PADRÃO DE RESISTÊNCIA ANTIMICROBIANA DE AMOSTRAS DE

PASTEURELLA MULTOCIDA ISOLADAS EM PULMÕES DE SUÍNOS

ANTIBIOTIC RESISTANCE PROFILE OF PASTEURELLA

MULTOCIDA STRAINS ISOLATED FROM SWINE LUNGS

Sandra Maria Borowski1; David Emilio Santos Neves de Barcellos2; Luís Eduardo Razia3;
Tânia Alen Coutinho4.

RESUMO
São apresentados os resultados de sensibilidade in vitro de vinte e quatro amostras de
Pasteurella multocida isoladas em pulmões de suínos com lesões de pneumonia e/ou pleurite
frente a nove antimicrobianos usualmente utilizados no tratamento da infecção por
Pasteurella multocida. Observou-se grande diferença de sensibilidade, variando de 41,66%
(espectinomicina) a 70,83% (amoxicilina, tilmicosina e ceftiofur). Apenas duas entre as
amostras testadas foram sensíveis a todos os nove princípios ativos usados. Entre os isolados
testados, nenhum evidenciou resistência a todos os produtos e nenhum produto mostrou ser
eficiente para todas as amostras. Estes dados alertam para a possibilidade de que esteja
ocorrendo a seleção de isolados resistentes aos antibióticos nas granjas e indicam a
necessidade de um uso mais prudente de antimicrobianos para que a terapêutica continue
apresentando resultados satisfatórios. Os resultados também indicam a importância de testar a
sensibilidade dos isolados obtidos de casos clínicos antes de definir a terapia a ser adotada.
Palavras-chave: Pasteurella multocida, pulmões, suínos, antimicrobianos, resistência

ABSTRACT

The in vitro antimicrobial susceptibility was determined in 24 Pasteurella multocida

strains isolated from swine lungs with lesions of pneumonia and pleuritis against nine
antimicrobial principles commonly used in the treatment of P. multocida infection. It was

1
Méd. Vet. Dr. Lab. Patol. Suína. CPVDF/FEPAGRO. Porto Alegre. E-mail: sbrki@terra.com.br
2
Méd. Vet. Dr. Prof. Fac. Veterinária. UFRGS. Porto Alegre. E-mail: davbarce@ terra.com.br
3
Mestrando. Medicina Veterinária. UFRGS. E-mail: lrazia@yahoo.com
4
Medicina Veterinária. Estagiária do CPVDF/FEPAGRO.

Revista da FZVA
Uruguaiana, v. 9, n. 1, p. 104-110. 2002.
105 Padrão de resistência...

observed a wide range of susceptibility, varying from 41,66% (spectinomycin) to 70,83%

(amoxycillin, tilmicosin and ceftiofur). Only two strains were susceptible to all products. No
bacterial isolate was resistant to all antimicrobials included in the study and no product was
active against all isolates. These data alert to the possibility of induction of bacterial resistance
at farm level and indicate the need of a prudent use of antimicrobials to assure its efficiency.
The results also indicate the importance of determining the antimicrobial susceptibility pattern
of P. multocida field isolates, before decide a specific therapy against the agent.
Key words: Pasteurella multocida, lungs, pigs, antimicrobials, resistance
confinamento (PIJOAN, 1992). A doença
INTRODUÇÃO
afeta principalmente animais na fase de
A Pasteurella multocida pode crescimento e terminação. Os prejuízos são
ocorrer como comensal na nasofaringe de decorrentes não somente da mortalidade de
animais aparentemente sadios e pode atuar animais, mas também por condenações em
como patógeno primário ou secundário em frigorífico e perdas na produtividade, pela
várias espécies animais (RIMLER & redução no ganho de peso, piora da
RHOADES, 1989). Em suínos, a bactéria é conversão alimentar e gastos com o
um habitante normal da cavidade nasal e é tratamento.
um dos agentes etiológicos de uma forma No controle das doenças
de infecção do trato respiratório superior respiratórias dos suínos, além de
conhecida como rinite atrófica progressiva alternativas profiláticas que envolvem
(De JONG et al., 1980). Nessa enfermidade correções ambientais e de manejo, a terapia
somente cepas toxigênicas de P. multocida, antimicrobiana tem se apresentado como
sozinhas ou em associação com outros uma medida complementar essencial.
fatores como infecção prévia por Bordetella Entretanto, muitas drogas vem se tornando
bronchiseptica, são capazes de causar o ineficazes, devido ao aumento de
problema (PIJOAN, 1992). resistência aos diferentes princípios ativos.
A pneumonia por P. multocida em De maneira geral, para definição de
suínos freqüentemente ocorre como estágio estratégias terapêuticas, o conhecimento da
final da infecção pelo Mycoplasma atividade dos antimicrobianos contra
hyopneumoniae (pneumonia enzoótica), amostras isoladas de surtos ocorridos em
sendo essa síndrome uma das mais comuns uma região onde se pretende realizar o
e daquelas que maiores prejuízos causam tratamento pode servir como um indicador,
em criações de suínos mantidos em auxiliando na seleção. Esse critério tem
Revista da FZVA
Uruguaiana, v. 9, n. 1, p. 104-110. 2002.

