CUESTIONARIO DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

AMBIENTAL
6. Enliste detalladamente todos los pasos que se requiere seguir para
enfocar imágenes en un microscopio compuesto.

MICROSCOPIO COMPUESTO. El cual utiliza un juego de 2 lentes (ocular y

objetivos) para ampliar la imagen, la cual se observa invertida. Las muestras
apropiadas para su observación serán aquellas que dejen pasar luz a través de
ellas, deberán de ser monoculares.

Microscopio compuesto, sólo sería posible

Ver las alas y éstas por ser muy transparentes. La visión estereoscópica o
sensación de relieve se obtiene cuando cada ojo recibe una imagen por separado
captada por cada sistema óptico prácticamente cada ocular constituye un
microscopio compuesto

l. Colocar el portaobjetos sobre la platina del microscopio.

2. Utilizar el objetivo de menor aumento.
3. Deslizar el tubo del microscopio por medio del tornillo macrométrico,
observando lateralmente hasta que el objetivo quede cerca del portaobjetos.
4. Observar a través de los oculares subiendo lentamente el tubo del microscopio
hasta observar la preparación enfocada, no debe bajarse el tubo del microscopio
mientras se está observando, porque puede llegar a chocar el objetivo con el
portaobjetos y ocasionar desperfectos.
5. Afinar la imagen moviendo lentamente el tornillo micrométrico.
6. Si se desea mayor aumento, girar el revolver al objeto adecuado.
7. Si se utiliza el objeto de inmersión (100 X) colocar sobre la preparación una
gota de aceite de inmersión y baja el tubo del microscopio hasta que la lente del
objetivo toque a la gota, observa y ajusta cuidadosamente después de su uso
limpiar el objetivo con un tejido suave (papel seda).

7. Defina los siguientes términos en microscopía: Límite de resolución,

poder de resolución y poder de amplificación, indicando la fórmula mediante
la que se calculan cada uno.

Límite de resolución: es la menor distancia que debe existir entre dos objetos para que
puedan visualizarse por separado. Cuando se ilumina un objeto, los puntos de su
superficie reflejan las ondas luminosas. Dos puntos próximos de la superficie se verán
como distintos si la distancia que los separa es grande comparada con la longitud de onda
que reciben. Si la distancia que los separa es inferior a la longitud de onda que los ilumina
aparecerán a nuestra vista como dos puntos unidos.

10 x
lR=⋀ C / NA
LR=0,55 um(0,65)/0,30
LR=1,12 um
 40 x
LR=⋀ C /NA
LR=0,55 um(0,61)/0,65
LR=0,52 um

100 x
LR=⋀ C /NA
LR=0,55 um (0,61)/1,30
LR=1,26 um

El Poder de Resolución (p) de un microscopio se relaciona con el Límite de Resolución

(d) de la siguiente manera: p = 1/d. Se define como la capacidad del microscopio de
distinguir dos puntos separados como tales. Dos puntos muy cercanos entre sí. Cuanto
mayor sea el poder de resolución, menor será la distancia entre dos puntos a la cual
pueden distinguirse como tales. La distancia límite en la cual dos puntos pueden ser
todavía distinguibles se denomina Límite de Resolución. El poder de resolución de un
microscopio compuesto depende de la longitud de onda de la fuente luminosa y de la
apertura numérica (propiedad óptica de la lente). Puede ser calculado mediante la
siguiente fórmula:

El poder amplificador del microscopio (M) es el producto de la amplificación lateral del

objetivo por la amplificación angular del ocular:

El aumento lateral de la lente objetivo es:

LIMITE DE RESOLUCIÓN: Referido a los

microscopios o cualquier otro instrumento óptico, es la menor distancia a la que se puede observar
dos puntos en una imagen.

PODER DE RESOLUCION: Es la capacidad que tiene el microscopio para observar dos

puntos en forma separada.

PODER DE AMPLIFICACION: Es la capacidad del microscopio para aumentar la imagen;

es el producto de la amplificación lateral del objetivo por la amplificación angular del
ocular.

8. Mencione los tipos de microscopio electrónico que existen actualmente y

cuáles son las diferencias y ventajas que usted considera más importantes
entre estos y el microscopio óptico cuando se trabaja en un laboratorio de
microbiología.

La ventaja del Microscopio electrónico de transmisión (MET) es que permite la

observación de muestras de cortes muy finos y pueden aumentar un objeto hasta un
millón de veces.

A diferencia del Microscopio electrónico de barrido (MEB) Éstos pueden provocar la

aparición de electrones secundarios, que posteriormente serán recogidos por un
dispositivo situado a los lados del objeto en cuestión y pueden llegar a ampliar una
imagen unas 200.000 veces.

9. ¿Cuál es la utilidad del asa recta y redonda?

Se emplea para transportar o arrastrar o trasvasar inóculos desde la solución de trabajo
también llamada “solución madre” al medio de cultivo (sólido o líquido) o de un medio a
otro (resiembra). También sirve para la realización de frotis.

Las asas nos permiten tomar muestras y realizar la extensión en medio de cultivo pueden
ser redondas o pueden ser rectas estas últimas sirven para llevar a cabo el método de
siembra en picadura que sirve para estudiar la movilidad de las bacterias la movilidad se
manifiesta porque hay un crecimiento hacia ambos lados de la línea de siembre.

10. ¿Qué se entiende por resiembra o pase bacteriano?

Proceso donde se pasa una colonia de alguna bacteria que haya crecido en algún medio
a otra caja de Petri que contenga ya sea lo mismo que el medio en el que creció
anteriormente, esto se hace para continuar su reproducción con nuevos elementos que le
sirven para su crecimiento

Una resiembra es cuando las colonias bacterianas por distintos factores, tanto como
desgaste del medio de cultivo o por necesidad de obtener colonias bacterianas aisladas
(colonia aislada es aquella colonia bacteriana que proviene de una sola bacteria que se
reprodujo muchas veces), tomas mediante un instrumento llamado asa de siembra, una
parte de la colonia o agrupación bacteriana y la traspasas a una nueva placa de Petri.
Haciendo esto propiciarás la duración de tu colonia para posteriores trabajos.

La resiembra periódica es una técnica que permite la supervivencia de los cultivos en

cortos períodos de tiempo, por eso se reconoce como un método de conservación a corto
plazo.2,9 Se basa en transferir el cultivo del medio seco a uno fresco proporcionándole las
condiciones óptimas de crecimiento, lo que condiciona el elevado riesgo de contaminación
y variabilidad de las características de las cepas, las cuales constituyen sus principales
desventajas.