el radical hidroxilo atacan y destruyen también las bacterias.