FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS

Y BIOQUÍMICA

FARMACOGNOSIA
CONTROL CALIDAD

PROF. ASOCIADA, NORA HERRERA HERNÁNDEZ

 Las drogas vegetales

Ocupan un lugar
importante
en el comercio de
A NIVEL medicamentos
MUNDIAL

Preparados
fitoterapéuticos

surge

sin La necesidad de garantizar

Se carecen de embargo su control de calidad con
pautas y métodos aplicaciones de técnicas
homogéneos para modernas y el uso de
realizarlos patrones adecuados
 PRINCIPIO ACTIVO
Es la sustancia químicamente definida y
responsable de la acción farmacológica
de la droga.

Ácido valérico
 En Europa, el mercado de preparados a base de plantas alcanzó:
24 180 millones de USD en 2002
29 000 millones de USD en 2005
39 000 millones de USD en 2011
Principales mercados europeos: Alemania, Francia, Italia, Reino Unido
y España.

MEDICAMENTOS FITOTERAPÉUTICOS

Son aquéllos cuyos principios activos son de origen vegetal y deberán

ser preparados dándoles la forma farmacéutica más adecuada para su
administración al paciente.

En su elaboración se emplean:

• Drogas vegetales troceadas o pulverizadas

• Productos obtenidos por extracción o derivados (tinturas, extractos
secos, aceites esenciales, etc.)
• Principios activos purificados
COMPLEJIDAD DE LAS DROGAS VEGETALES (
FRANZ Y VLIETINCK, 2001)
 PROBLEMAS RELACIONADOS CON LA CALIDAD DE LOS
FITOFÁRMACOS (BAUER, 1998)

 Son mezclas de múltiples constituyentes.

 El/los principio/s activos no siempre es/son conocido/s.

 Pueden no existir métodos de análisis selectivos.

 Los compuestos de referencia no siempre están disponibles

comercialmente.

 Variabilidad del material vegetal (biodiversidad, quimiotipo,

etc.)

 Influencia del proceso de recolección, desecación y

almacenamiento.

 Influencia del proceso de extracción.

 DROGA VEGETAL

CALIDAD SEGURIDAD EFICACIA

 FITOFÁRMACO

E S
F E
I G
C U
A R
C I
I D
A A
D

CALIDAD
PARÁMETROS DE CALIDAD PARA DROGAS VEGETALES Y DERIVADOS
(CAÑIGUERAL, 2002)
 Definición clara y precisa
 Identidad
- Características macro y microscópicas
- Características organolépticas
- Perfil cromatográfico (“huella dactilar”)
- Reacciones de identificación.
 Pureza
- Humedad
- Cenizas
- Constantes físicas
- Materia extraña
- Disolventes residuales
- Contaminación microbiana
- Metales pesados
- Residuos de pesticidas
- Aflatoxinas
- Radioactividad
- Adulteraciones
 Valoración
- Contenido en principios activos o marcadores
 Conservación
 EFICACIA
 El conocimiento de los principios activos de la droga (su relación causa efecto,
mecanismos de acción, farmacocinética), por ejemplo los ginsenósidos de la raíz de
Ginseng o los flavonoides, terpenos y acetilenos de la flor de manzanilla, son
responsables de su actividad.

 Los resultados obtenidos en ensayos farmacológicos experimentales in vitro e in vivo

 La experiencia clínica, si el extracto vegetal tiene una composición compleja es difícil

determinar si sus principios activos son capaces de llegar al lugar de acción luego de su
administración oral, entonces debe priorizarse la investigación clínica sobre la
experimental, pues permitirán demostrar la eficacia.

Actualmente ha aumentado la realización de ensayos clínicos controlados con extractos

estandarizados, así han mejorado las indicaciones, la posología y se ha detectado posibles
efectos adversos e interacciones
 FUENTES DE INFORMACIÓN
FARMACOPEAS: describen normas de calidad para los principales medicamentos
utilizados
Farmacopea alemana
Farmacopea francesa
Farmacopea suiza
Farmacopea italiana
Farmacopea europea, 8º edición (publicada en julio 2013 y válida desde
enero de 2014)
http://www.pheur.org
British Pharmacopeia
British Herbal Pharmacopeia
USP 38 – NF 33
Farmacopea Argentina
Farmacopea Brasileña
Programa TRAMIL, Farmacopea Caribeña
 1. CONTROL DE IDENTIDAD

