UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

FACULTAD DE INGENIERIA QUIMICA

ANALISÍS INSTRUMENTAL
INFORME Nº 01

“DETERMINACIÓN DE LA LONGITUD DE
ONDA OPTIMA (𝝀𝒐𝒑𝒕𝒊𝒎𝒂 ) DE UN COMPUESTO”
d

Integrante:
 Andia Marron, Luz Clara 1426125498

Profesor: Ing. RODRIGUEZ VILCHEZ

Grupo Horario: 90G

Semestre: 2017-B

Fecha de realización: 15 de Agosto

Fecha de entrega: 22 de Agosto

2017
 LABORATORIO DE ANALISÍS
INSTRUMENTAL

I. COMPETENCIAS

Obtención del espectro óptimo para identificar un compuesto.

Uso del instrumento denominado ESPECTOFOTOMETRO.
Calidad de los resultados y su aplicación en el E.E.M.

INFORME 1: Determinación de la longitud de onda óptima (𝜆ó𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 ) de un compuesto 2

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II. MARCO TEÓRICO

2.1. ESPECTOFOTOMETRÍA

Los métodos espectroscópicos de análisis están basados en la medida de la radiación

electromagnética que es absorbida o emitida por una sustancia. En función de ello se
clasifican fundamentalmente en:

 Métodos de absorción: Se basan en la disminución de la potencia de un haz de

radiación electromagnética al interaccionar con una sustancia.

 Métodos de emisión: Se basan en la radiación que emite una sustancia cuando es

excitada previamente por medio de otro tipo de energía (térmica, eléctrica, etc).

 Métodos de fluorescencia: Se basan en la radiación que emite la sustancia cuando

es excitada previamente por un haz de radiación electromagnética.

Otras clasificaciones de los métodos espectroscópicos se establecen en función de la

región del espectro electromagnético que interviene en la técnica. Así, pueden
utilizarse regiones como rayos X, ultravioleta, visible, infrarrojo, microondas, etc. En
la Figura pueden verse las regiones del espectro electromagnético, en función de los
valores de la longitud de onda (λ) de cada radiación:

En esta figura puede también observarse como la luz visible para el ojo humano
constituye únicamente una pequeña parte del espectro electromagnético. Dado que
los primeros métodos espectroscópicos desarrollados corresponden a la región del
visible recibieron la denominación de métodos ópticos, la cual se utiliza todavía con
frecuencia.
A continuación, se ofrece una breve información sobre la ley de Lambert-Beer y la
espectrofotometría de absorción en la región visible del espectro.

INFORME 1: Determinación de la longitud de onda óptima (𝜆ó𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 ) de un compuesto 3

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Si se considera que se dispone de una fuente de radiación que hace llegar a la muestra
un haz de radiación, de longitud de onda previamente seleccionada, cuya potencia es
P0, la muestra de espesor b absorbe una parte de esa radiación incidente, de forma que
la potencia del haz disminuye después de atravesar la muestra siendo su nueva
potencia P. El cociente entre la potencia de la radiación que sale de la muestra y la de
la que incidió sobre ella, se define como transmitancia:
𝑃
𝑇=
𝑃0
La transmitancia también puede expresarse en tanto por ciento, multiplicando el
cociente anterior por 100. Es más frecuente utilizar el concepto de absorbancia, o
densidad óptica, que se define como el logaritmo de la transmitancia cambiado de
signo:
𝑃0
𝐴 = log ( ) = − log 𝑇
𝑃

