You are on page 1of 6

www.ijep.

org                                                      International Journal of Energy and Power (IJEP) Volume 2 Issue 4, November 2013 

Dilute Acid Hydrolysis of Parthenium 
Hysterophorus L. for the Production of 
Ethanol Using Pichia Stipitis 
Preeti Singh1, Shouvik Saha1, Shubhaneel Neogi1, Swati Ghosh2, Amit Ganguly1, Subhamay Haldar3 and 
Pradip Kumar Chatterjee1* 
1 Thermal Engineering Division, CSIR Central Mechanical Engineering Research Institute, Durgapur – 713209, 
India.  
2 Department of Chemistry, Institute of Engineering and Industrial Technology, Durgapur – 713212, India.  

3Department of Chemical Engineering, National Institute of Technology, Durgapur – 713209, India. 

* Corresponding author, Tel No 91‐343‐6510236, Fax No 91‐343‐2547375, Email: pradipcmeri@gmail.com 
 
Abstract  25% [Hinman N.D. et al, 1989]. 
Due  to  the  present  scenario  of  depletion  of  fossil  fuels,  a  Ethanol  has  been  used  as  fuel  in  the  United  States 
promising  alternative;  the  production  of  bioethanol  from  since  at  least  1908.  Although  early  efforts  to  sustain  a 
renewable  source  that  is lignocellulosic  biomass;  Parthenium 
U.S.  ethanol  program  failed,  oil  supply  disruptions  in 
hysterophorus  L  raises  a  substitute  of  petroleum.  Parthenium 
the  Middle  East  and  environmental  concerns  over  the 
hysterophorus  L.  has  been  defined  as  pioneer  for 
consideration  of  this  biomass  to  be  assessed  as  its  high 
use  of  lead  as  a  gasoline  octane  booster  renewed 
regeneration capacity, production of huge amounts of seeds,  interest in ethanol in the late 1970s. Ethanol production 
high seed germinabilty & extreme adaptability to wide range  in  the  United  States  grew  from  175  million  gallons  in 
of  ecosystems.  Dilute  acid  hydrolysis  of  the  biomass  1980  to  1.4  billion  gallons  in  1998,  with  support  from 
cooperate  an  important  role  in  pentose  as  well  as  hexose  Federal  and  State  ethanol  tax  subsidies  and  the 
sugar  yield.  Pretreatment  process  revealed  the  presence  of  mandated use of high‐oxygen gasoline. The transfer of 
61.7 mg/g of xylose and 115.5 mg/g of total reducing sugars.  crude oil‐based refinery to biomass‐based bio refinery 
Among the xylose fermenting yeast Pichia stipitis has shown  has attracted strong scientific interest with focus on the 
promising  capability  for  industrial  use,  as  it  is  able  to 
development  of  cellulosic  ethanol  as  an  alternative 
ferment xylose rapidly with a high ethanol yield (26.19 mg/g) 
transportation fuel to petroleum fuels. The production 
by utilizing 84% available hexose sugars and 53% of xylose.  
of  fuel  ethanol  from  biomass  involves  pretreatment, 
Keywords  hydrolysis,  fermentation,  and  distillation.  The 
Parthenium; Lignocellulosic; Biomass; Xylose; Pichia Stipitis; Cell  hydrolysate  resulting  from  the  pretreatment  and  the 
Optical Density; Ethanol.  hydrolysis,  contain  varying  amounts  of 
monosaccharides,  both  pentoses  and  hexoses,  and  a 
Introduction broad range of substances either derived from the raw 
material  or  resulting  as  reaction  products  from  sugar 
Global  depletion  of  energy  supply  due  to  the 
and lignin degradation. Many of these substances may 
continuing  over‐utilization  of  petro‐resources  is  a 
have  an  inhibitory  effect  on  the  micro‐organisms  in 
major  problem  of  the  present  and  future  world 
subsequent fermentation steps [Nigam J.N. et al, 2002]. 
community. It is estimated that the fossil fuels will be 
running  out  in  the  next  few  decades  [Bentley  RW.,  The  fermenting  microorganisms  must  be  able  to 
2002], therefore, attention has currently been dedicated  ferment  all  monosaccharaides  present  and  must  have 
to  the  conversion  of  biomass  into  fuel  ethanol.  Over  tolerance against potential inhibitors produced during 
several  supplementary  resources,  lignocellulose  is  pre‐hydrolysis  steps.  From  the  yore  of  fermentation 
considered  as  the  most  promising  raw  material  for  history,  Saccharomyces  cerevisiae  is  most  commonly 
production  of  green  fuel,  ethanol,  because  of  its  used  as  ethanol  producer.  S.  cerevisiae  is  unable  to 
availability in large quantities and low cost [Lynd L.R.,  ferment pentoses, which comprise upto 40% of the raw 
1989].  The  efficient  utilization  of  hemicellulose  biomass.  Among  the  xylose  fermenting  yeast  Pichia 
components  of  lignocellulosic  feedstock  offers  an  stipitis  has  shown  promising  capability  for  industrial 
opportunity  to  reduce  the  cost  of  fuel  production  by  use; because it is able to ferment xylose rapidly with a 

