IDENTIFICACIÓN Y RECONOCIMIENTO DE BIOMOLÉCULAS

ORGÁNICAS POR MEDIO DE REACCIONES QUÍMICAS

IDENTIFICATION AND RECOGNITION OF ORGANIC

BIOMOLECULES BY MEANS OF CHEMICAL REACTIONS

María Fernanda López Ortiz1, Cesar Augusto Ospina Hernández1

Programa de Química, Facultad de ciencias básicas y tecnologías, Universidad del Quindío,
19/03/2018
Carrera 15 calle 12 norte, Armenia, Quindío, Colombia
*mflopezo@uqvirtual.edu.co, caospinah@uqvirtual.edu.co

Resumen
En este documento podrán encontrar algunas pruebas que se le realizaron a diferentes muestras (alimentos)
para la identificación cualitativa de biomoléculas que podrían estar presentes. Las pruebas ya están reportadas
y en la mayoría de los casos su identificación es gracias a los colores característicos para cada una, En cada
análisis se emplearon pequeñas porciones y el reactivo especifico para cada prueba. Las biomoléculas a
identificar son: lípidos, aminoácidos, azucares no reductores, proteínas y glúcidos. El objetivo es identificar la
presencia de las biomoléculas ya mencionadas en alimentos con pruebas fáciles de realizar.

Palabras claves: biomoléculas, identificación, lípidos, proteínas, glúcidos, aminoácidos.

Abstract
In this document you will find some tests that were done on different samples (food) for the qualitative
identification of biomolecules that could be present. The tests are already reported and in most cases their
identification is thanks to the characteristic colors for each one. In each analysis, small portions and the specific
reagent were used for each test. The biomolecules to be identified are: lipids, amino acids, non-reducing sugars,
proteins and carbohydrates. The objective is to identify the presence of the biomolecules already mentioned in
foods with easy tests

Keywords: biomolecules, identification, lipids, proteins, carbohydrates, amino acids.

Las biomoléculas se pueden dividir en biomoléculas

INTRODUCCIÓN
De los más de 100 elementos encontrados en la Tabla
periódica, la materia viva está constituida por unos
70 elementos y solo alrededor de 21, son esenciales
para el desarrollo y conservación de la vida. Estos
elementos se llaman bioelementos o elementos
biogénicos.1 Los bioelementos se pueden clasificar
en tres: bioelementos primarios que corresponden al
96,2% de la materia viva, los bioelementos
secundarios, que se encuentran en menor proporción
que los primarios y los oligoelementos que se
encuentran en los seres vivos en un porcentaje menor
al 0,1%.2
Las biomoléculas son moléculas que constituyen a
todo ser vivo. Una célula viva está formada
básicamente por los cuatro bioelementos más
abundantes (C, H, O y N), que combinados entre
ellos de diferentes formas, originan una gran
cantidad de compuestos, los cuales constituyen la
mayor cantidad de masa en una célula. El agua,
compuesto líquido indispensable para la vida, está
también conformada por bioelementos, su
importancia radica en que la mayoría de reacciones
intracelulares se llevan a cabo en medio acuoso.3
orgánicas e inorgánicas. Las biomoléculas
inorgánicas, son fundamentales para la vida pero no
son producidas por los seres vivos, en este grupo se
encuentran, el agua y sales inorgánicas. Por otro
lado, las biomoléculas orgánicas, son aquellas que
poseen una estructura a base de carbono y son
sintetizadas por los seres vivos, estas a su vez se
dividen en:
Los Glícidos, compuestos por carbono, hidrógeno y
oxígeno, solubles en agua. Son la fuente más
importante de suministro de energía en los seres
vivos, se dividen en monosacáridos (azúcares
simples), la unión de dos monosacáridos forman los
disacáridos y la unión de 3 – 20 monosacáridos
forman oligosacáridos, de igual manera la unión de
numerosos monosacáridos constituyen los
polisacáridos.
Los Lípidos, compuestos por carbono e hidrógeno, y
en menor medida por oxígeno, insolubles en agua,
una de sus principales características. Su principal
función es almacenar energía en los seres vivos,
dentro de este grupo se encuentran los triglicéridos
(grasas), fosfolípidos y esteroides.

