BIO 141c

Citoesqueleto y Movimiento Celular

Dra. Alejandra Alvarez

 El Citoesqueleto

http://cellix.imba.oeaw.ac.at/Videotour/video_tour.html

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Contenidos:

1. Aspectos Generales del Citoesqueleto

2. Filamentos Intermedios
3. Microtúbulos
4. Cilios y Flagelos
5. Microfilamentos o Filamentos de Actina
6. Proteínas Asociadas a Actina
7. Contracción Muscular

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 1. Aspectos Generales del Citoesqueleto
Es una red compleja de filamentos proteicos que se
extiende a través del citoplasma

Funciones:
• Permite a las células eucariontes
adoptar diversas formas
• Permite a las células llevar a cabo
movimientos coordinados y dirigidos
• Controla la organización espacial de
organelos y complejos proteicos
dentro del citoplasma celular y permite
la comunicación entre ellos

Las bacterias no tienen un citoesqueleto complejo

Debe haber sido un factor crucial en la evolución
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Los filamentos del citoesqueleto se forman por
polimerización de monómeros

Proteínas accesorias controlan la polimerización y ensamble

de las proteínas del citoesqueleto. El proceso también se
controla con la unión de nucleótidos (GTP, ATP…) y las
modificaciones postraducionales (fosforilación…)

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 La formación y desensamble de los filamentos
del citoesqueleto es regulada

Molecular Biology of the Cell 2008

 Tres tipos de filamentos proteicos, compuestos a
partir de monómeros, conforman el citoesqueleto:
Filamentos Microfilamentos o
Microtúbulos Filamentos de Actina
Intermedios

Los filamentos cambian continuamente su distribución y longitud

(filamentos de actina>microtúbulos>filamentos intermedios)
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 Fibroblasto
Los tres tipos de filamentos

Microtúbulos Microfilamentos o
Filamentos Intermedios
Filamentos de Actina

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Estas redes de filamentos trabajan en forma conjunta

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2. Filamentos Intermedios

• Son fibras proteicas de gran

resistencia
• Son como cuerdas enrolladas de 8 a
10 nm de diámetro (intermedio entre
microfilamentos y microtúbulos)
• Forman una red alrededor del núcleo,
que se extiende hacia la periferia

• Son importantes en células sujetas a

tensión (epiteliales) y también en
neuronas y células musculares

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Modelo de asociación de filamentos intermedios (FI)

monómero región α-hélice

(coiled-coil) dímero sobreenrollado

tetrámero dos dímero sobreenrollados

dos tetrámeros empaquetados juntos

ocho tetrámeros enrollados en un filamento tipo cuerda

 Características generales de los FI:

• Función más importante: forma,

estructura y estabilidad de las células

• Son los menos dinámicos

• Formados por proteínas fibrosas (no

globulares) con monómeros de alto
peso molecular

• Existen distintos tipos de monómeros dependiendo del tipo celular

• Polimerización: Asociación lateral (se regula por fosforilación)

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¿Como los filamentos intermedios participan en la
mantención de la forma e integridad de las células?

Los filamentos intermedios

son altamente resistentes a
la tensión

Se deforman fácilmente y
no se rompen

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 Distintos monómeros proteicos de FI

Características Generales
• Un dominio central de ~310 aminoácidos de estructura α-hélice
• Los dominios amino y carboxilo terminal varían en tamaño y
secuencia
• Presentan repeticiones de siete aminoácidos en la región central

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Tipo I: Queratinas - Keratinas

• Los filamentos de
keratina mantienen juntas
capas de células
(epitelios, piel, cabello)

• Desmosomas conectan
los filamentos de keratina
de una célula a otra

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 Los filamentos intermedios mantienen la
estabilidad de los tejidos

Molecular Biology of the Cell 2008

Tipo II: Familia de las vimentinas

Forman homo y hetero- dímeros

• Vimentinas (fibroblastos,
vasos sanguíneos, glóbulos
blancos, células en cultivo y
endotelio)

• Desminas (músculo liso y

estriado)

• Proteína glial acídica

(astrocitos, células de
Schwann)

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 Tipo III: Neurofilamentos

• Los NF presentan numerosos puentes (esto es muy importante

para dar estabilidad al largo y fino axón)

• Los FI de las células gliales son más lisos y con menos

puentes

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 Tipo IV: Láminas nucleares

• Están en todas las células

• Forman una red proteica bajo la membrana nuclear

• La red es dinámica y se disocia en la mitosis

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 3. Microtúbulos

Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)

 Los MTs participan en Mitosis

Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)