De acuerdo con estas expresiones, si la muestra no absorbe radiación, P y P0

coinciden, por lo tanto, A=0, y se transmite toda la radiación T=1 (100% de
transmitancia). Si, en otro caso, se transmite solo un 1% de radiación (T=0.01),
P=P0/100, la absorción que ha tenido lugar correspondiente a A=2.
Al incidir radiación electromagnética visible sobre la materia puede ser totalmente
absorbida o totalmente reflejada. En el primer caso el objeto aparecerá de color negro
y en el segundo de color blanco. Puesto que nosotros percibimos los objetos por medio
de la luz reflejada, si hacemos incidir un haz de luz blanca (que contiene todas las
longitudes de onda) sobre un objeto, éste absorberá ciertas longitudes de onda y
reflejará otras, siendo éstas últimas las responsables del color. Se dice que este color
(observado) es complementario del que se percibiría si la luz absorbida se pudiera
detectar. Dado que en la parte experimental de esta práctica las medidas van a
realizarse con espectrofotometría visible, es conveniente conocer para qué longitud
de onda tiene cada color su máxima absorción, lo que se muestra en la tabla siguiente:

INFORME 1: Determinación de la longitud de onda óptima (𝜆ó𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 ) de un compuesto 4

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Para medir los valores de absorbancia y transmitancia de una disolución se utilizan

espectrofotómetros UV-Vis, que, como puede verse en la figura, se componen de cinco
elementos principales:
 Una fuente de radiación que suele ser una lámpara de filamento de wolframio.
 Un monocromador que permite seleccionar una longitud de onda determinada
originando un haz monocromático.
 Un recipiente para contener la muestra denominado cubeta fabricado con un
material que permite el paso de la radiación en la región del espectro de interés.
Suelen ser de vidrio, plástico o cuarzo. El espesor de la cubeta más habitual es 1
cm.
 Un detector que convierte la energía radiante en una señal eléctrica.
 Una pantalla de visualización.

La ley de Lambert y Beer expresa que la absorbancia de una solución es directamente

proporcional al campo recorrido por la radiación electromagnética y a la concentración
de la solución.
A= abc
A: absorbancia
a: absortividad específica de cada soluto
b: distancia recorrida por el haz de luz en cm
c: concentración de la solución
Requerimientos para poder aplicar la Ley:
 La medición del % de T es realizada con luz monocromática.
 La medición del % de T es realizada a una región de absorción del componente a
estudiar.
 La referencia es elegida de tal manera que C=0 cuando T=100% o A=0%.

INFORME 1: Determinación de la longitud de onda óptima (𝜆ó𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 ) de un compuesto 5

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 La naturaleza de la solución debe ser tal que su transmisión responda a

variaciones de C.

2.2. ESPECTOFOTÓMETRO

Los aparatos de medida de la absorción de la radiación electromagnética se

denominan espectrofotómetros y pueden representarse de forma sencilla mediante el
siguiente esquema:

La luz procedente de la fuente se hace pasar a través del monocromador, que la

desdobla en haces monocromáticos. El colimador tiene una rendija de ajuste variable,
y según su abertura se obtiene luz de una determinada longitud de onda. La longitud
de onda que se desee utilizar se selecciona variando la posición del monocromador.
La luz que sale del colimador se hace pasar por la solución y luego incide sobre el
fototubo, donde se detecta. La señal se envía a un registrador, el cual puede ser la
escala de un galvanómetro calibrado.

INFORME 1: Determinación de la longitud de onda óptima (𝜆ó𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 ) de un compuesto 6

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III. DATOS EXPERIMENTALES

i. Solución de Co+2 en un rango de (500 – 550) nm.

o Preparamos la solución de cobalto.
o Luego insertamos dos celdas de agua destilada (blanco), para calibrar el
espectrofotómetro, esperamos que llegue a una tramitancia del 100% y una
absorbancia de 0.
o Retiramos la celda delantera y colocamos en una celda nuestra solución de
cobalto. Tomamos datos en un intervalo de (500 – 550) nm.
o Tomamos 3 veces el dato de A y %T y obtenemos un promedio.

