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Conceptos generales
En bacterias no hay reproducción sexual pero sí intercambio de genes,
TRANSFERENCIA HORIZONTAL (~17% genoma E. coli por unos 200 eventos)
El intercambio NO es por fusión de células, es transferencia PARCIAL y
UNIDIRECCIONAL
Donante: EXOGENOTE, Receptor: ENDOGENOTE
El receptor se convierte en diploide parcial o MEROCIGOTO
Debe haber recombinación para que se integren los genes recibidos
VARIANTES FENOTÍPICAS
Variantes nutricionales:
Protótrofos. Pueden crecer en medio mínimo (fuente de C y
sales minerales)
Auxótrofos. Han perdido la capacidad de crecer en medio
minimo
Resistencia a agentes inhibitorios (por ejemplo antibióticos)
VARIANTES FENOTÍPICAS
Variantes nutricionales:
Protótrofos. Pueden crecer en medio mínimo (fuente de C y
sales minerales)
Auxótrofos. Han perdido la capacidad de crecer en medio
minimo
Resistencia a agentes inhibitorios (por ejemplo antibióticos)
Auxótrofos o protótrofos
¿CÓMO SE TRANSFIERE EL DNA ENTRE BACTERIAS?
ANAEROBIAS
ESTRICTAS ANAEROBIAS MICROAEROFÍLICAS
MODERADAS
ENZIMAS:
SUPEROXIDO
CATALASA PEROXIDASA DISMUTASA
MODERADAS
ESTRICTAS
CRECEN A CONCENTRACIONES DE OXÍGENO NO CRECEN EN PRESENCIA DE
ENTRE 2 AL 8% ( PROMEDIO DEL 3%). MÁS DEL 0.5% DE OXÍGENO.
Bacteroides fragilis Clostridium haemolyticum
Prevotella-Porphyromonas Clostridium novyi tipo B
Fusobacterium nucleatum
Clostridium perfringens
AEROBIAS +300 mV a – 50 mV
2 H2O2 CATALASA
2 H2O + O2
PEROXIDASA
H2O2 + R H2 2H2O + R
SOD
H2O2 + O2
O-2 + O- 2 + 2H+
CAVIDAD ORAL
BACTERIAS ANAEROBIAS
EXPRESIÓN DE SU PATOGENICIDAD
COMENSALES SAPRÓFITOS DE ESCASA
INVASIVIDAD
FACTORES FAVORABLES
Staphylococcus aureus.
INFECCIONES DE MUCOSAS: Bacteroides melaninogenicus
Difteroides
facultativos
Otras dos
especies de Bacteroides
INFECCIONES RESPIRATORIAS – ABSCESOS PULMONARES –
Combinación de anaerobios
moderados y facultativos.
CELULITIS ANAEROBICAS -
ENTERITIS NECROZANTE
GANGRENA GASEOSA
Clostridium perfringens
INTOXICACIÓN ALIMENTARIABOTULISMO
BOTULISMO EN LACTANTES
Clostridium
SÍNDROME DE MUERTE
botulinum
BOTULISMO DE HERIDAS SÚBITA
BACTERIAS ANAEROBIAS
CLASIFICACIÓN
31 GÉNEROS: 245 ESPECIES, SUBESPECIES Y TIPOS
7 GÉNEROS Y 76 ESPECIES
Actinomyces
Arachnia
CLASIFICACIÓN Eubacterium
Bifidobacterium
BACILOSBacteroides
GRAM NEGATIVOS
Fusobacterium
13 GÉNEROS Y 70 ESPECIES
PATOGENICIDAD
FACTORES DE VIRULENCIA
Bacteroides
ENDOTOXINAS
MUCOPOLISACARIDASAS
HEPARINASA
PROCESOS TROMBOEMBÓLICOS
BACILOS NO
BACILOS PIGMENTADOS,
GRUPO DE PIGMENTADOS SENSIBLES A LA BILIS
Bacteroides fragilias
FAMILIA BACTEROIDACEAE
OTROS
ASACAROLÍTICOS O DEBILMENTE
FERMENTADORES
FUSOBACTERIUM
F. pero
Bacteroides thetaiotamicron se aísla con frecuencia menor a B. fragilis nucleatum
Igualmente es frecuente su presencia en las muestras clínicas. F. necrophorum
F. mortiferum
F. varium
Otros
Prevotella y Porphyromonas se aíslan con menor frecuencia que las bacterias
del grupo Bacteroides fragilis
Prevotella y Porphyromonas se aíslan frecuentemente de infecciones de cuello-
cabeza
Y pleuropulmonares.
Porphyromonas gingivalis, es muy importante en las infecciones periodontales
Porphyromonas asaccharolitica se puede aislar de cualquier tipo de infección
Tema 3: CLASIFICACION DE BACTERIAS
BACTERIAS
Las bacterias son seres vivos unicelulares Carecen de núcleo diferenciado y se
reproducen por división celular sencilla. Las bacterias son tan pequeñas que
solo pueden observarse con ayuda de un microscopio que las amplíe al menos
500 veces su tamaño real.
Las bacterias poblaron la Tierra mucho antes de que ningún otro grupo
de seres vivos la habitaran, carente de oxígeno para respirar, con
temperaturas extremadamente elevadas y niveles altos de radiación
ultravioleta procedente del Sol.
Las bacterias son organismos extraordinarios en términos de adaptación
a ambientes extremos, desarrollándose en zonas que resultan inhóspitas
para otras formas de vida. Cualquier lugar donde exista vida, incluye
vida bacteriana.
