Bioelementos de los medios de Cultivo

Cuando se diseña la fórmula de un medio de cultivo, es necesario conocer en qué

categoría está incluido el microorganismo a cultivar para elegir acertadamente los
componentes del medio: generalmente compuestos inorgánicos para microorganismos
fotótrofos y quimiolitótrofos, y orgánicos para quimioorganotrofos.

Un medio de cultivo está integrado por:

1. Elementos energéticos y constitutivos:

a) Macroelementos (g/l):
 Fuente de carbono: puede ser CO2 o compuestos carbonados orgánicos. Se
utilizan en la construcción de innumerables moléculas necesarias para la
célula. Los hidratos de carbono se consideran fuente de carbono y energía por
excelencia en los quimioorganotrofos. Los más comunes son:
 hexosas como glucosa, fructosa, galactosa;
 pentosas como arabinosa, xilosa.
 disacáridos como lactosa, sacarosa, maltosa;
 trisacáridos como rafinosa;
 polisacáridos como almidón, glucógeno;
 alcoholes como glicerol, sorbitol, manitol; y
 glucósidos como salicina, y esculina.
 Fuente de nitrógeno: muchos organismos son autótrofos respecto de la fuente
de nitrógeno y pueden crecer utilizando moléculas sencillas como NO 3-, NH3 o
N2. El nitrógeno es metabolizado para proveer proteínas, ácidos nucleicos y
polímeros de pared. Otros microorganismos pueden incorporar nitrógeno en
forma de aminoácidos, bases púricas o pirimidinas.
 En ciertos medios de cultivo quimioorganotrofos, el aporte de
nitrógeno es realizado por peptonas, productos de la hidrólisis ácida o
enzimática de proteínas de origen animal o vegetal (carne, soja,
caseína, gelatina, harina de maíz y girasol). Esos productos de
hidrólisis pueden tener longitud variable, desde aminoácidos, hasta
dipéptidos, tripéptidos, polipéptidos, albumosas, proteasas.

La hidrólisis ácida puede ser realizada con HCl o H2SO4 y presenta las siguientes
desventajas:
 El triptófano se destruye
 Se pierde el 10% de vitaminas presentes
 Desaparecen la mayoría de los polipéptidos

Se prefiere la hidrólisis enzimática que emplea diferentes proteasas actuando a pH

específicos, ej. papaína a pH 6.5, tripsina a pH 8.5, pepsina a pH 2.
Las peptonas son fuente de nitrógeno y, en ausencia de hidratos de carbono en el
medio de cultivo complejo, cumplen la función de fuente de carbono y energía.
Aportan vitaminas del grupo B, trazas de metales y fosfatos que dan carácter “buffer”
al medio.

Las peptonas de origen vegetal pueden aportar carbohidratos fermentables.

 Fuente de fósforo: Se adicionan fosfatos de sodio o potasio que confieren

poder buffer al medio de cultivo (pH cercano a 7). Si se agrega yema de
huevo al medio de cultivo, el aporte de P es realizado por los
glicerofosfolípidos de la yema. El fósforo se incorpora a ácidos nucleicos,
fosfolípidos, polímeros de membrana, ATP, y sustancias de reserva
(gránulos de volutina)
 Fuente de azufre: Se adiciona como SO42-, cisteína o metionina. En la
célula se incorpora a aminoácidos y diferentes coenzimas.
 Fuente de calcio, magnesio y potasio: Potasio, calcio y magnesio se
adicionan como sales inorgánicas. Son cationes que estabilizan
macromoléculas aniónicas. K+ actúa como coenzima y estabilizador de
RNA. Mg2+ se integra a la clorofila en organismos fotosintéticos. Ca2+
abunda en esporas como dipicolínato de calcio.
 Fuente de sodio: El sodio contribuye a equilibrar la presión osmótica del
medio extracelular. Requerido por bacterias halofílicas. Se suele
suministrar como NaCl.

b) Microelementos o trazas (mg ó ug/ml): Suelen estar naturalmente presentes

como contaminantes de los macroelementos.
Frecuentemente esenciales:
 Mn: estimula el crecimiento, favorece la esporulación.
 Fe: cofactor de enzimas para la función respiratoria en citocromos,
catalasa y flavoproteínas. En adecuada concentración favorece la síntesis
de toxina diftérica.
 Co: interviene en la síntesis de vitamina B12.
 Cu: presente en oxidasa terminal de la cadena respiratoria.
Esenciales en casos especiales:
 B, Al, Si, V, As, Se, Mo, Sn, Be, F, etc.
Inhibidores del crecimiento:
 Au, Ag, Cd, Cr, Pb, y cualquier microelemento a concentración mayor que
10-4 M puede resultar tóxico para el desarrollo de los microorganismos.