1
Las Proteínas, constituidas por cadenas lineales de
aminoácidos (formadas por un grupo (-NH2) y uno
(-COOH)), son el tipo de biomoléculas más diversa
que existe. Sus funciones son específicas en cada
organismo vivo y varían de acuerdo al tipo de
estructura que posean, por lo cual existe un gran
número de proteínas dentro de una célula.
Existen dos clases de ácidos nucleicos, el ADN
(ácido desoxirribonucleico) y ARN (ácido
ribonucleico), polímeros especializados en
almacenar, transmitir y expresar la información
genética en secuencias de aminoácidos, las cuales
después de pasar por algunos procesos, pueden
conforman las proteínas de una célula.4
Actualmente, las biomoléculas son implementadas
en variedad de estudios los cuales buscan tener gran
impacto en áreas como la medicina, evaluando la
incidencia que tienen en enfermedades como la
obesidad, el lupus e incluso enfermedades
periodontales. En la genética son usadas para
esclarecer el origen de la vida, lograr la clonación de
genes, e incluso se busca la clonación de organismos
complejos, en la biotecnología se emplean en la
producción de alimentos, la agricultura, la limpieza
del ambiente, entre otras.5
Prueba de Benedict
El reactivo de Benedict está constituido por una
disolución de sulfato de cobre II, citrato de sodio y
carbonato de sodio. Al tratar el azúcar con estos
reactivos, experimentan una reacción de oxidación.
El cobre II en disolución acuosa, de color azul, se
reduce a cobre I, el cual precipita como óxido de
cobre I, de color rojo.6
Prueba de Biuret
Se basa en la reacción coloreada del reactivo de
Biuret, Biuret produce un complejo de color púrpura
al reaccionar con una solución alcalina de sulfato de
cobre. Los péptidos (a partir de los tripéptidos) y las
proteínas reaccionan con el reactivo de Biuret. Los
iones cúpricos forman un complejo de coordinación
con los pares de electrones no compartidos del N,
presente en los aminoácidos de las proteínas.7
Prueba con Ninhidrina
La Ninhidrina (agente oxidante poderoso) es un
reactivo muy útil para detectar aminoácidos, es el
hidrato de una tricetona cíclica que cuando reacciona
con un aminoácido forma un color violeta.8
El objetivo de este trabajo fue la identificación de
biomoléculas orgánicas (lípidos, glúcidos, proteínas
y aminoácidos, azúcares reductores), por medio de
reactivos como Benedict, Biuret, Lugol, Ninhidrina,
Sudán III y pruebas solubilidad, las cuales nos
ayudaron para su correcta identificación.
2
Materiales y métodos
Para el desarrollo de la práctica se realizaron seis
pruebas de identificación de biomoléculas.
1. Prueba para determinar la presencia de
almidón.
Para determinar la presencia de almidón, primero se
tomó una pequeña muestra de arracacha rayada en
un tubo de ensayo y se le adicionaron 1mL de agua
seguido de 2 a 3 gotas de Lugol, se agitó la mezcla
y se observó el color de la reacción. Este
procedimiento se repitió empleando manzana,
maicena y pan
2. Identificación de glícidos
Para la identificación de glícidos, se peló y rayó un
pedazo de manzana hasta extraer el zumo. Se tomó
una porción del zumo en un tubo de ensayo y se le
adicionaron 10 gotas de agua y 1 mL del reactivo de
Benedict, se mezcló y se colocó el tubo en un vaso