Clasificacion de las bacterias
La forma de las bacterias es muy variada y, a menudo, una misma
especie adopta distintos tipos morfológicos, lo que se conoce como
pleomorfismo. Las bacterias presentan una amplia variedad de
tamaños y formas. La mayoría presentan un tamaño diez veces menor
que el de las células eucariotas, es decir, entre 0,5 y 5 μm.
De todas formas, podemos distinguir tres tipos fundamentales de
bacterias:
• Cocos
• Bacilos
• Formas
helicoidales
Coco
BProviene del griego kókkos, lo que se traduce como grano, es de forma
esférica. Estas se clasifican en:
Diplococo: Cocos en grupos de dos.
Bailos
Proviene del latín baculus, lo que significa “varilla”, tienen forma de
bastoncillo.
Formas helicoidales
Vibrio: Ligeramente curvados y en forma de coma, judía o cacahuete.
Importancia de la Infección
Papel decisivo en la historia
Causa principal de muerte en el mundo
Preocupación pública
o Meningitis, Intoxicación alimenticia
o Brotes epidémicos
Metabolismo bacteriano
Metabolismo: conjunto de reacciones químicas que tiene lugar en la célula.
Tres funciones específicas:
- obtener energía química del entorno, almacenarla, para utilizar luego en
diferentes funciones celulares,
- convertir los nutrientes exógenos en unidades precursoras de los
componentes macromoleculares de la célula bacteriana,
- formar y degradar moléculas necesarias para funciones celulares específicas,
como por ejemplo, movilidad y captación de nutrientes.
Metabolismo bacteriano
Aerobiosis vs anaerobiosis
Aerobios obligados
o Deben vivir en ambientes donde el oxígeno está presente
Anaerobios obligados
o Deben vivir donde no hay oxígeno.
Anaerobios facultativos
o Pueden vivir con o sin oxígeno
Nutrición Bacteriana
Desde el punto de vista biosintetico:
Litotrofas: que sólo requieren sustancias inorgánicas sencillas (SH 2 S0,
NH3, NO2-, Fe, etc.)
Organotrofas: requieren compuestos orgánicos (hidratos de carbono,
hidrocarburos, lípidos, proteínas, alcoholes...).
Autotrofas: crecen sintetizando sus materiales a partir de sustancias
inorgánicas sencillas. El concepto de autotrofía se limita a la capacidad
de utilizar una fuente inorgánica de carbono (CO2).
Heterotrofas: su fuente de carbono es orgánica (si bien otros elementos
distintos del C pueden ser captados en forma inorgánica).
Nutrición Bacteriana
Fotoautótrofos:
Nutrientes
Agua
CO2
o Como fuente de carbono para reducirlo (f.a) u oxidarlo (q.a.l.)
o Reacciones de carboxilación
Macronutrientes
o C, H, O, N, P, S, K, Mg (reacciones enzimáticas)
Reproducción bacteriana
Fisión binaria
Formación de nuevo ADN casi continuamente
Intercambio genético:
o Transformación
Temperatura:
o 37 grados C usualmente
Tiempo de incubación:
o La mayoría de bacterias clínicamente importantes crece en 24-48
horas
o Excepciones: las micobacterias necesitan meses para crecer y
otras bacterias no pueden ser cultivadas.
Cuando existen buenas condiciones de crecimiento, una bacteria crece
ligeramente en tamaño o en longitud.
Una nueva pared celular se forma por el centro formando dos células
hijas, conteniendo cada una, el mismo material genético que la célula
madre.
Si el ambiente es óptimo, las dos células hijas pueden dividirse en cuatro
en 20 minutos.
Bacterias Entéricas
o E. coli
o Salmonella
o Shigella
o Yersinia
o Pseudomonas
o Proteus
o Vibrio cholerae
o Klebsiella pneumoniae
Bacilos Gram-Negativo
BGN fastidiosos
o Bordetella pertussis
o Haemophilus influenzae
o Campylobacter jejuni
o Helicobacter pylori
o Legionella pneumophila
BGN Anaeróbicos
o Bacteroides fragilis
o Fusobacterium
Cocos Gram-Negativo
Neisseria gonorrhoeae
o GONOCOCO
Neisseria meningitidis
o MENINGOCOCO
Cocos Gram-positivo
Estafilococos
o Catalasa-positiva
o Cocos Gram-positive en racimos
Staphylococcus aureus
o coagulasa-positiva
Staph. epidermidis
o Y otros estafilococos coagulasa negativo.
Estreptococos
o Catalasa-negative
Strep. pyogenes
Strep. pneumoniae
Viridans-type streps
Enterococcus faecalis
Bacilos Gram-Positivo
Clostridios
o Anaerobios
o C.perfringens
o C. tetani
o C. botulinum
o C. difficile
Bacillus cereus
o Aerobio
Listeria monocytogenes
o Anaerobio faculativo
Gram-positivo: (inusuales)
Micoplasmas
M. pneumonia, M. genitalium
Micobacterias
M. tuberculosis
M. leprae
M. avium
Espiroquetas
Bacterias en espiral delgadas
Observables por microscopía de contraste de fases o por coloración de
plata
o Treponema pallidum
o Borrelia burgdorferi
o Leptospira
o C. pneumoniae
o C. psittaci
Medios de Cultivo
solución acuosa (líquida o incorporada a un coloide en estado de gel) en
la que están presentes todas las sustancias necesarias para el
crecimiento de determinado(s) microorganismo(s).
