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COMPONENTE PRÁCTICO

1. SCREENING- EVALUACIÓN DE LA TOLERANCIA DE LAS LEVADURAS AL ETANOL

Realizado por: Estudiantes de Ingenieria en Alimentos Unad- Yurani Cardenas Yela


Yurihany Solís Código 38794400-

2. ELABORACIÓN DE CERVEZA ARTESANAL

I. INTRODUCCIÓN la hidromiel y el vino. La elaboración de la cerveza tiene una


muy larga historia, y las evidencias históricas dicen que ya era
Se analiza el paso a paso para elaborar cerveza y el empleada por los antiguos egipcios.
comportamiento de cada uno de los insumos utilzados, con elfin
de evaluar la funcionalidad de cada uno.
La cerveza es una bebida fermentada y espumosa, en cuya IV. PROBLEMÁTICA
fabricación se utilizan materias primas ricas en carbohidratos
como malta, cebada, trigo, arroz, maíz desengrasado, almidón La elaboración de la cerveza artesanal se ha convertido en un
de trigo o de maíz, azúcar, lúpulo y agua, a las que se añaden atractivo para el paladar de los consumidores, lo cual se logra
levaduras. utilizando el método correcto y los materiales apropiados para
El arte de fabricar de cerveza y vino se ha ido desarrollando a conferir características únicas de acuerdo a la cepa con la cual
lo largo de 5.000-8.000 años. Esas bebidas alcohólicas se efectúa la inoculación y siembra. Sin embargo, el
resultaban particularmente atractivas para aquellos individuos desconocimiento de algunos productores hace que la obtención
de vida poco placentera, en cuanto que producían euforia de la cerveza se vea alterada por defectos, los cuales en su
alcohólica. Aprenderemos a realizar el aislamiento de cepas las mayoria se deben por una metodología inadecuada.
cuales nos sirve para innovar con nuevos sabor y aromas en la
cerveza.
V. OBJETIVOS
Palabras claves: Levadura, fermentación, screening
OBJETIVO GENERAL
II. RESUMEN
 Aprender a elaborar cerveza de manera artesanal,
Realizaremos la preparación de una cerveza artesanal tipo aplicando un proceso práctico y rápido, teniendo en
poker para la cual se utilizará un kit comercial y realizaremos cuenta diversos parámetros y controlando ciertos
también el aislamiento de cepas utilizando peptona destroza fenómenos que puedan perjudicar su calidad.
agar con diferentes concentraciones de etanol para determinar
la resistencia al mismo, las concentraciones serán de : muestra OBJETIVOS ESPECÍFICOS
blanca, al 3%,al 8% y el 12%.Las muestras se inocularán con  Conocer los insumos necesarios para elaborar cerveza
una gota de levadura para poder esperar 72 horas y evaluar los artesanal, y agregar otros, para mejorar su sabor y
resultados. presentación.
 Obtener un producto de buena calidad, que cumpla con
los requisitos para el consumo humano.
III. FUDAMENTACIÓN TEORICA

La cerveza es una bebida alcohólica muy antigua, desarrollada VI. JUSTIFICACIÓN


por los pueblos de los imperios mesopotámicos y por los
egipcios, resultado de fermentar los cereales germinados en .La obtención de una cerveza artesanal de calidad, que contenga
agua, en presencia de levadura. un sabor y aroma único, es posible si se conoce la funcionalidad
Aunque existen en el mercado cervezas de trigo, mijo y arroz, e cada uno de los insumos, la ejecución apropiada de cada una
la más habitual es la obtenida a partir de la fermentación de la de las etapas y se efectúa control de las variables de proceso,
cebada. por tal, es importante detallar e identificar cada uno de los
La elaboración de cerveza se divide a grandes rasgos en dos componentes y técnicas usadas en la elaboración, debido a la
procesos principales: el primero corresponde a la conversión importancia comercial que tiene hoy en día la cerveza artesanal.
del almidón de un cereal en azúcares fermentables por acción
de las enzimas que se encuentran en la malta y la VII. MATERIALES Y METODOLOGIA
posteriorfermentación alcohólica de los de los mismos por la
accion de la levadura . Este método, aunque tiene como  INGREDIENTES PARA ELABORACION DE
principal objetivo la producción de cerveza, es muy similar al CERVEZA
empleado en la elaboración de bebidas tales como el sake,
COMPONENTE PRÁCTICO