88         
International Journal of Energy and Power (IJEP) Volume 2 Issue 4, November 2013                                                      www.ijep.org 

high  ethanol  yield  and  comparatively  produces  less  al,  2013)  was  carried  out  at  121  ºC  treatment 
xylitol  [Dominguez  H.  et  al,  1993]  and  is  able  to  temperature  (Roberto  Inês  C.  et  al,  2003)  against  10% 
ferment  a  wider  range  of  sugars  than  even  Candida  loading  of  dilute  (5%)  H2SO4  (N.  Shubhaneel  et  al, 
shehatae [Preez Du. J.C. et al, 1986].  2013).  Since  the  chemical  composition  of  Parthenium 
Parthenium hysterophorus, the species of flowering plant  acid  hydrolysate  is  complex and could  be expected to 
of  Asteraceae  family,  i.e.,  native  to  the  American  contain  unknown,  potentially  toxic  elements, 
tropics,  is  also  known  as  congress  grass,  carrot  weed,  especially  presence  of  parthenin  toxin,  a  potential 
star  weed,  feverfew,  white  top,  chatak  chandni,  bitter  MAP  kinase  inhibitor  [Hwang  D.  Et  al,  1996].  This 
weed,  ramphool,  garghas  depending  on  the  country  study was conducted focusing on whether growth can 
and  area  infested.  This  weed  is  well  known  for  its  be  promoted  after  pre‐treatment  and  detoxification, 
allergic responses to human being, causing respiratory  using  sugar  content  of  Parthenium.  Detailed  studies 
problems,  contact  dermatitis,  mutagenicity  in  human  were  carried  out  to  establish  the  correlation  between 
&  livestock.  Biodiversity  is  greatly  altered,  and  crop  utilization  of  pentose  and  hexose  sugar  with  ethanol 
production  is  remarkably  reduced  by  its  allelopathic  production  and  these  factors  were  related  with  the 
properties,  characterized  by  the  presence  of  highly  growth of the microorganism. 
alkaline  toxin  perthenin  of  seqsuiterpene‐lactone 
group of compound [Singh H.P. et al, 2003].   Materials and Methods