Los medios de cultivo se pueden clasificar, en primera instancia, en tres
grandes tipos:
o Complejos o indefindos
o Sintéticos o definidos
o Semisintéticos
Sólidos
Gelatina
Sílica gel
Selectivos
PROTECCION PERSONAL
USO DE TÚNICA SIEMPRE
PARA SITUACIONES
ESPECIALES:
- ROPA ESPECIAL
- GUANTES
- LENTES
- TAPABOCAS
OTROS
Organelos eucarióticos : Cloroplastos
Estructura celular procariota - DNA
• No tiene núcleo. El DNA está en el citoplasma. Se habla de
“nucleoide” para referirse a la zona que ocupa el DNA.
• Es haploide. El genoma es una única molécula de DNA de
doble cadena, circular.
• El genoma contiene 1 - 6 x 106 pares de bases (bp) en
procariotas de vida libre; 1000-5000 genes.
• Puede contener otros elementos genéticos no indispensables
para la vida: plásmidos y genomas fágicos.
• Está rodeada por la membrana celular y cubiertas exteriores
de naturaleza variable.
La membrana cellular
Funciones:
– Transporte selectivo de sustratos.
– Participa en la generación de energía y en la división
celular.
Estructura:
– Bicapa fosfolipídica con proteínas embebidas; puede
contener también hopanoides de estructura similar al
colesterol.
– *en Archaea, membranas adaptadas a condiciones
extremas - éteres de alcohol isoprenoide, algunas
monocapas.
– Otro sistemas de membrana
Membrana fotosintética en láminas (bacterias púrpuras)
Membrana como vesículas individuales (bacterias púrpuras
Clorosomas unidos a membrana plasmática (bacterias verdes)
Bacterioclorofila asociada directamente a la membrana
plasmática (Heliobacterium)
Peptidoglicano o mureína
• Funciones: formando un saco rígido y cerrado, confiere forma
a la bacteria y previene la lisis osmótica.
• Estructura: Polímero de muropéptidos.
– Muropéptido: Es el monómero, compuesto por N-acetil
glucosamina (NAG) y ácido N-acetil murámico (NAM) en unión
b(1,4), más un tetrapéptido unido a NAG.
– Cadenas de glicanos: los monómeros se unen formando
cadenas lineales NAG-NAM-NAG-NAM-NAG-NAM-------
– Entrecruzamientos: los tetrapéptidos quedan perpendiculares
a las cadenas lineales y se unen a los tetrapéptidos de las
cadenas vecinas por enlaces peptídicos, creando la malla de
péptidoglicano.
Paredes celulares Gram positivas y Gram negativas
Las bacterias se agrupan en base a su tinción por la técnica
de Gram.
o Gram positivos - Pared celular con grueso
peptidoglicano que retiene un colorante específico.
No tienen membrana externa.
o Gram negativos - pared celular compleja, con
membrana externa y un espacio entre membrana
interna y externa -el periplasma- que contiene el saco de
mureína y abundantes enzimas. El peptidoglicano es
fino, por lo que no retienen el colorante.
Litótrofas del S
Litótrofas del S
Membrana nuclear NO SI
Organelos NO SI
Esteroles en NO SI
membrana (hopanoides)
FACTORES DE VIRULENCIA
Definicion
La patogénesis es un proceso multifactorial que depende del estado
inmune del hospedador, la naturaleza de la especie o cepa (factores
de virulencia) y el número de organismos en la exposición inicial.
DEFINICIONES
• Patogenicidad:
Capacidad de un microorganismo para causar enfermedad
Se usa para describir o comparar especies
• Virulencia:
Grado de patogenicidad de un microorganismo
Se usa para describir o comparar cepas dentro de una especie
DEFINICIONES
Invasividad:
Capacidad de un organismo para penetrar, sobrevivir a las
defensas, multiplicarse y diseminarse.
Toxigenicidad:
Capacidad de ciertos organismos para producir exotoxinas
TRIÁNGULO DE ENFERMEDAD
pa
to
ge
no
Hospedador
Ambiente
Penetración del patógeno
Adherencia y
multiplicación
Enzimas
Toxinas Invasinas
FACTORES DE VIRULENCIA
ANIMAL
ENFERMO
DEFENSAS INDUCIBLE
ETAPAS FAGOCITOSIS
• Contacto entre fagocito y célula bacteriana
• Engolfamiento
• Formación del fagosoma
• Fusión con el lisosoma
• Muerte y digestión
• PRESENTACIÓN DE ANTÍGENO
Adherencia específica de bacterias a
las superficies de células y tejidos
1. Tropismo tisular
2. Especificidad de especie
3. Especificidad genética dentro de una especie
ASPECTOS GENÉTICOS DE LOS FACTORES DE VIRULENCIA
Los factores de virulencia pueden estar codificados por:
• Plásmidos
• Transposones (SI, complejos, conjugativos)
• Islas de patogenicidad
FACTORES DE ADHERENCIA BACTERIANA
• Adhesina
• Fimbria
• Glucocálix y Cápsula
• Lipopolisacárido (LPS)
• Ácidos teicoicos y ácidos lipoteicoicos (LTA)
Adhesinas: proteínas de
pared celular que se fijan a moléculas receptoras específicas
sobre la célula hospedadora y capacitan a la bacteria para
adherir íntimamente a esa célula, colonizar y resistir la
eliminación física
PILIS
Son proyecciones moleculares parecidas a pelos
Están compuestos de moléculas de proteína, llamada pilina
agrupadas en forma de tubo con un pequeño centro hueco
Hay dos tipos:
- común
- sexual
Los pilis comunes cubren la superficie de la célula. A
menudo son adhesinas y son responsables de la capacidad
de la célula de colonizar superficies y células
A veces se las denomina fimbrias
CÁPSULAS
Cuando son cultivadas sobre medios sólidos, las bacterias
capsuladas dan lugar a colonias lisas, a menudo mucoides
Las variantes acapsuladas producen colonias de desarrollo
más lento, son rugosas o no mucoides
La cápsula contiene el antígeno capsular o K
Funciones
• Fijación o adherencia
• Evasión de fagocitosis
Muchas bacterias se rodean de uno u otro tipo de gel
hidrofílico
Si el material forma una capa razonablemente discreta, se
denomina cápsula. Si la apariencia es amorfa se denomina
capa de slime
La mayoría de las cápsulas o capas de slime son
polisacáridos, algunas son péptidos simples y muy pocas
proteínas
Cepas lisas o S capsuladas virulentas
Cepas rugosas o R no capsuladas y no virulenta
(excepciones)
PROTEÍNAS EXTRACELULARES QUE PROMUEVEN LA
INVASIÓN
• INVASINAS
• HIALURONIDASA
• COLAGENASAS
• NEURAMINIDASAS
• ESTREPTOQUINASA Y ESTAFILOQUINASA
• FOSFOLIPASAS
• LECITINASAS
• HEMOLISINAS
• COAGULASA ESTAFILOCOCICA
• PROTEASAS
• LIPASAS
• GLUCOHIDROLASAS
• NUCLEASAS
Capacidad para invadir la célula hospedadora
• Invasinas: Shigella, E coli EIEC, Salmonella, Yersinia,
Listeria producen proteínas que forman poros entre la bacteria
y la MC del hospedador.