F ENSAYOS BOTÁNICOS
-EXAMEN ORGANOLÉPTICO
A -EXAMEN MACROMORFOLÓGICO
-EXAMEN MICROMORFOLÓGICO
R M
ENSAYOS FISICOQUÍMICOS
O -CUALITATIVOS
M N
2. CONTROL DE CALIDAD
A O
C G ENSAYOS FISICOQUÍMICOS
- GENERALES
R -CUANTITATIVOS
O A
3. CONTROL DE PUREZA
P F
E Í - AUSENCIA DE ELEMENTOS EXTRAÑOS
- DETERMINACIÓN DE PESTICIDAS
A - DETERMINACIÓN DE METALES PESADOS
A - DETERMINACIÓN DE SUSTANCIAS RADIACTIVAS
- DETERMINACIÓN DE CONTAMINACIÓN MICROBIANA
 1 CONTROL DE IDENTIDAD

ENSAYOS BOTÁNICOS

PERMITE CONFIRMAR LA
IDENTIDAD DE LA DROGA
DETECTANDO POSIBLES
FALSIFICACIONES

COMPRENDE

EXAMEN EXAMEN EXAMEN

ORGANOLÉPTICO MACROMORFOLÓGICO MICROMORFOLÓGICO
I.- ENSAYOS BOTÁNICOS
1.1. EXAMEN ORGANOLÉPTICO
aromático, aliáceo, alcanforáceo,
nauseabundo, desagradable, a especia, etc.
Olores característicos o sui generis como: la
OLOR menta, la canela, anís.

polvos de hojas, sumidades y tallos son de

color verde, cortezas y raíces son de color
COLOR marrón oscuro o marrón rojizo.

dulce, ácido, salino, astringente, punzante,

SABOR nauseabundo, aromático, etc.
COLOR SABOR OLOR
ROJO: QUINA Dulce: regaliz Plantas con
CASTAÑO: CANELA
Amargo: aceites
nuez vómica, esenciales:
quina, genciana, Menta,
acíbar. hinojo,
Aromático: canela,
BLANCO: canela, clavo romero,
ANARANJADO: RUIBARBO GOMA
ARÁBIGA) eucalipto,
anís
 CONTROL DE IDENTIDAD
I.- ENSAYOS BOTÁNICOS
1.2. EXAMEN MACROMORFOLÓGICO Los caracteres
macroscópicos o
macromorfológicos
de una droga son
determinados en
cada órgano se
conocen
examinando sus
características
típicas como por
ejm: la forma y
tamaño, las marcas
externas y su color.
CONTROL DE IDENTIDAD
I.- ENSAYOS BOTÁNICOS

1.3. EXAMEN MICROMORFOLÓGICO

El examen micromorfológico es indispensable para

confirmar la identidad de la droga y descartar la
presencia de posibles adulterantes.
CORTES
HISTOLÓGICOS

DROGAS PULVERIZADAS
 DROGAS
ORGANIZADAS
Y Estructura típica
NO PULVERIZADAS (Reconocimiento más fácil))

ENTERAS O
TROCEADAS Estructura no organizada
(Reconocimiento más
difícil)
Ejm: goma arábiga