Parthenium hysterophorus adapts to a wide range of soil  Preparation of Substrate 
types ranging from sandy to heavy clays but growth is 
In  this  novel  approach  to  utilize  a  toxic  weed  as 
better  in  moist  type  of  soil.    It  occurs  in  areas  with 
substrate  for  zero  cost  fuel,  the  fresh  plants  were 
summer  rainfall  greater  than  500  mm  per  annum. 
collected  from  local  areas  surrounding  CSIR‐CMERI 
Germination  favours  at  temperatures  between  10  ºC 
research laboratory abundant to perform this test. The 
and  25  ºC.  Parthenium  weed  colonises  new  areas 
fresh  green  healthy  plants  were  chopped  into  pieces 
rapidly by means of relatively high numbers of seeds, 
and  dried  in  a  hot  air  oven  at  106  ºC  for  6  hrs.  The 
producing one lakh seeds per plant. Dispersal of seed 
dried  mass  then  carefully  grounded  to  3‐5  mm  size 
takes  place  via  vehicle,  water,  animals,  farm 
approximately  and  stored  in  a  dry  airtight  container 
machinery  and  wind.  Disturbed  habitats  such  as 
for further work. 
roadsides  and  railway  tracks,  stockyards,  buildings 
surroundings  and  fallow  agricultural  land  are  Preparation of Hemicellulose Hydrolysate 
particularly suitable for growing P hysterophorus due to 
a  lack  of  interspecies  competition  [Eberts  T.  J.  et  al,  60 gm of dried Parthenium (0.95 mm) was mixed with 
1979].  600 ml. of 5% of concentrated H2SO4 in a conical flask. 
The acid hydrolysis reaction was catalysed at 121  ºC at 
Parthenium weed was first noted in India near Poona  15 lb pressure for 15 min of treatment time. After that, 
in  Maharashtra  State  in  1951.  By  1972  it  had  spread  the hydrolysate was cooled down to room temperature 
into the most of the western States from Kashmir in the  and carefully filtered aseptically using Whattman filter 
north  to  Kerala  in  the  south  and  is  now  spreaded  paper  no.1  to  remove  the  unhydrolysed  material  and 
almost  throughout  the  subcontinent  with  abnormal  solid  residues.  The  filtrate  was  collected  and  the  total 
density [Mahadevappa M., 2008].  content  of  xylose  and  total  reducing  sugar  was 
The  main  objective  of  this  work  is  to  apply  a  simple  estimated before fermentation.  
feasible  pre‐treatment  process  with  moist  heat  dilute 
Detoxification of Acid Hydrolysate 
acid  hydrolysis  for  the  conversion  of  dry  parthenium 
to  release  the  xylose  and  other  reducing  sugars;  also  The  detoxification  of  hemicellulose  acid  hydrolysate 
utilizing  this  sugar  hydrolysate  for  microbial  by  boiling  and  over  liming  to  pH  10  with  solid 
fermentation after detoxification. The Parthenium used  Ca(OH)2 and sulphite synergize better fermentibility of 
for  this  study  was  previously  estimated,  having  a  the  hydrolysate.  Boiling  assists  to  reduce  volatile 
composition  of  27%  cellulose,  21%  hemicellulose,  12‐ compounds,  such  as  furfural  and  phenols  and  over‐
15% lignin as determined in the laboratory. Estimation  liming  with  Ca(OH)2  remove  the  concentration  of 
of  xylose,  a  major  fermentable  pentose  sugar,  and  other acid compounds. Also increased pH to 10.0 helps 
other  reducing  sugars,  has  been  performed  by  precipitating heavy metals. The furfural is transformed 
spectrophotometer. The pre‐treatment process of dried  into  furfuryl  acid  and  condensed  with  other 
biomass having particle size 0.95 mm (Ghosh Swati et  components  of  pre‐hydrolysate  [Strickland.  R.J.  et  al, 

        89 
www.ijep.org                                                      International Journal of Energy and Power (IJEP) Volume 2 Issue 4, November 2013 