• Proteínas superficiales ligadoras de colina (Streptococcus)
• Proteína I (Neisseria)
• Combinación invasinas - motilidad (Borrelia, Treponema)
CLASIFICACIÓN DE LAS TOXINAS
Patrón de liberación: endotoxina o exotoxina
Blanco celular / tejido: enterotoxinas, neurotoxinas,
leucotoxinas, hemolisinas.
Mecanismo de acción:
Toxinas que dañan la membrana (citolisinas)
Toxinas moduladoras de receptor
Toxinas internalizadas / enzimáticamente
Toxinas ADP-ribosilantes
Toxinas adenilato ciclasa
Efectos biológicos: dermonecrótica, productoras de edema,
hemolítica, productoras de diarrea.
TOXINAS BACTERIANAS
EXOTOXINAS ENDOTOXINAS
Familia Enterobacteriaceae
CARACTERÍSTICAS
BACILOS RECTOS, 0,4-0,6 X 2-3 µm, GRAM NEGATIVOS
NO ESPORULADOS, ANAEROBIOS FACULTATIVOS,
MÓVILES O INMÓ-VILES
FERMENTAN GLUCOSA, CATALASA POSITIVOS, OXIDASA
NEGATIVOS
HÁBITAT
AGUA, TIERRA, PLANTAS, TRACTO G.I. HOMBRE Y
ANIMALES
PRESENCIA EN AGUA INDICA CONTAMINACIÓN FECAL
UBICUAS (Klebsiella) O DE DISTRIBUCIÓN LIMITIDA
(Salmonella typhi)
TAXONOMÍA
41 GÉNEROS Y CIENTOS DE ESPECIES
CLASIFICACIÓN POR CRITERIOS BIOQUÍMICOS Y
ANTIGÉNICOS
ACTUALMENTE CRITERIOS GENÉTICOS: HIBRIDACIÓN
ADN, SECUENCIACIÓN ADN Y ARNr 16S
PODER PATÓGENO
ALREDEDOR DE 28 ESPECIES TIENEN IMPORTANCIA
CLÍNICA
CAUSANTES DE DIVERSOS CUADROS CLÍNICOS
PATÓGENAS VERDADERAS O PRIMARIAS
PATÓGENAS OPORTUNISTAS O POTENCIALES
PODER PATÓGENO
FACTORES DE VIRULENCIA: ADHE-SINAS, EXOTOXINAS,
ENDOTOXI-NAS, SIDERÓFOROS, ANTÍGENOS O-K,
PROTEÍNAS DE MEMBRANA EXTERNA
GENES DE VIRULENCIA: CROMOSO-MA, PLÁSMIDOS O
PROFAGOS
ISLAS DE PATOGENICIDAD
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN
MEDIOS NO ENRIQUECIDOS
MEDIOS SELECTIVOS/DIFEREN-CIALES
INHIBEN CRECIMIENTO DE GRAM POSITIVAS Y OTRAS
GRAM NEGATIVAS NO ENTÉRICAS
CITRATO SÓDICO, EOSINA, SALES BILIARES, CRISTAL
VIOLETA, etc.
MUESTRAS DE ÁREAS ESTÉRILES: MEDIOS
ENRIQUECIDOS
AGAR McCONKEY: LACTOSA + (Escherichia, Klebsiella,
Enterobac-ter) Y LACTOSA – (Salmonella, Proteus, Shigella,
etc.)