 Absorbancia (A)

Λ nm A1 A2 A3 A prom

500 0,758 0,728 0,716 0,734

505 0,767 0,748 0,736 0,750
510 0,772 0,754 0,741 0,756
515 0,761 0,741 0,729 0,744
520 0,733 0,711 0,701 0,715
525 0,690 0,668 0,658 0,672
530 0,635 0,616 0,601 0,617
535 0,574 0,549 0,534 0,552
540 0,502 0,478 0,463 0,481
545 0,432 0,410 0,396 0,413
550 0,369 0,348 0,340 0,352

INFORME 1: Determinación de la longitud de onda óptima (𝜆ó𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 ) de un compuesto 7

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 Tramitancia (%T)

Λ nm %T1 %T2 %T3 %T prom

500 17,5 18,7 19,2 18,47
505 17,2 17,9 18,3 17,8
510 16,9 17,7 18,1 17,57
515 17,4 18,2 18,6 18,07
520 18,5 19,4 19,9 19,27
525 20,4 21,5 22,0 21,3
530 23,2 24,2 25,1 24,17
535 26,7 28,2 29,2 28,03
540 31,5 33,2 34,4 33,03
545 37,0 38,9 40,1 38,67
550 42,8 44,8 45,7 44,43

ii. Solución de Ni+2 en un rango de (550 – 750) nm.

o Preparamos la solución de niquel.
o Luego insertamos dos celdas de agua destilada (blanco), para calibrar el
espectrofotómetro, esperamos que llegue a una tramitancia del 100% y una
absorbancia de 0.
o Retiramos la celda delantera y colocamos en una celda nuestra solución de
cobalto. Tomamos datos en un intervalo de (550 – 750) nm.
o Tomamos 3 veces el dato de A y %T y obtenemos un promedio.

 Absorbancia (A)

Λ nm A1 A2 A3 A prom
550 0,080 0,071 0,070 0,074
570 0,093 0,089 0,086 0,089
590 0,125 0,124 0,120 0,123
610 0,174 0,179 0,175 0,176
630 0,247 0,253 0,246 0,249
650 0,252 0,257 0,308 0,272
670 0,310 0,307 0,305 0,307
690 0,323 0,323 0,320 0,322
710 0,347 0,347 0,345 0,346

INFORME 1: Determinación de la longitud de onda óptima (𝜆ó𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 ) de un compuesto 8

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730 0,346 0,343 0,341 0,343

750 0,304 0,300 0,299 0,301

 Tramitancia (%T)

Λ nm %T1 %T2 %T3 %T prom

550 83,3 84,8 85,2 84,43
570 80,6 81,5 82,0 81,37
590 75,0 75,2 75,9 75,37
610 67,0 66,2 66,9 66,7
630 56,6 55,9 56,7 56,4
650 49,0 48,8 56,0 51,27
670 49,0 49,3 49,5 49,27
690 47,6 47,5 47,8 47,64
710 45,0 45,0 45,2 45,07
730 45,1 45,4 45,6 45,37
750 49,7 50,1 50,2 50,00

iii. Muestra de Mn (3Mm) en un rango de (500 – 600) nm.

o Diluimos la solución de KMnO4
o Luego insertamos dos celdas de agua destilada (blanco), para calibrar el
espectrofotómetro, esperamos que llegue a una tramitancia del 100% y una
absorbancia de 0.
o Retiramos la celda delantera y colocamos en una celda nuestra solución de
cobalto. Tomamos datos en un intervalo de (500 – 600) nm.
o Tomamos 3 veces el dato de A y %T y obtenemos un promedio.

Tomamos 10ml  25 ml (AFORO)

V1 . C1 = V2 . C2
10ml.(3x10-3) = 25ml.C2
C2 = 0.0012M

INFORME 1: Determinación de la longitud de onda óptima (𝜆ó𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 ) de un compuesto 9

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 Absorbancia (A)