1985].  Estimation of Total Reducing Sugar in the Biomass 

Preparation of Inoculum  The  reducing  sugars  were  estimated  by 


spectrophotometry  using  3,5‐Dinitrosalicylic  acid 
200  ml  media  (D‐xylose–50  gm,  Glucose–5  gm,  Yeast  reagent  (Dinitrosalicylic  acid‐10.6  gm,  Rochelle  salt  –
extract–3  gm,  Malt  extract–3  gm,  Peptone–5  gm,  pH‐ 306 gm, Phenol‐7.6 ml, Sodium Metabisulphate‐8.3 gm 
5.0) inoculated with Pichia from freshly cultured plate  and  NaOH‐19.8  gm  in  1416  ml  distilled  water)  as  per 
and  kept  in  shaking  incubator  at  120  rpm  at  30  ºC  for  Miller(1959)  and  Onsori  et  al  (2005)  using  glucose  as 
18 hrs. After that, the media was centrifuged at 10,000  standard.  The  standard  graph  was  prepared  using 
rpm for 10 mins and pellets were collected.    stock  solution  of  glucose  with  concentration  of  10 
mg/ml. 
Preparation of Hydrolysate for Fermentation 
300  ul  of  DNS  reagent  and  200  μl  of  sample  were 
After  neutralization,  micro  nutrients  (NH4CL‐0.5  gm; 
added  and  reaction  mixture  was  incubated  in  a  hot 
KH2PO4–2 gm; MgSO4, 7H2O‐0.5 gm; CaCl2, 2H2O‐ 0.1 
water bath for 5 min for colour development. The final 
gm;  FeCl3,  2H2O‐0.01  gm;  ZnSO4,  7H2O‐0.001  gm; 
colour  change  occurred  from  yellow  to  dark  red.  The 
Yeast extract‐1.5 gm in 1 L distilled water) were mixed 
test tubes were then cooled down to room temperature 
with  the  fermentation  medium.  Centrifuged  pellets  and diluted by adding distilled water. The absorbance 
were  inoculated  in  this  medium  and  incubated  at  120  was taken at 540 nm against standard graph. 
rpm at 30 ºC in shaking incubator. 
Estimation of Ethanol 
Estimation of Xylose in the Biomass 
Ethanol  estimation  was  done  spectrophotometrically 
Among  pentose  in  biomass  xylose  is  the  major,  reacts 
by  potassium  dichromate  method.  3  mL  of  acid 
with  pholoroglucinol  in  acedic  medium  and  impart 
dichromate solution was added to 300 μL of sample in 
purple blue colored xylose‐pholoroglucinol complex, a 
highly photosensitive compound. The amount of total  a  test  tube.  The  reaction  mixture  was  incubated  at 
available  xylose  can  be  estimated  by  plotting  the  room  temperature  for  30  min.  Absorbance  was 
differentiation  of  concentration  obtained  from  measured  at  590  nm  against  standard  graph 
spectroscopic analysis report at 554 nm [Eberts T. J. et  (concentration of ethanol 10 mg/ml). For reagent blank, 
al,  1979,  Johnson  S.  L.  et  al,  1984],  against  a  known  300 μL of distilled water was taken.  
standard concentration analysis report.  1) Chemicals and Reagents 
1) Chemicals and Reagents  2) Acid Dichromate Solution 
Estimation  of  xylose  by  pholoroglucinol  assay  7.5 gm of potassium dichromate was dissolved in 5 
requires followings –  M H2SO4 and final mixture volume was adjusted to 
2) d‐xylose Preparation  250 ml. 

0.05 gm of xylose was mixed with 10 ml of benzoic  3) Ethanol Stock Solution (10 mg/ml.) 
acid to make 10 g/L solution.  From  this  stock  solution,  a  series  of  standards 
3) Phologlucinol Solution  ranging  from  5  mg/ml  was  prepared  for  the 
standard graph. 
0.5  gm  of  pholoroglucinol  was  mixed  with  10:1 
ratio  of  acetic  acid  and  HCL  mixture  to  make  100  Fermentation 
ml pholoroglucinol solution. 
The  fermentation  was  carried  out  in  a  closed  glass 
4) Benzoic Acid Solution  vessel having Swan necked tapped outlet, to minimize 
aeration  effect  and  outside  contamination.  The  vessel 
100 ml of distilled water was heated at 60 ºC and 0.2 
containing  200  ml  of  detoxified  parthenium 
gm  of  benzoic  acid  was  mixed  thoroughly  then 
hydrolysate  was  inoculated  with  10  mg.  of  P.  stipitis 
cooled and filtered to store the solution. 
cell  mass  suspended  in  1  ml  of  distilled  water.  The 
200  μL  of  sample  was  mixed  with  5  mL  of  inoculum  (10  mg/ml)  was  optically  evaluated  at  600 
phloroglucinol  solution.  The  samples  were  heated  at  nm,  which  conferred  the  absorbance  of  3.15.  The 
100  ºC for 4 mins and cooled to room temperature. The  inoculated hydrolysate was taken to shaking incubator 
samples were then measured for available xylose with  at 30±0.2  ºC in pH 6.0±0.2 for 30 consecutive hours. In 
spectrophotometer at 554 nm.  every  3  hrs  interval,  5  ml  sample  was  taken  out 

90         
International Journal of Energy and Power (IJEP) Volume 2 Issue 4, November 2013                                                      www.ijep.org 

through Swan necked outlet by aseptically opening the 
outlet  tap.  The  collected  sample  was  further 
investigated  for  available  free  xylose,  total  reducing 
sugar,  ethanol  and  cell  optical  density  (OD)  changes 
with time and nutrients. 