MUESTRAS INTESTINALES: SELEC-
TIVOS/DIFERENCIALES, ENRIQUE-CIMIENTO PREVIO
PRUEBAS BIOQUÍMICAS: IMVIC
INDOL, ROJO DE METILO, VOGES-PROSKAUER, CITRATO
SISTEMAS COMERCIALES DE IDEN-TIFICACIÓN
BIOQUÍMICA
TIPIFICACIÓN
PARA PODER PATÓGENO Y ESTUDIOS
EPIDEMIOLÓGICOS
BIOTIPIFICACIÓN: CARACTERES BIOQUÍMICOS
SEROTIPIFICACIÓN: ANTÍGENOS O (SOMÁTICOS), K ó Vi
(CAPSULA-RES) Y H (FLAGELARES)
SEROGRUPOS Y SEROTIPOS
FAGOTIPIFICACIÓN: DE VALOR EN Salmonella Y E. coli
ANTIBIOTIPIFICACIÓN: PATRÓN DE SUSCEPTIBILIAD A
ANTIBIÓTI-COS
VIROTIPIFICACIÓN: DETECTAR GENES DE VIRULENCIA
GENOTIPIFICACIÓN MOLECULAR: GRUPOS CLONALES,
etc.
GÉNERO Escherichia
INTRODUCCIÓN
ESPECIE TIPO: E. coli
ANTÍGENO O: PARTE DEL LPS (TERMOESTABLE -121ºC 2
hs)
ANTÍGENO K: POLISACÁRIDO CAPSULAR (K I y II)
FLAGELARES H: PROTEÍNAS
FÓRMULA ANTIGÉNICA: O:K:H
PATOGENICIDAD
CEPAS PATÓGENAS: INTESTINALES Y
EXTRAINTESTINALES
DIARREAS EN NEONATOS
VIRULENCIA: FENÓMENO MULTI-FACTORIAL
CORRESPONDENCIA ENTRE ALGU-NOS FACTORES Y
SEROTIPOS
ADHESINAS: FIMBRIAS O PILI
ADHESINAS MANOSA SENSIBLES (FIMBRIAS TIPO I)
(HAMS)
ADHESINAS MANOSA RESISTEN-TES (HAMR)
ENTEROTOXINAS Y TOXINAS
PATÓGENOS EN ALGUNAS ESPECIES Y COMENSALES
EN OTRAS (EJ. O157:H7)
GRUPOS PATOGÉNICOS
ECEP: ENTEROPATOGÉNICAS
ECET: ENTEROTOXIGÉNICAS
ECEI: ENTEROINVASIVAS
ECVT ó ECEH: VEROTOXIGÉNICAS O
ENTEROHEMORRÁGICAS
ECEA: ENTEROAGREGATIVAS
ECAD: ADHERENCIA DIFUSA
UROPATOGÉNAS Y SEPTICÉMICAS
ECEP
HUMANOS, CONEJOS, PERROS
CUADRO DE ADHESIÓN Y BORRADO DEL ENTEROCITO
POSEEN ADHESINAS, ISLA DE PATOGENICIDAD (LOCUS
LEE)
CAUSANTES DE DIARREAS
HUMANOS, PORCINOS, BOVINOS OVINOS, PERROS
POSEEN ADHESINAS FIMBRIALES Y ENTEROTOXINAS
CEPAS PORCINAS: TOXINAS LT, ST Y ADHESINAS K88,
P987, F41
CEPAS BOVINAS: TOXINA ST Y F41
ESPECIFIDAD DE HOSPEDADOR
ENTEROTOXINA ST
o PM: 5.000; NO ANTIGÉNICA
o ACCIÓN: GUANILATO CICLASA
o DURACIÓN: CORTA
o EFECTO: ELEVA cGMP, SUPRIME ABSORCIÓN DE Cl-,
PÉRDIDA DE Na+, H2O Y HCO3- AL LUMEN
ENTEROTOXINA LT
o PM: 85.000; ANTIGÉNICA
o ACCIÓN: ADENILATO CICLASA
o DURACIÓN: MAYOR QUE ST
o EFECTO: ELEVA cAMP, SUPRIME ABSORCIÓN DE Cl-,
PÉRDIDA DE Na+, H2O Y HCO3- AL LUMEN
ECVT
COLITIS HEMORRÁGICA Y SÍNDROME URÉMICO
HEMOLÍTICO EN HUMANOS (O157:H7)
RUMIANTES: RESERVORIOS
o COLONIZACIÓN DE MUCOSA IN-TESTINAL (10%
BOVINOS)
VT1-2: DESTRUYEN CÉLULAS VERO
COLITIS HEMORRÁGICAS TERNEROS
“BORRADO” (effacement) DEL ENTEROCITO
LOCUS CROMOSÓMICO LEE
ENTEROHEMOLISINA Y FIMBRIA
UROPATOGÉNICAS Y SEPTICÉMICAS
SIDERÓFORO AEROBACTINA
FACTORES DE RESISTENCIA AL SUERO Y FAGOCITOSIS
ADHESINAS FIMBRIALES (P) Y AFIMBRIALES (CS31A)
FACTOR NECROSANTE CITOTÓXICO (CNF)
ITU Y SEPTICEMIAS EN PERROS Y GATOS
SEPTICEMIA NEONATAL EN RUMIANTES Y PORCINOS
INFECCIONES RESPIRATORIAS Y SEPTICEMIAS EN AVES
DIAGNÓSTICO
ORIGEN DE LA MUESTRA
MEDIOS SELECTIVOS/DIFEREN-CIALES (McCONKEY,
EMB, etc,)
ÁREAS EXTRAINTESTINALES: AGAR SANGRE,
UROCULTIVO, etc.