Λ nm A1 A2 A3 A prom
500 2,094 2,088 2,039 2,074
505 2,086 2,083 2,105 2,091
510 2,160 2,132 2,090 2,127
515 2,484 2,478 2,347 2,436
520 2,730 2,723 2,683 2,712
525 2,578 2,552 2,846 2,659
530 2,334 2,325 2,362 2,340
535 2,440 2,453 2,382 2,425
540 2,621 2,618 2,584 2,608
545 2,462 2,426 2,535 2,474
550 1,954 1,913 2,079 1,982
555 1,616 1,604 1,662 1,627
560 1,574 1,572 1,569 1,572
565 1,526 1,526 1,553 1,535
570 1,239 1,242 1,330 1,270
575 0,836 0,829 0,922 0,862
580 0,542 0,543 0,596 0,560
585 0,407 0,408 0,431 0,415
590 0,351 0,354 0,360 0,355
595 0,325 0,327 0,329 0,327
600 0,306 0,307 0,309 0,307

 Tramitancia (%T)

Λ nm %T1 %T2 %T3 %T prom

500 0,8 0,8 0,9 0,8
505 0,8 0,8 0,8 0,8
510 0,7 0,7 0,8 0,7
515 0,3 0,3 0,4 0,3
520 0,2 0,2 0,2 0,2
525 0,3 0,3 0,2 0,3
530 0,5 0,5 0,4 0,5
535 0,4 0,4 0,4 0,4
540 0,2 0,2 0,3 0,2
545 0,3 0,4 0,3 0,3

INFORME 1: Determinación de la longitud de onda óptima (𝜆ó𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 ) de un compuesto 10

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550 1,1 1,2 0,8 1,0

555 2,4 2,5 2,2 2,4
560 2,7 2,7 2,7 2,7
565 3,0 3,0 2,8 2,9
570 5,8 4,7 4,7 5,1
575 14,9 14,8 12,0 13,9
580 28,7 28,7 25,4 27,6
585 39,2 39,1 37,1 38,5
590 44,6 44,3 43,6 44,2
595 47,3 47,2 46,9 47,1
600 49,5 49,3 49,2 48,3

iv. Indicador ácido – base: fenoftaleina (500 - 600) nm

o Agregamos fenoftaleina a una solución básica
o Luego insertamos dos celdas de NaOH (blanco), para calibrar el
espectrofotómetro, esperamos que llegue a una tramitancia del 100% y una
absorbancia de 0.
o Retiramos la celda delantera y colocamos en una celda nuestra solución de
cobalto. Tomamos datos en un intervalo de (500 – 600) nm.
o Tomamos 3 veces el dato de A y %T y obtenemos un promedio.

 Absorbancia (A)

Λ nm A1 A2 A3 A prom
500 0,047 0,050 0,057 0,051
510 0,061 0,068 0,077 0,069
520 0,084 0,088 0,100 0,091
530 0,110 0,116 0,133 0,120
540 0,144 0,153 0,168 0,155
550 0,163 0,169 0,170 0,167
560 0,128 0,129 0,115 0,124
570 0,069 0,066 0,054 0,063
580 0,027 0,026 0,019 0,024
590 0,007 0,007 0,004 0,006
600 0,000 0,000 0,000 0,000

INFORME 1: Determinación de la longitud de onda óptima (𝜆ó𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 ) de un compuesto 11

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 Tramitancia (%T)

Λ nm %T1 %T2 %T3 %T prom

500 89,8 89,2 87,6 88,9
510 86,2 85,6 83,7 85,2
520 82,4 81,6 79,4 81,1
530 77,6 76,5 73,6 75,9
540 71,8 70,4 67,9 70,0
550 68,8 67,7 67,6 68,0
560 74,4 74,3 76,8 75,2
570 85,4 85,8 88,3 86,5
580 94,0 94,2 95,7 94,6
590 98,4 98,4 99,1 98,6
600 99,9 100 100 100

INFORME 1: Determinación de la longitud de onda óptima (𝜆ó𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 ) de un compuesto 12

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IV. TRATAMIENTO DE DATOS

 Gráficas
- Longitud de onda optima

i. Solución de Co+2 en un rango de (500 – 550) nm.