Red de microtúbulos (MT) en una célula
 3. Microtúbulos
β-tubulina

25 nm

• Tubos huecos formados por dímeros

heterodímero de
de tubulina
subunidad del microtúbulo
tubulina
protofilamento
• Heterodímeros α y β (aprox 450 aa)
• 13 protofilamentos por MT
• Presentes en todas la células eucariontes
• Abundantes en cerebro (10 –20 % proteína
total)
• El MT es una estructura polar, para cada
extremo del MT, la subunidad (α o β) que
queda expuesta es distinta

α-tubulina

Molecular Biology of the Cell 2008 BIO 141c

Polimerización de tubulina

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 Polaridad de los MT:
extremos más y menos

Molecular Biology of the Cell 2008 BIO 141c

 Los MTs son estructuras
altamente dinámicas

El extremo más sufre mayores ciclos

de crecimiento y acortamiento

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 Ciclos de crecimiento y acortamiento de los MTs

crecimiento rápido extremo con CAP de GTP

pérdida acidental del CAP CATÁSTROFE

acortamiento rápido

formación de un nuevo CAP RESCATE

crecimiento rápido extremo con CAP de GTP

CAP : casquete
Molecular Biology of the Cell 2008
La inestabilidad dinámica de los MTs
está dada por la hidrólisis de GTP

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Proteínas en la membrana plasmática estabilizan los MTs

Estabilización de los extremos más

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Distintas proteínas regulan la dinámica de los MTs

RESULTADO

microtúbulos
mas largos y
ESTABILIZACIÓN menos
aumenta tasa de crecimiento /
dinámicos
disminuye frecuencia de
catástrofes

RESULTADO
CAP de GTP
en el extremo DESTABILIZACIÓN microtúbulos
mas del MT mas cortos y
mas
dinámicos
aumenta la frecuencia
de catástrofes
Orientación de los MTs en la célula

Los extremos menos se

encuentran en el centro
organizador de MTs;
los extremos más,
cerca de la membrana
plasmática

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Los MT crecen de los anillos de γ-tubulina en el centrosoma

Molecular Biology of the Cell 2008

 El HUSO MITÓTICO

Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)

 Los microtúbulos transportan vesículas y emanan a
partir de centros organizadores en el centro de las células
La organización y distribución de organelos requiere de la
red de microtúbulos y proteínas motores microtubulares

Kinesina y Dineína

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Kinesina es un motor anterógrado
va hacia los extremos +
Dineína es un motor retrógrado
va hacia los extremos -

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 Las proteínas motoras utilizan ATP para moverse en una
dirección

Molecular Biology of the Cell 2008

Las neuronas un modelo de transporte dependiente de MTs
 Los MTs de las neuronas son muy estables
Las MAPs: proteínas asociadas a microtúbulos

Molecular Biology of the Cell 2008

4. Cilios y Flagelos

El movimiento de
cilios y flagelos se
basa en microtúbulos

Los cilios son

apéndices celulares
similares a un pelo de
0,25 µm de diámetro

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Movimientos de cilios y flagelos

Se deben al axonema

Cilio Flagelo

Un brusco golpe
hacia delante y Movimiento suave y
luego una lenta y en forma de ondas
suave recuperación

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Estructura de cilios y flagelos

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 El axonema se mueve por
deslizamiento de los MTs entre ellos

Esto requiere ATP

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 Dineína + ATP producen el desplazamiento de los MTs

La base de la dineína se une al MT de manera independiente de ATP

La cabeza globular se une al otro MT de manera ATP - dependiente
Cuando hidroliza ATP, se produce un cambio conformacional y se
mueve hacia el extremo menos impulsando el deslizamiento de un
MT respecto al otro

Molecular Biology of the Cell 2008 BIO 141c

 La dineína causa que los microtúbulos del
axonema se doblen

Molecular Biology of the Cell 2008

 5. Microfilamentos o Filamentos de Actina

• Formados por monómeros de actina,

en una hélice empacada de 8 nm de
ancho

• Constituyen una red bajo la membrana

plasmática que:

1. Da fuerza mecánica a la superficie

celular
2. Permite el cambio de forma celular
3. Permite el movimiento

Molecular Biology of the Cell 2008

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Estructura de la actina

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Los microfilamentos se forman por polimerización
de monómeros de actina

Los extremos menos crecen más lentamente que los más

BIO 141c
Los microfilamentos se forman por polimerización
de monómeros de actina

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Los filamentos de actina permiten el movimiento celular y
además generan y mantiene la polaridad de las células