BIOTIPIFICACIÓN
ENTÉRICAS: DIFERENCIACIÓN DE CEPAS PATÓGENAS
CULTIVO MF: DETECCIÓN CEPAS FIMBRIADAS (IF,
AGLUTINA-CIÓN) y/o ENTEROTOXINAS (MÉTODOS
BIOLÓGICOS, ELISA)
POSTMORTEM: RECUENTO DE COLONIAS EN YEYUNO
(>106), IDENTIFICACIÓN POR IFD
DEMOSTRACIÓN GENES QUE CODIFICAN PARA TOXINAS
(PCR Ó SONDAS DE ADN)
PARA VTEC SIMILAR A ENTÉRICAS
Género Staphylococcus
Género Staphylococcus
Familia: Micrococcaceae
3 Géneros:
Staphylococcus (patógeno)
Micrococcus (no-patógeno)
Planococcus (habitats marinos)
Staphylo (gr) = racimo de uvas
Contiene unas 40 especies y muchas subespecies
Cocos, inmóviles, anaerobios facultativos
Gram-positivo en racimos
No forman esporas
Fermentadores de azúcares sin producir gas.
Propiedades generals
En este género se encuentran organismos de los más
resistentes al stress ambiental de todas las bacterias no
formadoras de esporas.
o Resisten a la deshidratación, son relativamente
resistentes al calor y toleran la acción de muchos de los
desinfectantes más communes
Colonización
Aprox. 80% de la población está colonizada por S. aureus
(transitoriamente)
20-30% está colonizada permanentemente
Fosas nasales, garganta, perineo, axilas y recto.
Personal de salud, diabéticos y dializados tienden a estar más
colonizados
Especies patógenas: piogénicas
Manifestación clínica distintiva: un absceso
Granos, pústulas o forúnculos
Invasión a tejidos más profundos puede causar:
o Neumonía
o Osteomielitis
o Meningitis
o Artritis
Intoxicaciones:
o Síndrome del Shock Tóxico
o Intoxicación alimenticia
o En el trópico: piomiositis (muy común)
S. aureus
Miembro “normal” de la membrana nasal, nasofaringe, piel, perineo,
tracto gastrointestinal y genital.
Causante de:
Forúnculos, carbúnculos, impétigo, necrólisis epidérmica tóxica,
neumonía, osteomielitis, meningitis, endocarditis, mastitis,
bacteremia, abscesos, enterocolitis, infección urogenital, síndrome
del shock tóxico.
Staphylococcus aureus:
principal especie
Forma colonias amarillentas en la mayoría de medios de
cultivo.
Pigmento: beta-caroteno
Componentes y Productos:
Cápsula
La mayoría de estafilococos producen microcápsulas.
Se han identificado 11 tipos
o Tipo 5 y tipo 8 (75% de infecciones humanas)
o Tipo 5: S. aureus meticilino-resistentes
Todos los tipos son químicamente relacionados
Componentes y Productos:
Proteínas de Superficie
Proteína A
o Adhesina
o Antifagocítica
o Pro-inflamatoria (neumonía)
Componentes de superficie microbiana que reconocen
moléculas adhesivas de la matriz extracelular (MSCRAMM)
o Papel importante en la colonización en el tejido del
hospedero.
Fisiopatología
Toxinas alfa, beta, gamma y delta
Exfoliatina
Síndrome del shock tóxico
Enterotoxinas
TSST-1
PVL: piel necrótica, neumonía y osteomielitis
Componentes y Productos: Toxinas
Citotoxinas
o Formadoras de poros (daño celular)
Toxinas pirogénicas
o Liberación de citocinas de la respuesta inmune.
Enterotoxinas A y E
o Intoxicación alimenticia y SST
o Resistentes al calor (100ºC/30 min)
o Producción favorecida en flanes, leche cruda, crema,
helado, salsas, pescado.
Toxinas exfoliativas (epidermolíticas)
o A y B: causan eritema y separación
o Leucocidina (toxina leucocitolítica) Panton-Valentine
leukocidin
Asociada con infecciones pulmonares y piel
necrótica
Componentes y Productos
Enzimas
Proteolíticas: facilitan la diseminación al tejido adyacente
o Hialuronidasa, proteasa y lipasa.
Beta-lactamasa: inactiva a la penicilina
Coagulasa: factor activador de protrombina
o Convierte al fibrinógeno en fibrina
Catalasa
o Inactiva el peróxido de hidrógeno que producen los
fagocitos
Hemolisinas
HEMOLISINAS
Hemolisinas:
a, b, g, d
Todas tienen características antigénicas distintas
Casi todas las cepas de S. aureus producen una o una
combinación de hemolisinas.
a: se une al receptor en la célula del hospedero y
causa lisis osmótica
b: esfingomielinasa*
Degrada membranas con esfingomielina
La mayoría de S. aureus no produce esta
hemolisina
d : péptido pequeño con papel desconocido
PATOGENICIDAD
Botriomicosis: reacción granulomatosa supurativa
Infecciones supurativas
Septicemia
Pioderma
Mastitis
Infecciones urinarias
Enterocolitis
Neumonía, amigdalitis
Puertas de entrada
Folículo piloso
Rasguño o cortada
Punción con aguja
Herida quirúrgica /suturas
Tracto respiratorio
Tracto GI
Diseminación hematógena
Músculo esquelético
Corazón
Meninges
Riñón
Hueso
BOTRIOMICOSIS
Lesión solitaria o como unas pocas lesiones que suelen producirse
en el área de los genitales y, a veces, en la cara y el tronco.
En la mayor parte de los casos, el factor desencadenante es un
cuerpo extraño como una espina de pescado, una astilla, etc.
Celulitis
Inflamación de las células
Indica diseminación aguda de la infección en la dermis y
tejido subcutáneo con dolor, eritema y calor.