Los seis ingredientes básicos que por regla general intervienen Calentar agua de maceración: Se calentaron 400 mL de
en la elaboración de la cerveza son: agua hasta 69°C, para adicionar al macerado.
Empaste: Se efectuó mezclado en una olla, de la malta
 Malta: constituye uno de los elementos iniciales de la molida con el agua previamente calentada, se efectuó
elaboración de la cerveza, constituida principalmente por agitación por 60 minutos, una vez cumplida la temperatura
semillas de cebada que han germinado durante un período y tiempo. La temperatura de la mezcla se estabiliza a 70°C
limitado, hasta que han brotado a unos dos o tres durante 10 minutos. Al final del empaste se adicionaron 900
centímetros y posteriormente son retirados y desecados. La mL de agua, dado a que la mezcla se evaporaba
elaboración de la cerveza se puede hacer con rápidamente.
cualquier cereal que se "maltea" (es decir cualquier semilla Recirculado: Recircular el mosto, saliendo desde la parte
que posea almidón y sea susceptible de germinar); la inferior de la olla de maceración y volviendo a ingresar por
cebada posee entre un 60%-65% de almidón.El objetivo de la parte superior de la misma. Con esto logramos
este paso es la producción de amilasa que será utilizada homogeneizar la densidad de la mezcla (mosto)
para descomponer el almidón. favoreciendo a la extracción de azucares fermentables.
 Agua: otro elemento principal, interviene no sólo en los EXTRACCIÓN/LAVADO: Para extraer la mayor
momentos iniciales de mezclado con la malta, sino que en cantidad de azúcares, se calentaron a 76°C 2,3 L de agua y
algunos de los filtrados posteriores, introduce un sabor se adicionaron a la mezcla. En esta etapa se realizó
característico (es famoso el dicho que dice que filtración y extracción, logrando extraer la mayor cantidad
una pilsener de Dortmund sabe diferente de una de elementos fermentables al lavar el grano, hasta lograr
de Múnich). Entre el 85 y 92% de la cerveza es agua. densidad deseada del mosto.
 Lúpulo: El humulus lupulus es un ingrediente HERVOR: Calentar en olla de hervor hasta lograr
relativamente moderno en la cerveza, se trata de una planta ebullición. Mantener por un tiempo aproximado de 45
trepadora de la familia del cannabis que es la encargada de minutos.
proporcionar además de un sabor amargo característico, LUPULADO: se adicionó 2,2 gramos del lúpulo al
llega a estabilizar la espuma. Los lúpulos son responsables comenzar el hervor, será el responsable del sabor amargo
de los aromas y los sabores florales de unos tipos de característico de la cerveza. Después de 45 minutos se
cerveza, especialmente las de los EE.UU. y de Inglaterra. agregó resto de lúpulo 1 gramos, y dejó 15 minutos más. El
De esta planta se utiliza la flor hembra sin fecundar. Este lúpulo proporciona el carácter amargo (proceso que
ingrediente posee muchas propiedades medicinales entre produce la isomerización de sus resinas) y contrarresta el
ellas las tranquilizantes.Otros de los fundamentos de la sabor dulzón de la malta, haciendo la cerveza más
adición de la malta es el frenado de los procesos apetecible. Además, favorece la formación de espuma y
enzimáticos tras el primer filtrado. tiene propiedades antibacterianas y favorece la actividad de
 Levadura: se denomina así a los organismos unicelulares la levadura, lo que otorga mayor estabilidad a la cerveza.
(de tamaño 5 a 10 micras) que transforman ENFRIADO: El enfriamiento se efectuó mediante la
mediante fermentación los glúcidos y los aminoácidos de técnica denominada Whripool, la cual consistió en agitar
los cereales en alcohol etílico y dióxido de carbono (CO2). vigorosamente hasta formar remolino, con el fin de
Existen dos tipos de fermentación: lafermentación alta, que disminuir la temperatura del mosto a 25°C. Durante esta
corresponden a las levaduras flotantes (Saccharomyces etapa se adicionó 1 gramo de whirploc y se agitó por 10
cerevisiae), que genera la cerveza Ale y lafermentación minutos, este insumo es un carragenano de alto peso
baja que corresponde a las levaduras que se van al fondo molecular, extraído de las algas rojas
durante la fermentación Saccharomyces marinas (Rhodophycae) y el cual actúa como agente
carlsbergensis que sirve para la elaboración de la clarificante para mosto. Acelera la formación de una densa
cerveza Lager. La fermentación alta resulta en sabores capa de sedimiento, ahorrando tiempo, aumentando la
afrutados y otras características atípicas de las lagers, cantidad de mosto claro que se puede recuperar y dando
debido a la producción de ésteres y otros subproductos de como resultado una cerveza más brillante y clara.
fermentación. ADICION DE LA LEVADURA: Se adiciomó 1 gramo de
 Whirfloc: este insumo es un floculante el cual ayuda a levadura Saccharomyces cerevisiae, la cual es una levadura
sedimentar las particulas suspendidas y clarifica la cerveza, de alta fermentación, se activa a temperaturas relativamente
la cual se separa de los solidos por diferencia de densidad. altas, entre 18º y 25ºC, Durante ese proceso se consigue
que lal conversión del almidón en azúcares, con los
 ELABORACIÓN cuales se alimentará la levadura para producir alcohol y
dióxido de carbono (el gas de la cerveza). Debido a la
El proceso de elaboración de cerveza artesanal consta de formación de CO2
una serie de etapas que se detallan a continuación. ALMACENAMIENTO : Se envasó en botella plástica de
Maceración de la malta: se pesaron 250 gramos de un litro, en lugar oscuro a una temperatura alrededor de 15-
malta, a la cual se le efectuó maceración, con el fin de 22 °C, en este caso se almacenó debajo del mesón, siendo
extraer el almidón, el cual gracias a su contenido de este el lugar más oscuro y fresco de casa. Debido a que
azúcares, ayuda al proceso de fermentación. durante el proceso de fermentación se forma CO2, se
elaboró trampa de aire, para esto se instaló una manguera
COMPONENTE PRÁCTICO