Results and Discussion


Utilization  of  Parthenium  biomass  for  ethanol 
production  was  rarely  evaluated  before  because  of  its 
severe  toxicity,  due  to  the  presence  of  parthenolide 
compounds,  a  potential  MAP  kinase  inhibitor,  and   
resist microbial growth. The purpose of this continuing  FIG 1: CELL GROWTH PATTERN ANALYSIS 

research is to evaluate the potentiality and probability 
to utilize this high growth rate having toxic weed, as a 
promising  resource  of  zero  cost  second  generation 
environment friendly fuel. 
The  bio‐chemical  conversion  of  hemicellulose  to 
pentose  and  hexose  monomers  was  successfully 
achieved by moist heat acid hydrolysis at approx. 15 lb 
pressure for 15 min treatment time. Auto hydrolysis of 
Parthenium  by  dilute  acid  yielded  mixture  of  sugars   
with  xylose  as  a  major  component  and  other  hexose  FIG 2: CHANGES IN CELL CONCENTRATION IN RESPECT TO 
sugars like glucose, galactose, mannose etc. The above  ETHANOL PRODUCTION 
depicted pretreatment process revealed the presence of 
From  comparative  study  of  changes  in  cell 
61.7  mg/g  of  xylose  and  115.5  mg/g  of  total  reducing  concentration  with  ethanol  production,  it  was 
sugars.  observed  that  hexose  mediated  log  phase  was 
The fermentation process involves utilization of sugar  continued  upto  9  hrs  and  reached  stationary  phase 
by microorganisms and production of ethanol as a by‐ where  17.23  mg/g  ethanol  was  obtained.  After 
product.  Ethanol  also  has  cytotoxicity  towards  maximum  hexose  was  utilized  by  microbes  when  the 
microorganism. So in batch culture system, the overall  Sugar  availability  became  stressed  out  for  growth, 
Pichia started to utilize pentose sugars and growth was 
production  depends  on  available  sugars,  physical 
maximized  upto  18  hrs  before  reaching  stationary 
growth factors, ethanol tolerance of the microorganism 
phase,  where  maximum  production  of  Ethanol  was 
etc.  Pichia  stipitis  is  able  to  utilize  both  hexose  & 
obtained at 24 hrs, 26.19 mg/g after which cytotoxicity 
pentose sugars. 
by  secondary  metabolic  compounds  and  limiting 
In  order  to  establish  the  relationship  between  nutrient  source  catalysed  degradation  in  total  cell 
utilization  of  hexose  &  pentose,  the  microbial  growth  density and diminished ethanol production. 
pattern  was  closely  observed  via  optical  density 
measurement of the inoculum containing hydrolysate. 
After  inoculation  of  P.  stipitis  into  optimized 
hydrolysate,  maximum  hexose  was  utilized  within  9 
hrs and the culture system initially reached stationary 
phase  for  hexose.  Completing  12  hrs,  Pichia  stipitis 
started utilizing pentose in order to survive and render 
further growth via pentose phosphate pathway. 
Production  From  growth  curve,  it  was  observed  that 
maximum  growth  was  attended  at  18  hrs  utilizing 
xylose  while  maximum  secondary  metabolite,  ethanol   
was  engendered  at  24  hrs,  and  the  culture  became 
FIG 3: SUGAR UTILIZATION IN RESPECT TO ETHANOL 
subsequently decelerated.  PRODUCTION AND CELL GROWTH. 

        91 
www.ijep.org                                                      International Journal of Energy and Power (IJEP) Volume 2 Issue 4, November 2013 

Fig 3 elaborates total percentage of hexose and pentose  1440‐1443. 
reduction  to  support  fungal  cell  growth  and  ethanol 
Ghosh,  Swati,  Das,  Kuntala,  Sinha,  Sneha,  Das,  Subhabrata, 
production.  In  the  whole  tenure  of  fermentation 
Ganguly,  Amit,  Haldar,  Subhamay  and  Chatterjee, 
process, 84% of total hexose was utilized; out of which 
51% was utilized within 12 hrs. There was 53% of total  Pradip  Kumar  “Effect  of  Particle  Size  on  the  Hydrolysis 
pentose  sugar  utilisation  by  the  microbes  before  the  of  Parthenium Hysterophorus L. for  the  Production  of 
growth  inhibition  due  to  media  toxicity  &  other  Ethanol”  International  Journal  of  energy  and  Power  2(1) 
physical factors.  (February 2013): 26‐32. 