de precipitado con agua hirviendo por 30 segundos
y se observó el color que desarrollaba la reacción.
Este procedimiento se repitió con la bebida de fruta,
la glucosa y la sacarosa.
3. Pruebas para determinar proteínas y
aminoácidos
3.1 Proteínas
Para la identificación de proteínas, se tomó un huevo
y se separó la clara de la yema. Se diluyó la clara del
huevo teniendo en cuenta que por cada 2 partes de la
clara se le agrega 1 de agua; después se agitó y se le
adicionó 1 mL de albúmina y 7 gotas del reactivo de
Biuret seguido a esto se observó la coloración de la
reacción. Este procedimiento se repitió empleando
maicena, leche y un aminoácido (cisteína).
3.2 Aminoácidos
Para esta prueba se tomaron cinco tubos de ensayo,
respectivamente se le adicionó 1 mL de leche, clara
de huevo, harina de trigo, maicena y un aminoácido
(cisteína), a cada uno de los tubos se le adicionó 1
mL del reactivo de Ninhidrina y se calentó a baño
maría durante 10 min. Luego se observó el color de
la reacción.
4. Prueba de solubilidad para lípidos
Para esta prueba se tomaron 2 mL de aceite en un
tubo de ensayo, luego se le agregaron 2 mL de
cloroformo y se agitó. En otro tubo de ensayo se
adicionaron 2 mL de aceite y se le agregaron 2 mL
de agua y se agitó. En un tercer tubo se adicionaron
2 mL de aceite y se le agregaron 2 ml de etanol. Este
procedimiento se repitió empleando glicerina y que reacciona con almidón produciendo un color
yema de huevo; se observó las coloraciones de las púrpura.9 La prueba de yodo se da como
reacciones y se tomó apuntes. consecuencia de la formación de cadenas de
poliyoduro a partir de la reacción entre el almidón y
el yodo presente en el reactivo de Lugol. La
5. Prueba con Sudán III coloración característica de esta prueba desaparece
al calentar, porque se rompe la estructura que se ha
producido, pero vuelve a aparecer al enfriar. 10
Para la prueba con Sudán III, se tomaron 2 ml de
El Lugol permite reconocer la presencia de almidón
aceite en un tubo de ensayo y se le adicionó una
pequeña cantidad de Sudán III y 2 ml de agua, se en alimentos como el pan, los tubérculos, alimentos
agitó y se observó el color de la reacción. Este provenientes del trigo entre otros11.
procedimiento se repitió empleando yema de huevo
y agua.
1. En la tabla 2. Se presenta las diferentes
muestras que se emplearon para la
Resultados y discusión
determinación de glícidos
En la tabla 1. Se presenta las diferentes muestras
Prueba de Benedict
que se emplearon para determinar la presencia de muestra
Antes de calentar Después de calentar
almidón
Inicial amarillo luego
Manzana amarillo y preciitado
torno a verde
Muestra Observaciones Bebida de primero rojo luego amarillo verdoso y
inicial blanca frutas verde oscuro precipitado naranja
luego del lugol incoloro después naranja oscuro y
Glucosa
Arracacha azul claro precipitado
se torno violeta incolo y luego viro a
Sacarosa café
oscuro azul claro
la manzana
estaba oxidada Tabla 2. Resultado de las muestras orgánicas
Manzana luego del lugol
la sln viro a
amarillo En la figura 2 se puede observar los resultados de la
inicial blanco prueba para la identificación de glícidos
con el lugol
Pan
cambio a violeta
oscuro
inicial blanco
Maicena luego violeta
oscuro.