sido amplamente adotado, pelas
dificuldades técnicas e financeiras de colher
amostras bacterianas de cada surto de
doenças no campo.
O presente trabalho teve como
objetivo avaliar pela técnica da difusão em
ágar, o padrão de resistência de 24 amostras
de P. multocida isoladas em pulmões de
suínos com lesões de pleurite, colhidos em
frigoríficos no Rio Grande do Sul. Os testes
foram executados frente a nove princípios
ativos de antibióticos e quimioterápicos.
MATERIAL E MÉTODOS
Foram utilizadas 24 amostras de P.
multocida, sendo 11 (PI5, PI23, PI21, PI7,
FII14, PIII47, PII8, PIII19, FII9, PIII43,
CII2) obtidas de pulmões de suínos
abatidos em quatro frigoríficos do Rio
Grande do Sul, isoladas por STEPAN
(1995) no Laboratório de Patologia Suína
do Centro de Pesquisa Veterinária
Desidério Finamor (CPVDF). Além dessas,
foram usadas 13 amostras, provenientes de
leitões com pneumonia e pleurite, enviados
ao Laboratório de Patologia Suína do
CPVDF para diagnóstico (amostras 76, 805,
Ca, Ta, 710, Fr, 1/95, 1265, 1133, 903,
1628, 1363 e 1621).
Para o isolamento primário das
amostras dos pulmões colhidos em
frigorífico, foi utilizado o meio seletivo de
Rutter (RUTTER et al., 1984), ágar sangue
Borowski, S.M. et al. 106
ovino a 5% (base para ágar sangue, Oxoid,
Hampshire, England) e ágar MacConkey
(Difco, Michigan, USA) e também a
inoculação intraperitoneal em camundongo
(STEPAN, 1995). Para os pulmões de
suínos enviados com problemas clínicos de
pneumonia e/ou pleurite foram adotadas,
simultaneamente, duas técnicas: inoculação
intraperitoneal em camundongo e cultivo
em ágar sangue ovino a 5% e ágar
MacConkey (Difco, Michigan, USA).
Foram consideradas suspeitas as
colônias obtidas diretamente dos meios de
cultivo e/ou isoladas a partir do fígado dos
camundongos inoculados e que
apresentavam as seguintes características:
diâmetro entre 1 e 2 mm, circulares,
ausência de hemólise, sem crescimento em
meio ágar MacConkey e que à coloração de
Gram se apresentaram como cocobacilos
negativos. Essas foram submetidas à
classificação definitiva por provas
bioquímicas, sendo confirmadas como P.
multocida as que apresentaram o padrão
descrito por COWAN (1993).
A conservação das amostras foi feita
inicialmente em meio infuso cérebro e
coração (BHI), (Difco, Michigan, USA),
adicionado de 5% de soro eqüino, mantidas
a -70 C e, posteriormente liofilizadas num
veículo de liofilização consistindo de
casitone (50g/l), sacarose (5g/l) e glutamato
de sódio (10g/l).
Revista da FZVA
Uruguaiana, v. 9, n. 1, p. 104-110. 2002.
107 Padrão de resistência...

