Bioquímica I

Aula 14

POLINUCLEOTÌDOS
E ESTRUTURA DO
DNA

1
 Nucleotídeos

Via de armazenamento e da transmissão da

informação genética

2
 Nucleotídeos

Aspectos Biológicos

DNA: armazenamento e transmissão de informação biológica

RNA ribossômico (RNAr): estrutura e atividade catalítica do

ribossomo

RNA mensageiro (RNAm): Transmite a informação contida na

sequencia de nucleotídeos do DNA para o ribossomo

RNA transferência (RNAt): transporte de aminoácidos para sítio

catalítico do ribosomo.

3
Nucleotídeos

4
 Natureza Química dos Nucleotídeos

Nucleotídeo

MM ~ 650

Nucleosídeo (sem fosfato)

5
 Estrutura de DNA

Formação da Ligação fosfodiester da nucleosídeo monofosfato

tem DGo‘≈ +25 kJ/mol – DESFAVORÁVEL.
6
 Natureza Química dos Nucleotídeos
Síntese usa nucleosídeo trifosfato, acoplado ao hidrolise de pirofosfasto

Balança energética:

Formação da fosfodiester - +25 kJ/mol

Hidrolise do nTP -31 kJ/mol
Hidrolise do pirofosfato - -19 kJ/mol

TOTAL -25 kJ/mol

7
 Ácidos Nucléicos

Hidroxila C3’

Ligação 3’-5’
fosfodiéster
Ponte de grupo fosfato
Hidroxila C5’

8
Ácidos Nucléicos

→ hidrofílicos (hidratados)

→ Fosfatos ionizados
(negativos em pH7.0)

→ interações com íons e proteínas

Oligonucleotídeo
Polinucleotídeo 9
 Ácidos Nucléicos

Representação Esquemática
A

G
Convenção: 5’ -> 3’

U
pA-C-G-U-AOH
pApCpGpUpA
A
pACGUA

10
 Ácidos Nucléicos

As propriedades das bases nitrogenadas

Estrutura tridimensional dos ácidos nucléicos

11
Ácidos Nucléicos

Adenina

Ressonância entre átomos confere caráter de

dupla ligação à maioria das ligações

AS BASES SÃO PLANARES

AS BASES SÃO GRUPOS
AROMATICOS
12
 Ácidos Nucléicos
Absorção de Luz

purinas pirimidinas

Absorção de luz ~260nm 13

Ácidos Nucléicos

→ hidrofóbicas

→  solubilidade H2O

EMPILHAMENTO
van der Waals
dipolo-dipolo

Estabilidade
estrutural da
cadeia 14
 DNA e informação gênica

Erwin Chargaff e
cols. 1949

• A, T, C, G = proporções variadas nos  organismos

• Quantidades de certas bases eram relacionadas
15
DNA e informação gênica

16
 DNA e informação gênica

Conclusões (“regras”) de Chargaff:

Composições de DNA variam entre os espécies

DNA de tecidos diferentes da mesma espécie tem a mesma

composição

 Composição do DNA não se altera com a idade ou ambiente

 Todas as espécies A = T e G = C
A+G=T+C
17
 Ácidos Nucléicos
PAREAMENTO DAS BASES

Watson & Crick, 1953 18

Estrutura do DNA

Pareamento obedecendo
Chargaff: A=T C=G

 Cadeias antiparalelas
complementares (raios-x
confirmaram)

19
 Estrutura do DNA

Rosalind Franklin &

Maurice Wilkins, 1950

Nobel medicina 1962

Difração
de raios-X
DNA é helicoidal

Periodicidade no eixo maior

* 3,4 Å e * 34 Å

20
 Estrutura do DNA

Watson &
Crick, 1953

Duas hélices antiparalelas 21

 Estrutura do DNA

Estrutura Estrutura
primária secundária

22
 Estrutura do DNA

Forças que estabilizam a Fita Dupla

PONTES DE
HIDROGÊNIO
 bases complementares

EMPILHAMENTO DAS
BASES NITROGENADAS
 hidrofóbicas
 van der Waals

* hidratação do fosfato e
interações com íons
23
 Estrutura do DNA

Interação proteína/DNA

Ex - Proteína repressor cro

do bacteriofago l. (66 amino
acids)

Forma dimerica da proteína

liga ao sítio específico no
DNA determinado pela
sequencia de nucleotídeos.
(cro envolvido da regulação
genica)

24
DNA armazena informação genética

25
 DNA e informação gênica
Frederich Griffith, 1928- Virulência de Diplococcus pneumonidae
Cepa encapsulada mata Cepa não-encapsulada não mata

Avery, MacLeod, McCarty, 1944

26

Transformação do fenótipo da cepa não virulenta por um estrato celular

da cepa virulenta
 DNA e informação gênica

Avery, MacLeod, McCarty, 1944

Streptococcus pneumonidae

Proteases (não destruia

virulência)

Desoxiribonuclease
(INATIVAVA virulência)

Gerações Virulentas

DNA purificado leva informação de virulência 27

DNA e informação gênica

Hershey &
Martha Chase,
1952

* DNA levou
mensagem genética
de replicação viral
para a bactéria
hospedeira

* Vírus descendentes
foram produzidos 28
 Estrutura do DNA

Dupla hélice e transmissão

de informação genética

Modelo da dupla-hélice
sugeriu transmissão de
informação

1- separação das fitas

2- síntese de uma nova

para cada fita molde
29