Los estudios histológicos se llevan a cabo mediante cortes transversales o

longitudinales efectuados mediante el micrótomo, montados con técnicas de
aclarado y coloración.
REACTIVOS PARA ACLARAR(hojas y pétalos): hidrato de cloral, potasa alcohólica
al 5%, lactoferol, hipoclorito de sodio.
Los órganos oleaginosos(semillas) se desengrasan previamente introduciendo en
alcohol.
REACTIVOS DE MEMBRANA .Floroglucinol = colorea en rojo los tejidos lignificados
Cloroyoduro de zinc = azul violeta los tejidos celulósicos y en amarillo marrón los
lignificados y suberificados.
 DROGAS PULVERIZADAS
En la droga pulverizada muchas células están rotas
excepto las paredes lignificada. Se puede encontrar
también fragmentos de almidón, cristales de oxalato de
calcio, aleurona, etc.)
El examen micrográfico de las
drogas pulverizadas •Granos de fécula
•Granos de aleurona
elementos celulares •Cristales
•Grasas y esencias
se basa
en el •Elementos conductores: vasos y
estudio traqueídas
de •Células epidérmicas
contenido •Células de parénquima
celular •Células de colénquima
•Células de súber
•Células de esclerénquima
 PRUEBAS MICROQUÍMICAS
vichayo
Las pruebas microquímicas se pueden
realizar tanto como material fresco como de
herbario y aún conservado, siendo preferible
al estado fresco.
ALCALOIDES (Reactivo de Dragendorff)
ALEURONAS (Gota de colorante organge G)
ALMIDÓN (Reactivo de lugol)
CELULOSA (Prueba de clorioduro de cinc)
GRASAS Y ACEITES(Reactivo de Sudan III o
Sudan IV)
Presencia de flavonoides (color
LIGNINA(Prueba de floroglucina)
amarillo) y taninos (color rojo)
MUCÍLAGOS(Azul de cesil al 1%)
OXALATO DE CALCIO(Reactivo acetato cúprico)
PECTATO, SUSTANCIAS PÉCTICAS(Rojo de
rutenio al 0,1%)
QUITINA(Reactivo de lugol y cloruro de cinc)
SAPONINAS(Ácidos sulfúrico concentrado)
TANINOS (Sulfato férrico)

Presencia de alcaloides de color

marrón (Dragendorff)
 CONTROL DE IDENTIDAD
ENSAYOS FISICOQUÍMICOS
- CUALITATIVOS

DROGA ENTERA IDENTIFICACIÓN Y

DROGA PULVERIZADA DETECCIÓN DE POSIBLES
EXTRACTOS ADULTERACIONES

REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN
A. Reacciones de coloración o
precipitación
B. Fluorescencia
C. Microsublimación
ANÁLISIS CROMATOGRÁFICO :
REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN
A. Reacciones de coloración o precipitación

CORTEZA DE CÁSCARA SAGRADA(Rhamnus purshiana) +

Sol. Amoniacal = coloración roja (antraquinonas)

Comino rústico(Ammi visnaga) + KOH = coloración púrpura

(furocromonas)

Semillas de almendras amargas(Prunus amygdalus var.) +

papel picrosódico = coloración rojiza

Esteroides + Lieberman(HOAc +AC2O/H2SO4) = Coloración

azul verdosa

Alcaloides (H+/H2O) + METALES PESADOS(Bi, Hg, etc.) =

Formación de precipitados
B.- FLUORESCENCIA
quinina

C.- MICROSUBLIMACIÓN

Se realiza con drogas con p.a.

(principios activos) fácilmente
sublimables (antraquinonas,
alcaloides)
ANALISIS
CROMATOGRAFICO
 Determinación de agua (Humedad residual)
Un exceso de agua en una droga puede
provocar el crecimiento microbiano, la
presencia de hongos o insectos y el
deterioro, seguido de la hidrólisis de los
principios activos. Este ensayo es
especialmente importante para drogas
que absorben humedad fácilmente o se
AGUA DE VEGETACION.
(SE PIERDE CON FACILIDAD)
deterioran rápidamente en presencia de
agua.
Los límites de agua establecidos en la
Farmacopea para las drogas, oscila
entre un 8 y un 14 % con pocas
excepciones, correspondiendo los
valores más altos con la humedad de
cortezas, tallos y raíces.

Las bacterias necesitan para reproducirse 40% de humedad y los

AGUA DE CONSTITUCION DE hongos 15 a 20% de humedad% . < 10% de agua evita la
TEJIDOS. (DIFICIL DE ELIMINAR) presencia de estos.
La humedad residual o límite para la cantidad de agua, puede ser establecida mediante el
estudio de secado de la droga.
Para esta determinación puede ser empleados dos métodos:

MÉTODO GRAVIMÉTRICO
(Pérdida por desecación)
No es empleado para plantas con aceite 105 °C/1H
esencial