Conclusion Hinman, N.D., Wright, J.D., Hougland, W. and Wyman, C.E. 
“Xylose  fermentation,  an  economic  analysis.  Appl. 
Conventional  fuels  are  depleting  unprecedentedly  by 
profuse  consumption  in  human  civilization  since  few  Biochem.” Biotechnol. 20/21 (1989): 391‐401. 
decades. On the other hand, perpetuating depletion of  Hwang,  D,  Fischer,  N.H.,  Jang,  B.C.,  Tak,  H.,  Kim,  J.K.  and 
forestry  and  exponential  increase  of  pollutions  have  Lee,  W.  “Inhibition  of  the  expression  of  inducible 
astronomical  effects  on  global  warming.  These  factors 
cyclooxygenase  and  proinflammatory  cytokines  by 
necessitate  us  to  find  some  effective  alternative  to 
sesquiterpene  lactones  in  macrophages  correlates  with 
conventional  fuels.  Biofuel  plays  a  crucial  role  as 
alternative source of conventional fuel in ameliorating  the  inhibition  of  MAP  kinases.”  Biochem  Biophys  Res 
the  conundrums  of  global  warming.  Parthenium  Commun. 226 (1996): 810‐8. 
hysterophorus, a toxic weed with excessive growth rate  Johnson,  S.L.,  Bliss,  M.,  Mayersohn  and  Conrad,  K.A. 
and  high  adaptability  toward  environmental  stresses, 
“Phloroglucinol‐based  colorimetry  of  xylose  in  plasma 
is  a  shining  option  for  zero  cost  fuel.  The  maximum 
and urine compared with a specific gas‐chromatographic 
value  of  ethanol  yield  was  26.19  mg/g  of  biomass  by 
utilizing 84% available hexose sugar and 53% of xylose.  procedure.” Clin Chem. 30 (1984): 1571‐1574. 
Fermentation was carried out at a pH of 5.6 and 30 ºC  Lynd,  L.  R.  “Production  of  ethanol  from  lignocellulosic 
temperatures  to  minimize  generation  of  toxic  materials  using  thermophilic  bacteria:  critical  evaluation 
components.  This  preliminary  work  on  use  of 
of potential and review.” Adv. Biochem. Eng./ Biotechnol. 
Parthenium  hysterophorus  L.  will  definite  pioneer  for 
consideration  of  this  biomass  to  be  assessed  as  high  38 (1989): 1‐52.  
valued  resource.  There  is  also  research  possibility  on  Mahadevappa,  M.  “Parthenium  –  A  Dreaded  Weed 
different  optimization  parameter  to  make  this  process  International  Parthenium  research  News.”  1(1)  (June  1, 
industrially viable.  2008). 
Nigam,  J.  N.  “Bioconversion  of  water‐hyacinth 
ACKNOWLEDGMENT
(Eichhorniacrassipes)  hemicellulose  acid  hydrolysate  to 
The  authors  are  grateful  to  Director,  CSIR‐Central 
motor  fuel  ethanol  by  xylose‐fermenting  yeast.”  J. 
Mechanical  Engineering  Research  Institute,  Durgapur 
for  constant  support,  encouragement  and  permission  Biotechnol. 97 (2002): 107–116. 
to publish this paper.  N.,  Shubhaneel,  Ghosh,  Swati,  Haldar,  S,  Ganguly,  A  and 
Chatterjee,  P.  K.  “Acid  catalyzed  auto‐hydrolysis  of 
REFERENCES 
Parthenium hysterophorus L. for production of xylose for 
Bentley,  R.W.  “Global  oil  and  gas  depletion:  an  overview.”   lignocellulosic  ethanol.”  International  Journal  of 
energy policy 30 (2002):189‐205.  Emerging  Technology  and  Advanced  Engineering  2(3) 
Dominguez,  H.,  Nunez,  M.J.,  Chamy,  R.  and  Lema,  J.  (Feb 2013): 167‐172. 
“Determination  of  kinetic  parameters  of  fermentation  Preez  Du,  J.C.,  Bosch,  M.  and  Prior,  B.A.  “The  fermentation 
processes  by  a  continuous  unsteady  statemethod;  of  hexose  and  pentose  sugars  by  Candida  shehatae  and 
application  to  the  alcoholic  fermentation  of  D‐xylose  by  Pichia stipitis.” Appl. Microbiol. Biotecnol. 23 (1986), 228–
Pichia Stipitis.” Biotechnol. Bioeng. 41 (1993): 1129‐1132.  233. 
Eberts,  T.J.,  Sample,  R.H.,  Glick,  M.R.  and  Ellis,  G.H.  “A  Roberto,  Inês  C.,  Mussatto,  Solange  I.  and  Rodrigues,  Rita 
simplified colorimetric micromethod for xylose in serum  C.L.B. “Dilute‐acid hydrolysis for optimization of xylose 
or  urine,  with  phloroglucinol.”  Clin  Chem.  25  (1979):  recovery  from  rice  straw  in  a  semi‐pilot  reactor” 