en la parte superior del envase. En esta etapa se produce una 2. SCREENING- EVALUACIÓN DE LA
segunda fermentación. El CO2 liberado produce TOLERANCIA DE LAS LEVADURAS AL
carbonatación de la cerveza. Para lograr la carbonatación se ETANOL
adicionaron 3,5 gramos de azúcar, considerenado que la
cantidad obtenida fue de 500 mL. El alamcenamiento se I. FUDAMENTACIÓN TEORICA
efectuó por 8 días.
MADURACIÓN: Tiempo necesario en el cual la cerveza
adquiere propiedades deseadas (sabor y aroma). Los microorganismos como las levaduras, desempeñan un
papel esencial en la producción de bioetanol, mediante la
fermentación de una amplia gama de azúcares a etanol. Se
VIII. RESULTADOS utilizan en plantas industriales debido a sus valiosas
propiedades en el rendimiento de etanol (>90.0% rendimiento
teórico), tolerancia al etanol (>40.0 g/L), productividad del
Desarrollamos con éxito nuestra práctica, pero aun nuestro
producto está en su ciclo de maduración, por tal los resultados etanol (> 1.0 g/L/h), crecimiento en medios simples y
finales no son definitivos. Hasta el momento se evidencia un económicos, caldo de fermentación sin diluir con resistencia a
los inhibidores y retardar los contaminantes de las condiciones
producto turbio, con aromas fuertes, la prueba sensorial no se
de crecimiento. Como principal componente de la
realizó. Lo anterior se puede deber a la clarificación normal de
fermentación, las levaduras afectan. La cantidad de
la cerveza en maduración ya que es afectada por maltas muy
rendimiento de etanol.
frescas sin el debido tiempo de reposo, temperaturas altas en
maduración, alto extracto fermentable residual, poco tiempo de
maduración, y por maltas mal modificadas o con un alto Existe una amplia diversidad de células de levadura, incluyendo
su tamaño, forma y color . Los tamaños celulares de las
contenido de beta glucanos.
levaduras están influenciados por su especie y condición
de crecimiento . La longitud de algunas células de levadura es
VI- CONCLUSIÓN de solo 2–3 µm mientras que las otras especies pueden alcanzar
la longitud de 20–50 µm. La mayoría de las levaduras tienen un
Con el proceso de elaboración de cerveza se logró identificar la ancho en el rango de 1 a 10µm. En general, los tamaños de las
funcionalidad de cada uno de los componentes involucrados, cepas de elaboración de cerveza de S. cerevisiaeson mayores
especialmente el comportamiento de la levadura, la cual debe que las de laboratorio[22]. Muchas especies de levaduras,
ser seleccionada considerando su tolerancia al etanol, incluyendo Saccharomyces spp. Tienen forma elipsoidal u
temperatura, pH y características organolépticas que le confiere ovoide y tienen colonias de color cremoso.
al producto, para lograr dichas características, la biotecnología S. cerevisiae es la levadura más comúnmente empleada en la
se encarga de efectuar aislamiento de diferentes tipos de cepas producción industrial de etanol, ya que tolera un amplio rango
que se obtienen de la naturaleza, estas pueden ser de pH [34], lo que hace que el proceso sea menos susceptible a
acondicionadas según las condiciones que se requieren. la infección.