Tabla 1. Resultado de las muestras orgánicas

En la figura 1. Se puede observar los resultados

de la Prueba para la identificación de almidón

Figura 2. 1. manzana, 2. Jugo de fruta, 3. Glucosa,

4. Sacarosa)

Los Glícidos están formados por carbono (C),

Figura 1. 1. Arracacha, 2. Manzana, 3. Maicena, 4.
Pan).
Para esta prueba se emplea el Lugol el cual es usado
para determinar la presencia o alteración de almidón
u otros polisacáridos, una solución de yodo- diyodo
disuelto en una solución acuosa de yoduro de potasio
hidrógeno (H) y oxígeno (O) con la fórmula general
(CH2O)n. Los glúcidos incluyen azúcares,
almidones, celulosa, y muchos otros compuestos que
se encuentran en los organismos vivientes; cada uno
de ellos se puede identificar mediante pruebas en el
laboratorio, tal como la prueba de Benedict, ya que
se utiliza para el reconocimiento de azúcares
reductores.12 El poder reductor que pueden presentar
los azúcares proviene de su grupo carbonilo, que
puede ser oxidado a grupo carboxilo con agentes
oxidantes suaves. Si el grupo carbonilo se encuentra
combinado no puede presentar este poder reductor13.

3
La prueba de Benedict, al igual que la de Fehling Muestra Biuret
identifica azúcares reductores. El reactivo de incoloro
Benedict consta de: Sulfato cúprico, Citrato de Clara pequeñas
sodio, Carbono Anhidro de Sodio y además se zonas de rosa
emplea NaOH para alcalinizar el medio14.
blanco inicial
Leche luego amarillo
En estos ensayos es posible observar que la sacarosa
palido
(un disacárido de glucosa y fructosa) es capaz de
darnos un falso positivo. Esto ocurre por las blanco luego
condiciones en que se realiza la prueba. La sacarosa cambio
Harina
no contiene ningún átomo de carbono anomérico amarilo con
libre ya que los carbonos anoméricos de sus dos grumos
unidades monosacáridos constituyentes se hallan incoloro
unidos entre sí covalentemente mediante un enlace Cisteina luego amarillo
O-glucosídico. Por esta razón, la sacarosa no es un claro
azúcar reductor y tampoco posee un extremo
reductor 13 y por lo tanto la prueba de Benedict debe Tabla 3. Resultado de las muestras implementadas
dar (-)

Otra de las sustancias a la que se le realizó la prueba En la figura 3 se puede observar los resultados de la
fue a la glucosa la cual dio (+), ya que una de sus prueba para la identificación de proteínas
propiedades es la de poseer poder reductor que
deben al grupo aldehído (-COH) que tienen en su
molécula. Este poder reductor, puede ponerse de
manifiesto frente a las sales de cobre, ya que merced
al mismo, el ión cúprico se reduce por ganancia de
un electrón, pasando a ión cuproso el cual se puede
identificar debido a la presencia de un precipitado
rojo-ladrillo o naranja14

𝐶𝑢2+ → 𝐶𝑢+
Figura 3. 1. Clara de huevo, 2. Leche, 3. Harina de
trigo, 4. Cisteína.
La acción reductora se manifiesta mediante una
solución de sulfato cúprico (CuSO4), de color azul,
que pasa a óxido cuproso (Cu2O) de color rojo
La prueba de Biuret, la producen los péptidos y las
ladrillo, que precipita.15
proteínas, pero no los aminoácidos, ya que se debe a
la presencia del enlace peptídico (-CO-NH-) que se
2. Pruebas para determinar proteínas y destruye al liberarse los aminoácidos16. Cuando una
aminoácidos proteína se pone en contacto con un álcali
concentrado, se forma una sustancia compleja
2.1 En la tabla 3. Se presenta las diferentes denominada Biuret, con este reactivo podemos
muestras que se emplearon para la identificar proteínas ya que la interacción entre el
determinación de proteínas reactivo de Biuret y la proteína nos proporciona una
coloración violeta, dando prueba positiva para la
identificación de proteínas17.
En los resultados obtenidos en esta práctica de
laboratorio nos dio negativa al no haber presencia de
proteínas ya que no se obtuvo dicha coloración
característica a pesar de que si hubo un cambio de
coloración en las pruebas pasaron de color blanco o
incoloro a un amarillo tenue, esta coloración nos
indica que no había presencia de proteínas ya que al
reaccionar el reactivo de Biuret con las muestras no
se dio el complejo entre los iones cúpricos del reactivo
de Biuret en medio alcalino con los electrones no
saturados de los átomos de nitrógeno y oxígeno de los
enlaces de las proteínas.

4
3.2 En la tabla 4. Se presenta las diferentes muestras Muestra Observaciones
que se emplearon para la determinación de Aceite + cloroformo dos fases,
aminoácido incoloro y con
burbujas
Muestra Ninhidrina calentar pequeñas
incoloro violeta y Aceite + agua dos fases,
Clara luego cambio precipitado incoloro
a amarillo rosado Aceite + etanol dos fases,
blanco inicial incoloro y con
Leche permació el violeta burbujas
color Glicerina + cloroformo
blanco y incoloros y en
Harina violeta Glicerina + agua
siguió así dos fases
Glicerina + etanol
blanco y el
violeta y Yema + cloroformo amarillo pálido y
maicena color no
precipitado grumos
cambio
Yema + agua amarillo
incoloro y
Yema + etanol amarillo menos
Cisteina permaneció amarillo
intenso y con
incoloro
grumos

Tabla 4. Resultado de las muestras implementadas

Tabla 5. Resultados de las Muestras orgánicas

En la figura 4 se puede observar los resultados de la En la figura 5 se puede observar los resultados de la
prueba para la identificación de aminoácidos prueba para la prueba de solubilidad de lípidos
(aceites).