Λ nm A %T
500 0,734 18,47
505 0,750 17,8
510 0,756 17,57
515 0,744 18,07
520 0,715 19,27
525 0,672 21,3
530 0,617 24,17
535 0,552 28,03
540 0,481 33,03
545 0,413 38,67
550 0,352 44,43

𝜆 𝑜𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 = 510 𝑛𝑚

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ii. Solución de Ni+2 en un rango de (550 – 750) nm.

Λ nm A %T
550 0,074 84,43
570 0,089 81,37
590 0,123 75,37
610 0,176 66,7
630 0,249 56,4
650 0,272 51,27
670 0,307 49,27
690 0,322 47,64
710 0,346 45,07
730 0,343 45,37
750 0,301 50,00

𝜆𝑜𝑝𝑡𝑖𝑚𝑜 = 710 𝑛𝑚

INFORME 1: Determinación de la longitud de onda óptima (𝜆ó𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 ) de un compuesto 14

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iii. Muestra de Mn (3Mm) en un rango de (500 – 600) nm.

Λ nm A %T
500 2,074 0,8
505 2,091 0,8
510 2,127 0,7
515 2,436 0,3
520 2,712 0,2
525 2,659 0,3
530 2,340 0,5
535 2,425 0,4
540 2,608 0,2
545 2,474 0,3
550 1,982 1,0
555 1,627 2.4
560 1,572 2,7
565 1,535 2,9
570 1,270 5,1
575 0,862 13,9
580 0,560 27,6
585 0,415 38,5
590 0,355 44,2
595 0,327 47,1
600 0,307 48,3

𝜆𝑜𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 = 520 𝑛𝑚

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v. Indicador ácido – base: fenoftaleina (500 - 600) nm

Λ nm A %T
500 0,051 88,9
510 0,069 85,2
520 0,091 81,1
530 0,120 75,9
540 0,155 70,0
550 0,167 68,0
560 0,124 75,2
570 0,063 86,5
580 0,024 94,6
590 0,006 98,6
600 0,000 100

𝜆𝑜𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 = 550 𝑛𝑚

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V. RESULTADOS

o Solución de Co+2 en un rango de (500 – 550) nm.

𝜆𝑜𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 = 510 𝑛𝑚
o Solución de Ni+2 en un rango de (550 – 750) nm.
𝜆𝑜𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 = 710 𝑛𝑚
o Muestra de Mn (3Mm) en un rango de (500 – 600) nm.
𝜆𝑜𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 = 520 𝑛𝑚
o Indicador ácido – base: fenoftaleina (500 - 600) nm
𝜆𝑜𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 = 550 𝑛𝑚

VI. CONCLUSIONES

A partir de las gráficas mostradas, y de los valores óptimos obtenidos en las

diferentes soluciones, podemos apreciar que estos resultados, son muy cercanos
al valor teórico.
Concluimos que la longitud de onda de una solución no depende de la
concentración que este tenga.

INFORME 1: Determinación de la longitud de onda óptima (𝜆ó𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 ) de un compuesto 17

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VII. RECOMENDACIONES

o Mantener limpio el área de la celda por donde pasará el haz de luz.

o Mantener el blanco en la parte posterior de la celda y la solución que analizaremos
en la parte delantera.
o Debemos tener en cuenta que el blanco que se utilizará para cada solución debe
ser el correcto.
o Trabajar siempre con soluciones a temperatura de ambiente, ya que la coloración
de la solución será la adecuada.

VIII. BIBLIOGRAFÍA

 https://qcabiologica.files.wordpress.com/2009/11/tp-1espectrofotometrc3ada.pdf
 https://es.slideshare.net/asaor/espectrofotometria-presentation
 https://es.slideshare.net/juandavidjaramilloorozco1/laboratoriodeespectrofotome
tria

INFORME 1: Determinación de la longitud de onda óptima (𝜆ó𝑝𝑡𝑖𝑚𝑎 ) de un compuesto 18