92         
International Journal of Energy and Power (IJEP) Volume 2 Issue 4, November 2013                                                      www.ijep.org 

biochemical analysis and microbiology.


Industrial Crops and Products 17 (2003): 171‐176. 
Author 4: Prof. Swati Ghosh, B.Sc.
Singh,  H.  P.,  Batish,  D.  R.,  Pandher,  J.  K.  and  Kohli,  R.  K. 
(Chemistry), B.Tech. (Chemical Engineering),
“Assessment  of  allelopathic    properties    of    Parthenium  M.Tech (Chemical Engineerin): She is the
Asst Proffessor of Department of Chemistry,
hysterophorus    residues.”    Agric.  Ecosy.  Environ,  95 
Institute of Engineering and Industrial
(2003): 537‐541.  Technology, Durgapur, India. Her special
interest is on the biochemical reactions that
Strickland,  R.  J  and  Beck,  M.  J.  “Effective  pretreatment 
takes place during lignocellulosic conversion
alternatives  for  the  production  of  ethanol  from 
Author 5: Mr. Amit ganguly, M.Sc.
hemicellulose  hardwood  hydrolysate.”  9th  symp.  On  (Horticulture): He is the Senior Scientist &
Energy from Biomass and Woodwastes. Lake Buena vista,  Head of Horticulture Department, CSIR
Central Mechanical Engineering Research
FL, January 28 ‐ February 1, 1985.  Institute, Dugapur, India. He works in the
field of conversion of lignocellulose to
Author 1: Ms. Preeti Singh, B.Sc. (Hons.) ethanol.
Microbiology, M.Sc. (Hons.) Microbiology.
She is a research intern in CSIR-Central Author 6: Prof. Subhamay Haldar, B.Tech.
Mechanical Engineering Research Institute. (Chemical Engineering), M.Tech. (Chemical
She works in the field of microbiology and Engineering), Ph.D. (Chemical Engineering):
fermentation technology. He is the Professor, Department of Chemical
Engineering, National Institute of
Author 2: Mr. Shouvik Saha, B.Sc. (Hons.) Technology, Durgapur,, India. His area of
Biotechnology, M.Sc. Biotechnology. He is a research is heat and mass transfer with a
research intern in CSIR-Central Mechanical special application area of fluidized bed
Engineering Research Institute. He works in system.
the field of fermentation technology,
microbiology and molecular biology. Author 7: Dr. Pradip Kumar Chatterjee, B.
Tech. (Mechanical Engineering), Ph.D.
(Mechanical Engineering): He is the Chief
Author 3: Mr. Shubhaneel Neogi, B.Sc. scientist & Head of Thermal engineering
(Hons.) Microbiology, M.Sc. Microbiology. He department, CSIR Central Mechanical
is a research intern in CSIR-Central Engineering Reserch Institue, Durgapur,
Mechanical Engineering Research Institute. He India. His research interest is on flow and
works in the field of fermentation technology, thermal engineering field.

        93 

You might also like