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DETERMINACIÓN DE COLIFORMES FECALES POR de una pinza esterilizada a la placa de Petri que
EL MÉTODO DE LA MEMBRANA DE FILTRACIÓN.
contiene el Agar (m-FC), procurando que no
Materiales:
quede burbujas de aire entre la membrana y el
Etanol al 95 %.
medio de cultivo ya que en tal superficie no
1 Pinza esterilizada. ocurriría el crecimiento de los coliformes
fecales.
1 Mechero bunsen.
8) La placa se invierte y se incuba a 37°C por 24
1 Membrana de filtro. horas.
Equipos:
Sistema de filtración esterilizado. RESULTADOS:
Bomba de vacío.
Previamente
Incubadora. Como el área de la membrana es relativamente
reducida, la misma solo puede soportar el
PROCEDIMIENTO
crecimiento de un número limitado de colonias.
1) Esterilizamos las pinzas por la técnica del
El número óptimo que se estimo fue entre 20
flameado.
y 80 colonias, con un máximo de 200.
2) Extraimos la membrana de 47 mm de diámetro,
con tamaño de diámetro nominal de poro de
0.45 μm (Milipore Mixed Cellulose Ester, Fisher
Scientific). de su envoltura usando la pinza
esterilizada colocándola sobre el centro del
portafitro.
3) Vertimos 100 mL de la muestra de agua, en la
porta filtro.
4) Conectamos la bomba de vacío para permitir
que el agua pase por la membrana de filtración
de manera que los microorganismos presentes
en el agua se queden retenidos en la
membrana de filtración.
5) Esperamos que toda el agua se filtre y luego Figura 1
Lavamos el embudo con aproximadamente 100 Fig1: Colonias azul grisáseo, típicas de
coliformes fecales de muestras de agua de río
mL de agua peptonada al 0,1%.
(primera muestra), recuperadas en filtro de
celulosa e incubadas en agar m FC a 45.5 °C
por 24 h. La flecha indica la amplificación de
6) Esperamos a que la membrana de filtro este
una colonia típica.
completamente seca.
RESULTADOS DEL MUESTREO:
Figura 2
PRIMERA MUESTRA
Coliformes fecales/100 ml=
(192)/100*100=192(UFC)
CONCLUSIONES: