Informe de actividad práctica 2

Integrantes: Vicente Astorga

Makarena Cortez

Rafaela Martínez

David Messina

Docente: Rocío Álvarez

1.- Describa la técnica y las características del modelo utilizado.

El experimento realizado consta de un baño de órganos aislado, el cual mantenía viable una parte
de tejido de aorta de rata (Sprague Dawley). Esta técnica tiene ciertas características fundamentales
que intentan igualar a las condiciones normales para así mantener el tejido en óptimas condiciones,
una solución fisiológica adecuada. En este caso utilizamos la solución de Krebs-Henseleit, además
de temperatura constante de 37ºC, más suplemento continuo de gas carbógeno.

2. ¿Cuál fue el experimento que realizó? Elabore 3 objetivos del trabajo experimental realizado
Describa los materiales y métodos utilizados.

El experimento efectuado consistió en medir la tensión de una muestra de tejido de aorta de rata
ante la exposición a dos soluciones distintas.

Objetivo 1: Identificar y conocer la base sobre la técnica del baño de órgano aislado.

Objetivo 2: Comprender los mecanismos de contracción y relajación del músculo liso.

objetivo 3: Comparar la tensión de la aorta de rata al ser expuesta a una solución fisiológica
y una despolarizante.

Materiales:

 Baño de órganos.
 Aorta torácica de rata.
 Tensiómetro conectado a un computador.
 1 L de solución de Krebs- Henseleit.
 500 mL solución despolarizante.
 Baño termorregulado a 37º

Concentración milimolar (mM) de los compuestos utilizados en

las soluciones.
Solución de Krebs-Henseleit Solución despolarizante
NaCl 122 56,7
KCl 4,7 70,0
NaHCO3 15,5 15,5
KH2PO4 1,2 1,2
MgCl2 x 6H2O 1,2 1,2
CaCl2 x 2H2O 2,0 2,0
C6H12O6 x H2O 11,5 11,5
EDTA 0,026 0,026
Metodología

Se le suministró CO2 a una rata Sprague Dawley macho de 300 gramos aproximadamente, para
extraer la aorta torácica por toracotomía. Los anillos vasculares del tejido fueron puestos entre dos
alambres de plata dentro del baño de órganos para medir la tensión generada, calibrada a una
tensión inicial de 10 mN, con la solución de Krebs a una temperatura de 37ºC previamente calentada
en el baño termorregulado. Posteriormente se procedió a vaciar la solución de Krebs presente en el
baño de órganos, para luego verter hasta cubrir por completo la aorta con la solución rica en potasio
a una temperatura de 37º ya calentada en el baño termorregulado. Finalmente esperamos algunos
minutos para observar la tensión medida de la aorta. Repetimos este proceso otras 2 veces para
obtener así 3 resultados.

3. ¿Qué registros obtuvo? Identifique en sus registros la variable dependiente y la independiente

Cuantifique y tabule los resultados obtenidos

La variable independiente fue el tiempo medida en minutos y la variable dependiente fue la fuerza
de tensión medida en mili newtons (mN).

Etapa experimental. Fuerza de la contracción (mN).

Inicial 10
K+ 1 23
Lavado 1 10
K+ 2 23
Lavado 2 10
K+ 3 20
Lavado 3 8
4. ¿Qué efecto esperaba observar tras la estimulación con alto K+? Fundamente explicando el
mecanismo asociado

Se esperaba que el tejido que se encuentra cubierto por esta solución de potasio nos dé como
resultado una contracción muscular, esto se explica de manera que fisiológicamente al estimular
con potasio lo que ocurre es que entra en acción la bomba sodio/potasio atpasa con gasto de
energía, la cual ingresa potasio hacia el interior de la célula y expulsa sodio al lec, cambiando la
polaridad de la membrana, la entrada de potasio induce la apertura de canales de calcio
dependientes de voltaje lo cual permite la entrada de este al interior de la célula. Cuando la
concentración de calcio aumenta al interior de la célula, éste se une a la calmodulina para formar
un complejo Ca++-calmodulina, que después activa la miosina cinasa de cadena ligera (MLCK). La
MLCK fosforila la cadena ligera de miosina (MLC) para así generar la contracción muscular. (Guyton
y Hall, 2011)
5. ¿Cómo se explica el efecto observado tras el lavado sobre la tensión?, ¿es esta respuesta de
importancia fisiológica?

Al realizar el lavado, se vuelve a las condiciones fisiológicas iniciales, por lo que el tejido recupera su
tono basal debido a su respuesta homeostática. Esta respuesta homeostática consiste
principalmente en la recuperación de las concentraciones de sodio, potasio y calcio intracelulares
debido a la acción de la bomba Na+/K+ atpasa y al intercambiador Na+/Ca++. Debido a que el nivel
de calcio intracelular disminuye, la miosina fosfatasa elimina el fosfato de la MLC produciendo así la
relajación. (Guyton y Hall, 2011).

Esta respuesta es de suma importancia fisiológica, ya que, si no existiera, el organismo no podría

regular condiciones de importancia vital, como la presión sanguínea.

6. Compare y discuta, en base a criterios claramente definidos, los resultados obtenidos por los
distintos grupos de trabajo.

En base a los resultados obtenidos por los distintos grupos, se puede observar que existe cierto
periodo de sensibilización o adaptabilidad de parte del tejido, ya que, las primeras veces que fue
sometido a la solución despolarizante la magnitud de la contracción fue menor, sin embargo, ésta
fue aumentando a medida que el tejido iba siendo sometido más veces al procedimiento
experimental.

También se puede observar una correlación directamente proporcional entre el tamaño de la rata
y la fuerza de contracción de la aorta. En todos los experimentos realizados, el grado de contracción
inicial tenía una fuerza de 10 mN, para el caso de la rata de 400 g se alcanzó un máximo de
contracción cercano a los 40 mN, en cambio para el caso de la rata de 200 g este máximo no superó
los 25 mN.

7. En base a los resultados obtenidos, concluya acerca de las propiedades excitables del músculo
liso, su relación con la composición iónica del LEC y la causa de su capacidad de recuperación tras
una respuesta contráctil

En base a los resultados se puede concluir que la composición iónica del LEC tiene un efecto directo
en la respuesta contráctil y de relajación del músculo liso. Se pudo observar que, bajo condiciones
fisiológicas simuladas, la muestra de tejido mantiene un grado de tensión constante, sin embargo,
al modificar la composición iónica aumentando la concentración de potasio de forma considerable,
se produce un aumento en la tensión medida debido a un aumento del grado de contracción del
tejido producto del mecanismo antes señalado en la pregunta 4. La capacidad de recuperación se
debe principalmente a las bombas NA+/K+ atpasa y al intercambiador Na+/Ca++, éstas son las
encargadas de restablecer el potencial de membrana basal del tejido, disminuyendo así la
concentración de Ca++ intracelular, produciendo la relajación mediante el mecanismo descrito en
la pregunta 5.
Bibliografía
https://es.scribd.com/document/272873195/Potenciales-de-Membrana-y-Potenciales-de-Accion-
en-El-Musculo-Liso

http://www.scielo.org.co/pdf/cm/v38n1/v38n1a04.pdf

http://bioquimicacelular.blogspot.com/2008/09/consejos-para-la-realizacion-de-una.html
http://www.saha.org.ar/pdf/libro/Cap.019.pdf

Guyton, A. and Hall, J. (2011). Tratado de fisiología médica. 12th ed. Elsevier España, p.94.