MÉTODO AZEOTRÓPICO
Utilizado especialmente para drogas con
aceites esenciales
 AZEOTRÓPICO
En este método el agua de
la droga es arrastrada por
destilación con un
disolvente no miscible con
el cual forma una mezcla
azeotrópica cuando se
somete a una temperatura
constante de ebullición, en
un aparato de destilación a
reflujo. El agua se acumula
a una trampa y se lee
directamente su volumen.
Los vapores del azeótropo
se condensan por
refrigeración, separándose
el agua del disolvente en
dos capas, pudiendo
entonces medir el volumen
del agua separada de la
Los disolventes utilizados
pueden ser:
Benceno (p.e. 80°)
Tolueno(p.e. 110°C)
Xileno ( p.e. 136 a
140°C)
Según la Farmacopea: Destilar
200mL de disolvente , al que
se le añade 2 mL de agua.
Luego se enfría y se mide el
volumen de agua “n” separado
en la parte del tubo. Se
introducen 20 g de muestra
triturada se somete a
ebullición con tolueno. Por 5
minutos, se enfria y se
procede a la lectura del
volumen de agua (n’ )
% de agua = (n’ – n) 100/p
Donde: p = peso en gramos
 CALCINACIÓN
Las cenizas totales permiten
determinar la cantidad de
material remanente después de
la ignición:
INCINERACIÓN
“Cenizas fisiológicas”, Derivados
de los tejidos de la planta y
“Cenizas no fisiológicas”, que
son el residuo después de la 700 -750°C
2H
ignición de la materia extraña
(Polvo, arena, tierra, etc.),
adherida a la superficie de la
droga
 CENIZAS SOLUBLES EN AGUA
Son calculadas por diferencia en peso entre las cenizas totales y el
residuo remanente después del tratamiento de las cenizas totales
con agua.
Cuando los valores obtenidos para las cenizas totales son elevados
(>5%), es necesario conocer si las mismas están compuestas por
metales pesados, lo cual se determina mediante los ensayos de
cenizas insolubles, y si este resultado es elevado hay que someter
la droga a otros análisis antes de aprobar su uso.

Ceniza total + 15 a 20 mL de agua + calentar +mufla (700 a 750 °C)/2H

 MÉTODO DE KJELDAHL
OBJETIVO

Determinar la concentración de nitrógeno presente en la muestra para

luego ser transformado a través de un factor en proteína.

FUNDAMENTO

El método se basa en la destrucción de la materia orgánica con ácido

sulfúrico concentrado, formándose sulfato de amonio que en exceso de
hidróxido de sodio libera amoníaco, el que
se destila recibiéndolo en:

a) Acido sulfúrico donde se forma sulfato de amonio y el exceso de ácido

es valorado con hidróxido de sodio en presencia de rojo de metilo, o
b) Acido bórico formándose borato de amonio el que se valora con ácido
clorhídrico.
Digestor
Kjeldahl
Destilador
Kjeldahl
 ENSAYOS FISICOQUÍMICOS CUANTITATIVOS
ESPECÍFICOS
METODOS VOLUMÉTRICOS
Se fundamenta en la determinación de una sustancia por su
reacción con un volumen medido de una sustancia estandarizada
conocida.
MÉTODOS
ESPECTROFOTOMÉTRICOS

Estos métodos se aplican a la mayoría de los

p.a. y están basados en la capacidad de
absorción energética que presentan ciertas
moléculas al ser expuestas a una
determinada intensidad de energía y con un
La longitud de onda (λ)
comprende entre 190 y 800 longitud de onda específica.
nm.
Espectro de Absorción del Resveratrol
Curva de Calibración del Resveratrol
CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDA DE ALTA RESOLUCIÓN (CLAR) o HPLC
La cromatografía es una técnica que permite
identificar, cuantificar y purificar los componentes de
una mezcla de compuestos químicos.
CROMATOGRAFÍA GASEOSA
Analiza componentes volátiles (aceites esenciales, alcanfor, ácidos vegetales, algunos alcaloides
del opio y tabaco, resinas de la marihuana, sapogeninas y heterósido cardiactivos. Detecta cocaína
y sus metabolitos en el organismo humano, de gran importancia en el campo forense.

Artemisia
absinthium
ajenjo
Aplicable a las drogas con mucílagos es definido como el
volumen en mililitros ocupado por un gramo de droga y
mucílago, después de su hinchamiento por permanecer
cuatro horas en contacto con un liquido acuoso. Por
ejemplo: para el agar su valor es > a 15 y para la semilla
de lino > 4 si la droga es entera y > 4.5 para la droga en
polvo.
 Aceites fijos
Caracteres organolépticos: olor, sabor
y color

Ensayos fisicoquímicos
 Solubilidad
 Índice de acidez
 Índice de refracción
 Índice de peróxidos
 Índice de saponificación:
 Rotación óptica
 Densidad relativa
 Espectros UV e IR
 Análisis cromatográfico: TLC y GC
 Indice de yodo: Cantidad de yodo fijada a 100g de sustancia.
 Índice de acidez: Cantidad en mg de KOH necesaria para neutralizar los
ácidos libres presentes en 1 g de sustancia.