Enfermedad exfoliante de la piel
Varios síndromes
o Ritter’s (pénfigo neonatorum)
Dermatitis exfoliativa generalizada en el r.n.
o Necrólisis epidérmica tóxica en niños y
ocasionalmente adultos
o Impétigo buloso y escarlatina estafilocócica
o Síndrome de la piel escaldada
o La exfoliatina hidroliza la desmogleína 1 y altera las
uniones con los desmosomas.
Síndrome del shock tóxico (SST)
Inicio repentino de fiebre, escalofríos, vómitos, diarrea,
dolores musculares y erupción en la piel.
Rápido progreso a hipotensión severa y disfunción
multisistémica por hiperestimulación inmune
Descamación, especialmente en las palmas y plantas de
los pies.
o Descamación de las capas externas de la piel
o Puede ocurrir 1-2 semanas después de que se
establece la enfermedad
Síndrome del Shock Tóxico
Asociado al uso de tampones y dispositivos intravaginales
contraceptivos
También ocurre como complicación de abscesos de piel o
cirugía.
Grupos de riesgo
o Mujeres menstruando
o Mujeres usando contraceptivos de barrera
o Individuos sometidos a cirugía nasal
o Individuos con infección de heridas postoperatorias
Intoxicación alimenticia por S. aureus
Alimentos: carnes, productos cárnicos, huevos y
especialmente ensaladas a base de mayonesa… leche cruda
(infección de la ubre)
Causada por una enterotoxina termo-estable! La
comida es cocinada, las bacterias se mueren y aún provoca
enfermedad…
Considerada la forma más común de intoxicación alimenticia
(probablemente sub-registrada)
Estafilococos coagulasa negativa
Producen un expolisacárido (slime) que promueve la adherencia de
cuerpo extraño y resistencia a la fagocitosis
Patogenicidad de S. epidermidis
- Implicada en implantes de cirugía plástica
- Las células pueden unirse a la fibronectina (depositada
por el hospedero sobre los implantes)
- Las células pueden producir una especie de película
sobre el implante – no un glicocálix sino un ácido
teicoico secretado.
Patogenicidad de S. saprophyticus
-coagulasa negativa
-Infección urinaria
Aislamiento, Cultivo e Identificación
Muestras: pus (hisopados), secreción, tejidos dañados,
productos lácteos.
Medios de cultivo comunes: agar sangre
Incubación de 24 horas:
o Colonias redondas, lisas, lustrosas, pigmentación
dorada.
o Gram positivos, racimos
o Hemólisis
Identificación definitiva:
o coagulasa positiva
o Fermentación de manitol
TRATAMIENTO
OXACILINA
NAFCILINA
VANCOMICINA
CEFAZOLINA
LINCOMICINA
CLINDAMICINA
DICLOXACILINA
TSX
MINOCICLINA
Susceptibilidad antimicrobiana Emergencia de
cepas resistentes
• Principal problema: emergencia de cepas
multiresistentes (MRS) de estafilococos.
• La mayoría de estafilococos son ahora penicilino-resistentes
• Cepas MRs responsables de brotes nosocomiales de SST
• Algunas cepas ahora oxacilino-resistentes
• Único antibiótico de elección = vancomicina
Resistencia a antibióticos
o Cepas de S. aureus aisladas en hospitales son resistentes a
antibióticos
o Existen cepas resistentes a todos los antibióticos usados
comúnmente
o La Vancomicina es una alternativa
Se ha documentado resistencia a Vancomicin
(VRSA)
o Opciones: linezolida, rifampicina, trimetoprimsulfa.
o S. aureus meticilino-resistente
MRSA
Meticilina fue desarrollada a finales de los
50s
MRSA fueron identificados en 1961
No se usa más clínicamente
Incremento de MRSA
o 1974 → 2% de las infecciones estafilocócicas
o 1995 → aumentó a 22%
o 2004 → 63%
o 2010 → ??
MRSA transmitido principalmente a pacientes vía manos de
trabajadores de salud
Todos los trabajadores de salud deben lavar sus manos
con agua y jabón o usar un sanitizador con base de
alcohol.
INVESTIGACIÓN Y RECUENTO DE Enterobacteriaceae
LACTOSA + (COLIFORMES)
Las Enterobacteriaceae lactosa-positivas o grupo coli-aerogenes
constituyen un grupo de bacterias que se definen más por las
pruebas usadas para su aislamiento que por criterios taxonómicos.
Pertenecen a la familia Enterobacteriaceae y se caracterizan por su
capacidad para fermentar la lactosa con producción de ácido y gas,
más o menos rápidamente, en un periodo de 48 horas y con una
temperatura de incubación comprendida entre 30-37ºC.ç
Investigación y recuento de Enterobacterias lactosa +
Se encuentran en el intestino del hombre y de los animales, pero
también en otros ambientes: suelo, plantas, cáscara de huevo, etc.
Aunque su especificidad como indicadores no es buena, se suelen
usar como índice de contaminación fecal por:
- Su frecuencia en heces.
- Su fácil detección en el laboratorio.
- Sus características semejantes, en algún aspecto, a las de
algunos miembros patógenos de la familia Enterobacteriaceae.
Dentró, de este grupo, son los coliformes fecales los que tienen
significado sanitario y, por consiguiente, los que más interesan en el
análisis microbiológico de alimentos.
Se considera a los coliformes fecales como presuntos Escherichia
coli. Sus principales características son:
- Capacidad para desarrollarse entre 43,5-45,5 ºC.
- Capacidad para crecer en presencia de sales biliares.
- Facultad para producir indol en agua de peptona.