Teste de Sensibilidade aos TABELAS 2 e 3. Dentre os princípios

Antimicrobianos ativos testados, a amoxicilina, tilmicosina e
A suscetibilidade in vitro das ceftiofur foram os que apresentaram maior
amostras de P. multocida frente aos percentual de sensibilidade (70,83%) e a
antimicrobianos foi determinada pela espectinomicina o menor (41,66%). Os
técnica de difusão em ágar Mueller Hinton demais mostraram índices que variaram de
(Merck, Darmstadt, Germany), seguindo a 50,00 a 58,33%.
metodologia proposta por BAUER e Foi observada uma grande diferença
KIRBY (1966). de sensibilidade entre os isolados testados,
As amostras foram testadas frente porém nenhum evidenciou resistência a
aos seguintes antimicrobianos, nas todos os princípios ativos avaliados. De
concentrações indicadas: amoxicilina outra parte, nenhum princípio ativo mostrou
(30 g); oxitetraciclina (30 g); ceftiofur ser eficiente para todas as amostras. Dois
(30 g); tilmicosina (15 g); enrofloxacina entre os isolados foram sensíveis a todos os
(5 g); espectinomicina (100 g); nove princípios ativos utilizados. A
canamicina (30 g); sulfa/trimetoprima porcentagem de amostras bacterianas
(25 g) e neomicina (35 g). A leitura foi sensíveis aos antimicrobianos variou de
realizada após incubação das placas a 37 C 41,66% (espectinomicina) a 70,83%
por 18 horas. Os diâmetros das zonas de (amoxicilina, tilmicosina e ceftiofur).
inibição foram interpretados segundo as Quanto à resistência múltipla aos
instruções dos laboratórios fabricantes dos antibióticos, observou-se que 33,33% dos
discos (Difco, Michigan, USA). isolados eram sensíveis a um máximo de 3
antimicrobianos, 20,84% sensíveis de 4 a 6
RESULTADOS E DISCUSSÃO
e 45,83% a pelo menos 7. Estes dados
Analisando-se o perfil de alertam para a possibilidade de que esteja
sensibilidade dos isolados aos diferentes ocorrendo a seleção de isolados resistentes
antimicrobianos, verificou-se que alguns aos antibióticos nas granjas e indicam a
eram mais sensíveis a um maior número de necessidade de um uso mais prudente de
produtos, conforme demonstra a TABELA antimicrobianos para que a terapêutica
1. continue apresentando resultados
Os resultados dos diferentes padrões satisfatórios.
obtidos no teste de sensibilidade aos Uma variedade de antimicrobianos e
antimicrobianos são mostrados nas combinações tem sido usada no tratamento
Revista da FZVA
Uruguaiana, v. 9, n. 1, p. 104-110. 2002.
 Borowski, S.M. et al. 108

das infecções por P. multocida no campo. eritromicina, gentamicina, lincomicina,

Entretanto, há vários registros de resistência oxitetraciclina e espectinomicina. PIJOAN
a esses princípios ativos. Segundo PIJOAN (1999) salientou que no caso da P.
(1999), muitas drogas têm se tornado multocida a eficácia dos antimicrobianos
ineficazes, devido ao aumento de pode variar consideravelmente, dependendo
resistência. COTE et al. (1991), ao da suscetibilidade da amostra e do fato de
investigarem 29 amostras de campo, que o microorganismo pode adquirir
detectaram resistência mediada por rapidamente resistência simultânea a vários
plasmídios à estreptomicina e sulfonamidas. antimicrobianos. Sendo assim, o
RAEMDONCK et al. (1994), ao antibiograma deve ser realizado sempre
examinarem 969 amostras de P. multocida antes do início de um tratamento. Entre as
isoladas de suínos procedentes de vários amostras testadas não foi possível verificar
países, durante um período de 3 anos, diferença de sensibilidade entre as isoladas
encontraram boa concentração inibitória de casos clínicos e aquelas obtidas de
mínima para danofloxacina e ceftiofur. Eles pulmões em frigoríficos.
observaram variável a alta resistência a

TABELA 1 - Perfil de sensibilidade dos 24 isolados de Pasteurella multocida frente aos nove
antimicrobianos testados.

No de amostras sensíveis Sensibilidade (%) No de antimicrobianos sensíveis

11 45,83% ≥7

05 20,83% 4a6

08 33,33% ≤3

TABELA 2 - Perfil de resistência das amostras de P. multocida isoladas de suínos frente aos
nove princípios ativos de antimicrobianos.
Perfil Número de amostras Resistência
1 3 ET
2 2 OXT
3 1 EN
4 2 NE/OXT
5 1 NE/KN
6 1 AMO/SUT/ET

Revista da FZVA
Uruguaiana, v. 9, n. 1, p. 104-110. 2002.
109 Padrão de resistência...

7 1 SUT/OXT/ET
8 1 AMO/SUT/KN/ET
9 1 SUT/NE/KN/ET
10 1 AMO/XNL/EN/OXT/ET
11 1 TIL/XNL/SUT/EN/OXT/KN/ET
12 1 TIL/EN/NE/OXT/KN/ET
13 1 TIL/XNL/SUT/EN/KN/ET
14 1 TIL/XNL/SUT/EN/NE/OXT/KN/ET
15 1 AMO/XNL/SUT/EN/NE/OXT/KN
16 1 AMO/TIL/XNL/SUT/EN/NE/KN
17 1 AMO/TIL/SUT/EN/NE/OXT/KN/ET
18 1 AMO/TIL/XNL/EN/NE/OXT/KN/ET
AMO: amoxicilina, OXT: oxitetraciclina, XNL: ceftiofur, TIL: tilmicosina, EN: enrofloxacina, ET:
espectinomicina, KN: canamicina, SUT: sulfa/trimetoprima, NE: neomicina