 Índice de saponificación: Cantidad de KOH (mg) necesaria para

neutralizar los ácidos libres y saponificar los ésteres, en 1 g de sustancia
 Indice de éster: Diferencia entre los dos índices anteriores
 Indice de peróxidos: Es el número que expresa en mEq de O2 activo la
cantidad de peróxido contenido en 1000 g de sustancia.
 Insaponificable: Es el % de sustancias no volátiles a 100-105°C,
obtenidas por extracción con un disolvente orgánico, de una disolución de
la muestra previamente saponificada.

Control de calidad de drogas de origen vegetal. Cátedra de Farmacognosia. FFyB-UBA-

 ÍNDICE DE REFRACCIÓN
Las determinaciones del índice de refracción son
especialmente útiles para el establecimiento de la
pureza de esencias y aceites fijos y muchos de
su valores se indican en las farmacopeas. Por
ejm: índice de refracción de menta (Mentha
piperita) es 1,459- 1,45 y el de la esencia de
lavanda inglesa (Lavandula officinalis Chaix ex
Villars) es de 1,460 – 1,474.

PODER ROTATORIO
La mayoría de los aceites esenciales tienen componentes ópticamente
activos y su pureza puede deducirse del sentido del poder rotatorio y de
su magnitud. Así el poder rotatorio de la esencia de limón (Citrus limon L.)
es mayor de 57°y menor de 65° y el de la esencia de menta (Mentha
piperita L.) está en el rango de -16° a -3º
 FLUORIMETRÍA

Se fundamenta en las propiedades de algunos

compuestos de emitir fluorescencia. En los
alcaloides la fluorescencia es proporcional a la
concentración. Se emplea para la valoración de la
quina y quinidina, aprovechando sus propiedades
fluorescentes en medio sulfúrico.
La absorción de luz ultravioleta tiene el
inconveniente que requiere extractos muy
purificados.
Permite valorar simultáneamente mezclas de
alcaloides de forma independiente, para ello es
preciso que cada uno cumpla la ley de Lambert-
Beer: absorciones máximas diferentes, absorciones
aditivas.
 3

- Ausencia de elementos extraños

- Determinación de pesticidas
- Determinación de metales pesados
- Determinación de sustancias radioactivas
- Determinación de contaminación
microbiana
Materia extraña: consiste en analizar al ojo y
estereoscópicamente las características de la
muestra en análisis ya sea contaminación animal,
vegetal, mineral, etc.

Materia extraña Referencia

Mentha piperita <5% tallos/ <2% materia extraña. Ph Helv Vll
Ocimum basilicum <7%tallos/ <3% . materia extraña Ph Helv Vll
DETERMINACIÓN DE PESTICIDAS
 ANÁLISIS DE PESTICIDAS

Se procesan las muestras mediante la

metodología establecida en estándares
internacionales.
Se utiliza la Cromatografía Gaseosa
con detector de captura electrónica
(organoclorados) o detector de
nitrógeno fósforo para órgano
fosforados.
También puede trabajarse acoplando el
equipo al Espectrómetro de masa.
 CONTAMINANTES METÁLICOS

El método más empleado es el de

Absorción Atómica
Contaminación microbiológica

Las plantas son contaminadas por

microorganismos presentes en la tierra, en el
ambiente, etc. Esta contaminación varía por lo
general entre 103 y 106 UFC por gramo de planta.

Detectándose a veces la presencia de

Estreptococos fecales, Pseudomonas y
Enterobacterias.

Las plantas se contaminan en la recolección,

disminuyendo la tasa de contaminación con el
secado.
DETERMINACIÓN DE SUSTANCIAS RADIOACTIVAS

Desastre nuclear de
Chernóbil
La normativa oficial de la
Unión Europea permite
unos niveles máximos
de contaminación
radioactiva de 600 beq/Kg
(alimentos)