REFERENCIAS Palabras claves: Levaduras, Agar, fermentación, etanol,


Una Bebida Moderna: La Cerveza En Chile En El Siglo Xix, screening.
Juan Ricardo Couyoumdjian.2004.
II. PROBLEMÁTICA
www.scielo.cl/pdf/historia/v37n2/art02.pdf
La incapacidad de S. cerevisiae para crecer en medios que
Características fisicoquímicas en los alimentos asociadas a la
fermentación contienen un alto nivel de etanol, conduce a la inhibición del
cultivo, lo que conlleva a pérdidas económicas, si no se tiene
Abdel-Rahman, M. A., Tashiro, Y., & Sonomoto, K. (2013).
considera la tolerancia prevío al uso industrial, por tal, es
Recent advances in lactic acid production by microbial
necesario evaluar el % de tolerancia de esta al etanol.
fermentation processes. Biotechnology Advances, 31(6), 877–
902.
https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2013.04.002. Retrieved III. OBJETIVO
from https://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2571/S0734975013
Evaluar la tolerancia al etanol de la cepa S. cerevisiae, con el
000736/1-s2.0-S0734975013000736-
fin de determinar el % máximo de etanol que tolera, para
main.pdf?_tid=f855d883-87cd-4739-9c5d-
generar información verídica y certera de las variables máximas
90a026c06f5d&acdnat=1527542767_6d8a1b44a07b06ed5f06
de toleracia para llegar a su óptimo nivel de producción.
59e544417eab

IV. JUSTIFICACIÓN

La eficiencia de la producción de etanol a escala industrial se


puede incrementar mediante el uso de levaduras que sean
COMPONENTE PRÁCTICO

tolerantes a los inhibidores y conociendo el nivel de review. Biochemistry and Biophysics Reports, 10(November
tolerancia. Los desafíos comunes de las levaduras pueden 2016), 52–61. https://doi.org/10.1016/j.bbrep.2017.03.003.
superarse utilizando levadura tolerante al etanol. Retrieved from
https://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2571/S240558081630242
Las cepas tolerantes al etanol pueden resistir el estrés, por tal 4/1-s2.0-S2405580816302424-main.pdf?_tid=66ca1f35-738e-
es importante determinar la concentración máxima de alcohol 45ad-b048-
que puede resistir la cepa, para definir el rango de concentración 09465875a850&acdnat=1527539288_7f715e41dcad5e706d88
de etanol tolerable y óptimo de la levadura. 8b156b7043f1

V. METODOLOGIA

Se efectuó preparación del medio de cultivo, para lo cual se


tomaron 200 mL agua desionizada para mezclarlos con 7,8
gramos de medio (PDA), (Potato Dextrose Agar, PDA, por sus
siglas en inglés) el cual es un medio de propósito general para
levaduras y mohos. Previamente se alistaron 4 muestras de
etanol al 96% en diferentes concentraciones, etanol sin diluir,
etanol al 3%, 8%, 12%. En cada caja Petri se colocaron 6 ml de
PDA más etanol en diferentes concentraciones, una vez listos
los medios, se inicio la inoculación, para lo cual se tomó con
un asa redonda 1 gota de levadura para poner en cada una de las
cajas.La evaluación del crecimiento de las levaduras en los
medios de cultivo (se realizó a 72 °C, la incubación se efectuó
a 25°C, un avez completo en tiempo de incubación se observó
el crecimiento de las colonias en los diferentes medios.

VI. ANÁLISIS

La levadura se desarrolló en todas las concentraciones, sin


embargo, se evidenció disminución ded colonias en cada una de
las siembras en frmagradual, a mayor concentración de etanol,
menor velocidad de crecimiento, lo cual muestra su viabilidad
al momento de la evaluación, siendo la concentración del 8% la
máxima tolerable. Esto demuestra que la levadura sufre estrés
en presencia de la excesiva producción de alcohol, debido a la
inhibición de oxígeno y consumo de azúcares.

VI- CONCLUSIÓN

Seleccionar microorganismos adecuados para la fermentación,


cuyas características metabólicas se ajusten con el tipo de
sustrato, las condiciones de operación y otros requerimientos
particulares, permite maximizar la productividad de etanol y
tener un mejor control y conocimiento del proceso desarrollado.
Debido a que la fermentación etanólica es un proceso complejo
y dada la cantidad de variables que intervienen, los
procedimientos de selección de microorganismos no son
realizados con frecuencia en las industrias productoras de
bioetanol, debido al costo que generan realizar este tipo de
estudios.
En general para que la levadura sea resistente a elevadas
concentraciones de etanol, debe desarrollarse con ayuda de la
biotecnología una cepa que sea tolerante.

REFERENCIAS
. Mohd Azhar, S. H., Abdulla, R., Jambo, S. A., Marbawi, H.,
Gansau, J. A., Mohd Faik, A. A., & Rodrigues, K. F. (2017).
Yeasts in sustainable bioethanol production: A

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