TABELA 3 - Padrão de sensibilidade (% de isolados sensíveis, resistentes e sensibilidade

intermediária) apresentado por nove antimicrobianos aos 24 isolados de P.
multocida.
AMO XNL TIL SUT EN NE OXT KN ET
Sensível 70,83 70,83 70,83 58,33 58,33 58,33 50,00 54,16 41,66
Intermediário 16,66 12,5 25,00 25,00 16,66 12,50 29,16 29,17 16,67
Resistente 12,51 16,67 4,17 16,67 25,01 29,17 20,84 16,67 41,67
AMO (amoxicilina 30 µg), OXT (oxitetraciclina 30 µg), XNL (ceftiofur 30 µg), TIL (tilmicosina 15 µg), EN
(enrofloxacina 5 µg), ET (espectinomicina 100 µg), KN (canamicina 30 µg), SUT (sulfa/trimetoprima 25 µg),
NE (neomicina 35 µg).
multocida isoladas de suínos com
CONCLUSÕES
pneumonia e pleurite no nosso meio, mas
Foi observada a ocorrência de um não permitem uma generalização.
alto grau de resistência antimicrobiana entre É importante testar a sensibilidade
as amostras analisadas. dos isolados de P. multocida obtidos de
Os resultados indicam que devem casos clínicos antes de definir a terapia
ser tomados cuidados no uso da terapia antimicrobiana a ser adotada.
antimicrobiana, visando a reduzir a
ocorrência de resistência. REFERÊNCIAS

Esses resultados servem como um BAUER, A.M.; KIRBY, W.M.M.

alerta para a resistência de amostras de P. Antibiotic susceptibility by standardized
Revista da FZVA
Uruguaiana, v. 9, n. 1, p. 104-110. 2002.
 Borowski, S.M. et al. 110

single disc method. American Journal of

Clinical Pathology. v. 45, p. 493-496. RAEMDONCK, D.L.; TANNER, A.C.;
1966. TOLLING, S.T.; MICHENER, S.L.
Antimicrobial susceptibility of
COWAN, S.T. Cowan & Steel's Manual Actinobacillus pleuropneumoniae,
for the Identification of Medical Bacteria. Pasteurella multocida and Salmonella
3nd ed. Cambridge University Press: choleraesuis isolates from pigs. The
Cambridge, 1993. 331p. Veterinary Record, n. 134, p.5-7. 1994.

COTE, S.; HAREL, J.; HIGGINS, R.; RIMLER, R.B.; RHOADES, K.R.
JACQUES, M. Resistance to antimicrobial Pasteurella multocida In: ADLAM, C.;
agents and prevalence of R plasmids in RUTTER, J.M. ed. Pasteurella and
Pasteurella multocida from swine. Pasteurellosis. London, Academic Press
American Journal of Veterinary Research, Limited, 1989. p. 37-73.
v. 52, n.10, p.1653-1657. 1991.
RUTTER, J.M.; TAYLOR, R.J.;
De JONG, M.F.; OEI, J.L.; CRIGHTON, W.G.; ROBERTSON, I.B.
TESTENBURG, G.J. AR-pathogenicity- BENSON, J.A. Epidemiological study of
test for Pasteurella multocida isolates. In: Pasteurella multocida and Bordetella
INTERNATIONAL PIG VETERINARY bronchiseptica in atrophic rhinitis. The
SOCIETY CONGRESS, 6., 1980, Veterinary Record, v.15, n.115, p. 615-619.
Copenhagen. Proceedings. Copenhagen. 1984.
1980. p.211.
STEPAN, A.L. Tipificação e sensibilidade
PIJOAN, C. Pneumonic Pasteurellosis. In: de amostras de Pasteurella multocida
Leman, A. (Eds) Diseases of Swine. 7 ed. isoladas a partir de lesões de pleurite em
Iowa: Iowa State University Press, 1992. p. suínos terminados. Porto Alegre: UFRGS,
552-559. 1995 (Dissertação de Mestrado, Faculdade
de Veterinária, Universidade Federal do Rio
PIJOAN, C. Pneumonic Pasteurellosis. In: Grande do Sul, 1995).
Leman, A. (Eds.) Diseases of Swine. 8. ed.
Iowa: Iowa State University Press, 1999. p.
511-520.
Revista da FZVA
Uruguaiana, v. 9, n. 1, p. 104-110. 2002.