PROGRAMA

IDeA

I CONCURSO
CIENCIA
APLICA
DA

FONDEF 2012

VERSIÓN OFICIAL
ÚNICA AÑO
2012​.
FORMULARIO DE
PRESENTA
CIÓN

"Título del
Proyecto:
__________
__________
__________
__________
_________".

2.
Form
ulació
n
Cientí
fica
Tecno
lógica
2.5
Metodol
ogías
de
investig
ación y
 desarrol
lo

OBSERVACION:
El límite
máximo
de este
document
o es de 6
páginas,
aparte de
la
portada.

<​Elimine las
instrucci
ones que
están en
color
azul​>
 2.5 METODOLOGÍAS DE INVESTIGACIÓN Y DESARROLLO
Las metodologías de investigación y desarrollo deben corresponder a la naturaleza propia de un
proyecto de investigación científica tecnológica y deben tener todos los componentes
apropiados para la comprobación de la hipótesis y el logro del resultado.

Indique el diseño experimental y/o metodología a aplicar.

Incluya diagramas, dibujos, esquemas u otro que ayuden a una mayor comprensión de la
metodología propuesta.

Recordamos que para aquellos proyectos que involucren investigación en seres humanos,
animales, sitios arqueológicos, áreas silvestres protegidas, especies protegidas, internación de
especies, animales o fúngicas (terrestres, marinas o dulceacuícolas) u otro organismo, o que
utilicen o produzcan material que represente riesgo en bioseguridad, deberán anexar la
documentación indicada en el punto II.2 de las bases.
Estimulacion in vitro de muestras de sangre con antígenos de anestésicos generales, inmovilizados
en superficie sólida, permiten la detección y semi-cuantificación de reacciones de anafilaxis
mediante anticuerpos en fase sólida anti IgE, anti histamina y anti creatina fosfoquinasa (CPK)

Objetivo general
Detectar y semi-cuantificar IgE, histamina y CPK (creatinina fosfoquinasa) post- estimulación in
vitro en muestras de sangre de pacientes en etapa pre-operatoria a los que se les administrarán
anestesicos generales.

objetivos específicos:
1.​Crear un kit de detección de IgE, histamina y CPK (creatinina fosfoquinasa) en sangre mediantes
la exposicion in vitro a anestésicos generales.
2.Validar el kit anterior con muestras de pacientes obtenidas en centros de salud chilenos

Metodología:

1. diseño de recipientes para realizar la exposición de la sangre previamente obtenida del

paciente perioperatorio y el alérgeno. Como alergenos se utilizaran los compuestos por separados
de la anestesia general:
NMBAs(​Neuromuscular blocking agents​)
Succinylcholine
Decamethonium
Benzylisoquinolinium
(Alcuronium, Atracurium, Cis-atracurium, D-Tubocurarine, Gallumine, Miracurium) Aminosteroids
(Pancuronium, Rocuronium, Vecuronium)
LÁTEX
ANTIBIÓTICOS: (Penicillines, Cephalosporins)
Hipnoticos como el propofol, el oxido nitroso y halotanos
Anestesicos Locales como la lidocaína
Opioides como la morfina y sus derivados.

2. selección y diseño de tira reactiva (plástico o papel). Comprobar cual material aporta mejor
absorción para realizar la reacción inmunocolorimetrica que permita identificar IgE, histamina
y CPK. Debemos considerar para la selección y el diseño,el material debe ser capaz de realizar
al menos 10 mediciones, para poder discriminar entre los distintos compuestos que
componen la anestesia general.

.
3. diseño de reacciones quimicas e inmunometrica que nos permitan detectar IgE, histamina y CPK
que nos otorguen un cambio de color en las tiras de manera casi inmediata, la histamina se
degrada por lo general en menos de una hora por enzimas como la DAO. por lo tanto nuestro
kits debe arrojar resultados entre 15 y 30 minutos despues de haber expuesto la sangre a la
tira.
Las reacciones quimicas que se utilizaran serán específicas para cada marcador de reacción
anafilactica y anafilactoide, mencionados en el punto 2, para la detección se utilizara la
cantidad minima de anticuerpo fijada a la tiray a cada anticuerpo estara acoplada a una
enzima que pueda provocar un compuesto que sea colorimetrico.
4. Pruebas de sensibilidad de las tiras reactivas utilizando personas no alergicas a los anéstesicos(
previamente identificadas con mediciones in vitro tradicionales) y personas alérgicas a
anestésico general y latex.
10 personas seran utilizadas como control. para dicho propósito se escogeran personas sanas
que mediante un cuestionario tipo que se realiza en todos los centros hospitalarios para
evaluar la posibilidad a la anestesia
5.