En general, niveles altos de Enterobacteriaceae lactosa-positivas
(coliformes) indican manipulación y elaboración deficientes de los
alimentos.
Son bacilos Gram-, rectos, móviles, por flagelos peritricos o algunos
inmóviles. La gran mayoría poseen fimbrias para conjugación
Presenta una serie de pruebas bioquímicas características: IMViC
(++--). No forma SH2, oxidasa- y catalasa-. Fermenta lactosa y
glucosa con gran producción de ácido y gas.
Se eliminan por las heces y son bastante resistentes a las
condiciones ambientales por lo que se utilizan como índice de
contaminación fecal en aguas y alimentos
Tiene el inconveniente de vivir poco tiempo en el ambiente, por lo
que su presencia en los alimentos indica contaminación reciente.
Cepas enterotoxigénicas (ECET).
Elaboran una toxina termolábil (LT) que se inactiva a 60ºC durante
30 minutos y/o una toxina termoestable (ST) que resiste a más de
100ºC durante 30 minutos. La toxina termolábil es estructuralmente
semejante a la toxina colérica.
Se localiza la bacteria en el intestino delgado elaborando toxinas
que alteran las células del epitelio del intestino delgado,
destruyéndolas, lo que ocasiona salida de agua y electrolitos que se
vierten a la luz intestinal originando una diarrea acuosa.
Originan diarrea infantil y la denominada diarrea del turista. Los
síntomas se inician entre las 8 y 48 horas de la ingestión del
alimento y son diarrea acuosa, a veces con mucosidad, dolor
abdominal, nauseas, vómitos y si se origina fiebre, no muy alta. A
veces puede ser grave, semejante al colera. Son excepcionales en
nuestro país, pero causan con gran frecuencia enteritis en paises
subdesarrollados del Próximo y Extremo Oriente, Africa y Centro y
SurAmerica.
Cepas enteroinvasivas (ECEI).
Tienen características atípicas que las hacen semejantes a Shigella,
ya que son inmóviles y no producen gas de la glucosa y fermenta la
lactosa muy lentamente. Tienen un potencial enteroinvasor
semejante al de Shigella.
Las bacterias penetran en el intestino e invaden las células
epiteliales del colon donde se multiplican y destruyen ocasionando
ulceraciones, lo que ocasiona diarrea sanguinolenta. Es mas grave
que la anterior. Los síntomas aparecen entre las 8 y 24 horas de la
ingestión y son escalofríos, malestar, dolor de cabeza, dolor
abdominal, diarrea sanguinolenta y fiebre. Dura varios días y
semanas. No es demasiado grave y es muy rara en nuestro país.
Cepas enteropatógenas (ECEP).
Se les denomina cepas enteropatógenas clásicas por ser las que
mas comunmente ocasionan enteritis en nuestro país. Ocasionan
una patología parecida a las cepas enterotoxigénicas. Son
causantes de numerosos brotes en guarderías y otras comunidades
infantiles. Es mas frecuente en países subdesarrollados con
condiciones higiénicas deficientes. Se localizan en el epitelio
intestinal pero no destruyen los tejidos. Los síntomas aparecen
entre las 17 y 72 horas y son dolor abdominal, vómitos, fiebre ,
diarrea acuosa con abundante moco pero sin sangre. Dura entre 7 y
72 horas.
Cepas enterohemorrágicas (ECEH).
E.coli serovar O157:H7 pueden causar la muerte. Producen
verotoxina. Lesiona la mucosa intestinal produciendo sangrado, sin
reacción inflamatoria local.
Colitis hemorrágica: dolor abdominal, con vómitos, diarrea acuosa
y sanguinolenta y poca o ninguna fiebre.
Síndrome hemolítico urémico: diarrea sanguinolenta y sobre todo
en niños fallo renal agudo que puede terminar en muerte. No hay
fiebre.
Púrpura trombótica trombocitopénica: No hay fiebre y hay
diarrea hemorrágica, pero se afecta el sistema nervioso central. Se
producen coágulos en el cerebro y puede ocasionar la muerte.
Los miembros de la familia Enterobacteriaceae son
microorganismos de forma bacilar, Gram-, anaerobios facultativos,
no esporulados, móviles o inmóviles, que fermentan la glucosa,
reducen los nitratos a nitritos, son oxidasa- y crecen en medios que
contienen sales biliares. De los integrantes de esta familia, unos
fermentan la lactosa y otros no. Incluye los siguientes géneros:
No fermentadores de la lactosa Fermentadores de la lactosa
Salmonella Escherichia
Shigella Enterobacter
Edwarsiella Citrobacter
Hafnia Serratia (a veces)
Proteus Kelbsiella
Providencia
Yersinia
Morganella
Erwinia (fermenta excepcionalmente)
Muestras de inters
• SANGRE
• MATERIA FECAL
• TEJIDOS
• ORINA
• EXUDADO
• LECHE
• FETOS
• SUERO DE VACA ABORTADA
MUESTRAS DE SANGRE
• Sangre sin anticoagulante
Sirve para obtener suero sanguíneo
• Aplicaciones
Para realizar todos los ensayos inmunológicos como
Brucelosis, Leptospirosis, Diarrea Viral entre otros,
determinaciones de Química sanguínea como Minerales,
enzimas etc.
Se utilizan tubos al vació tapa roja, para obtener suero
para la mayoría de exámenes de laboratorio se requieren
mínimo 5 ml de sangre sin anticoagulante.
• Precauciones
• Transporte
Si la muestra llega al laboratorio antes de 4 horas, se
puede transportar a temperatura ambiente de lo contrario
envíelas refrigeradas.