Figura 4. 1. clara de huevo, 2. Leche, 3. Maicena,

4. Harina de trigo, 5. Cisteína).
Figura 5. 1. cloroformo, 2. Agua, 3. Etanol
La Ninhidrina es un poderoso agente y reactivo
común para visualizar las bandas de separación de En la figura 6 se puede observar los resultados de la
aminoácidos por cromatografía o electroforesis, prueba para la prueba de solubilidad de lípidos
también es utilizada con fines cuantitativos para la (glicerina).
determinación de aminoácidos. Reacciona con todos
los aminoácidos alfa cuyo pH se encuentra entre 4 y
8, dando una coloración que varía de azul a violeta
intenso. Este producto colorido (llamado Púrpura de
Ruhemann) se estabiliza por resonancia, la
coloración producida por la Ninhidrina es
independiente de la coloración original del
aminoácido18 Esta prueba es positiva tanto para
proteínas como para aminoácidos.

En la tabla 5. Se presenta las diferentes muestras

que se emplearon para la Prueba de solubilidad
para lípidos
Figura 6. 1. Cloroformo, 2. Agua, 3. Etanol

5
En la figura 7 se puede observar los resultados de la
prueba para la prueba de solubilidad de lípidos
(yema de huevo).
Figura 7. 1. cloroformo, 2. Agua, 3. Etanol
En este experimento se utilizaron tres diferentes
sustancias para su análisis: Aceite, glicerina y la
yema de huevo; cada una de ellas se disolvió en tres
solventes específicos (cloroformo, agua y etanol).
Las funciones de los lípidos van desde ser fuente de
energía hasta la formación de membranas. Son
solubles en alta proporción en disolventes no
polares (éter dietílico, cloroformo o benceno) 14.
Esos disolventes son utilizados para la extracción
de lípidos de sus vecinos más polares como: sales,
proteínas, carbohidratos y ácidos nucleicos. Un
componente estructural clave de todos los lípidos es
la elevada cantidad de enlaces carbono-carbono y
carbono-hidrogeno. Esto es lo que hace a estos
compuestos hidrofóbicos18.
En la tabla 6. Se presenta las diferentes muestras
que se emplearon para la Prueba de Sudán III
Muestra Observaciones
Dos fases
naranja en la
Aceite parte superior
e inferior
incoloro
Superior
Yema naranja e
inferior amarillo
Mezcla
Agua homogenea
color naranja
Tabla 6. Resultados de las muestras empleadas
En la figura 8 se puede observar los resultados de la
prueba de Sudán III
6
Figura 8. 1. Aceite, 2. Yema de huevo, 3. Agua
Los colorantes para grasas son más solubles en las
propias grasas que en el medio en el que van
disueltos. Así, al bañar la grasa con la solución del
colorante éste tiende a disolverse en la grasa que se
va cargando del colorante. Por regla general estos
colorantes siempre van en solución alcohólica o bien
en una mezcla de alcohol/acetona o alcohol/agua. La
tinción de color rojo es positivo para el test de Sudán
III, además de determinar que se trata de un lípido
saponificable debido a la formación de fases y
formación de jabón tras la reacción con NaOH19.
Conclusiones
 Se encontró que los alimentos que
diariamente consumimos poseen una
variedad de biomoléculas.
 Las biomoléculas analizadas son
clasificadas como lípidos mediante la
prueba con Sudan III y solubilidad, las
proteínas con la prueba de Biuret, los
aminoácidos con la prueba de Ninhidrina,
los glícidos con la prueba Benedict, y los
azúcares no reductores (almidón) con el
reactivo de Lugol.
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