CÓSMIDOS

DEFINICIÓN:
Los cósmidos son vectores de clonación, que han sido ampliamente usados en la
elaboración de genotecas de DNA genómicos de gran tamaño, ya que permiten la
introducción de insertos de DNA de hasta 45 kb, el doble que los vectores derivados de
la eliminación de parte del genoma del fago λ. , los fagémidos.
CARACTERÍSTICAS:
 Descritos por primera vez por Collins Hohn en 1978.
 Son vectores híbridos construidos utilizando partes del cromosoma del fago
lambda y de DNA plasmidico.
 Contienen la secuencia “cos” del fago lambda.
 Secuencias plasmidicas de replicación y de genes de resistencia a antibióticos.
 Moléculas de ADN circular extra-cromosómico que combinan características de
plásmidos y fagos. Los cósmidos son híbridos entre plásmidos y el fago λ.

Cósmidos Cósmidos

Descripción:
Origen de replicación (ori), sitio cos (cos site), gen de resistencia a ampicilina (ampR) y
sitios de clonación (cloning sites).
Por un lado, poseen la habilidad del plásmido para replicarse autónomamente las células,
contienen el origen de replicación y los genes de resistencia a los antibióticos de su
plásmido parental. Por el otro, contienen los sitios cos del fago λ para empaquetamiento
in vitro.
El sitio cos permite empaquetar 40-45 kb de DNA en una partícula λ que se replica como
un plásmido. La principal ventaja de los cósmidos como vectores es la habilidad para
insertar fragmentos de ADN de 35 a 45 kb.
 Su DNA que contiene DNA insertado, se empaqueta en la capside proteica de
lambda para formar partículas fagicas infectivas.
 Una vez el cósmidos entra en la célula huéspedes, se replica como un plásmido.
  Los cósmidos pueden trasportar insertos de DNA mucho más grandes que los que
lambda puede llevar.
 Pueden replicarse como plásmidos si tienen un origen de replicación adecuados.
 Generalmente contienen marcadores genéticos que permiten su selección en los
dos sistemas huésped.

¿EN QUE CONSISTE?

Realmente un cósmido consiste en un plásmido al cual se le han adicionado unos
segmentos del genoma de un bacteriófago, el fago λ.
¿QUÉ CONTIENE?
Un cósmido contiene:

 Del plásmido, el ori C y un gen de resistencia a un antibiótico, esto depende del tipo
de plásmido del cual derive y, por tanto puede contener más segmentos como por
ejemplo el gen LacZ, que permite la selección blanco/azul de las colonias.
 Del fago λ, los extremos COS, extremos complementarios del genoma del fago y que
se emplean para la recircularización del mismo.
Estos vectores facilitan el trabajo porque permiten el empaquetamiento in vitro de las
secuencias entre dos extremos COS y usar los fagos empaquetados para transfectarcepas
de E. coli, consiguiendo un plásmido en la bacteria, ya que el cósmido se recirculariza al
entrar gracias a los extremos COS.
También tiene genes de resistencia a antibióticos de origen plasmídico, que ayudan en la
identificación de células huéspedes que contienen los cósmidos recombinantes. Después
de insertar fragmentos de DNA, los cósmidos recombinantes se empaquetan en la cápside
proteica de λ para formar partículas fágicas infectivas. Una vez que en la célula huésped,
el cósmido se replica como plásmido.
BIBLIOGRAFÍA:
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Genética” 8ª edición. Pearson Prentice Hall.
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