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 Reguladores de la polimerización

profilina

cofilina

Cofilina desensambla filamentos de actina

Proflina estabiliza filamentos y favorece su formación

El complejo Arp2/3 induce el crecimiento de filamentos de
actina y su ramificación
Borde de avance del Lamelipodio
(borde líder)

actina y cofilina

Solo
actina

Arp2/3
B

actina
B C
C

Uniones entre filamentos

 El ensamble de la malla de actina empuja
hacia delante el borde activo del Lamelipodio
Filamento
recién formado

Neto: ensamble de
filamentos en el
borde líder

Proteína
casquete

Difusión de
monómeros
de actina
Complejo Arp

Cofilina
despolimeriza Neto: desensamble
de filamentos atrás
del borde líder
 Las células que migran presentan cambios en la
red de filamentos de actina cortical

fibras de estrés
Tres tipos de
filopodio
corteza celular ensambles de
filamentos de
actina

Haz contráctil red tipo gel Haces paralelos

estrechos

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6. Proteínas Asociadas a Actina
¿Quienes organizan estos distintos
tipos de redes o ensambles?

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Miosina es otras de las proteínas asociadas al
citoesqueleto de actina

Participa en el
movimiento de
organelos y la
reestructuración
de las redes
durante el
movimiento

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Roles de miosina-I y miosina-II en una célula eucariótica

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El ensamble de las moléculas de miosina se regula
por fosforilación

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 Las proteínas GTPasas afectan la organización de los
filamentos de actina

Molecular Biology of the Cell 2008

 Vías de transducción de señal regulan la
organización y dinámica del citoesqueleto

neutrófilo

quimioatrayente

Polimerización
Contracción
actina
actina-miosina
(protrusión)
bacteria

atrás adelante
Para avanzar se requiere adhesión: los contactos focales
7. Contracción Muscular

Las fibras musculares están formadas por miofibrillas

Gigantescas células multinucleadas con diámetro

de 50 µm y varios centímetros de largo

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Las miofibrillas están compuestas por sarcómeros

El músculo esquelético presenta una

disposición regular de actina y miosina

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En la contracción, los filamentos de miosina y
de actina se deslizan uno sobre otro,
disminuyendo la longitud del sarcómero

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Las cabezas de las moléculas de miosina que componen
los filamentos gruesos forman enlaces cruzados con los
filamentos delgados de actina adyacentes

BIO 141c
 Estructura del sarcómero

El deslizamiento de los filamentos gruesos y los delgados es

generado por la fuerza generada por las cabezas de miosina que
establecen los enlaces cruzados con los filamentos de actina
El proceso es dependiente de ATP

Figure 16-76 Molecular Biology of the Cell 2008

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 Ciclo de los enlaces cruzados

1. Al unirse ATP a la miosina, ésta se

suelta de su sitio de unión a actina
2. La cabeza de miosina libre
hidroliza ATP y se desplaza
(cambio de conformación) hacia el
extremo + del filamento de actina
(hacia Z) donde se une a actina
3. Se libera el fosfato (Pi) y produce
un cambio de conformación que
desplaza el filamento de actina
4. Se libera ADP y queda la cabeza de
miosina fijada a actina (rigor)

BIO 141c
Ciclo de los enlaces cruzados

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 El complejo troponina y la tropomiosina cambian su
posición al aumentar el Ca2+

Tropomiosina bloquea El sitio de unión de miosina a la

el sitio unión de actina se expone cuando la
miosina tropomiosina se mueve por el Ca2+

Molecular Biology of the Cell 2008

El impulso nervioso (potencial de acción) viaja por el túbulo T
e induce la liberación de Ca2+ desde el retículo sarcoplásmico
membrana plasmática

miofibra

Túbulo T
formados por
invaginaciones de la
membrana plasmática

Retículo
sarcoplásmico
• Mol Biol of the Cell. Alberts et al. 3ª Ed. Selección de Cap 16
•Mol Biol of the Cell. Alberts et al. 5ª Ed. Selección de Cap 16

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Características histopatológicas de la
enfermedad de Alzheimer
Las placas seniles
están compuestas por
agregados de fibras
del péptido β-amilode

Los ovillos
neurofibrilares están
compuestos por la
proteína tau
hiperfosforilada
Posibles mecanismos por los cuales la τ-P podría
relacionarse a muerte o disfunción neuronal

¿Es la menor
capacidad de
tau-P (o tau
mutantes) los
que lleva a una
inestabilidad
dinámica de los
MT y conduce a
la muerte?

¿Es la Tau-P la
que induce la
neurodegeneraci
ón?

¿Son los PHFs

los que llevan a la
muerte?

1º La FTDP-17 es una enfermedad neurodegenerativa distinta al Alzheimer

2º El ratón nulo para tau es viable y normal