RECUENTO TOTAL DE BACTERIAS AERÓBICAS MESÓFILAS VIABLES

I. INTRODUCCION
Las bacterias aeróbicas mesófilas constituyen un grupo de microorganismos capaces de crecer en un
rango de temperatura de 30 a 37 °C.

La cuantificación de microorganismos por contaje de colonia, ha sido ampliamente utilizada para

determinar poblaciones microbianas viables en os alimentos, este procedimiento está basado en la
presunción de que cada célula microbiana es una muestra formara a simple vista, con colinas separadas
cuando son mezcladas con el agar u otro medio solido permita su crecimiento.

II. OBJETIVO

 Conocer el método para determinar el número de bacterias aeróbicas mesófilas viables.

 Determinar la presencia y cantidad de bacterias aeróbicas mesofilas viables en el material
analizado.

III.FUNDAMENTO TEÓRICO
La aceptabilidad de un proceso es frecuentemente el aspecto más difícil del análisis de alimentos. Los
análisis microbiológicos de los alimentos son una herramienta eficaz en esta evaluación, pero la
interpretación de los resultados de laboratorio obtenidos en microbiología es, frecuentemente, el más
difícil y complejo aspecto de todo el proceso de evaluación, donde entran en juego el criterio profesional
y las circunstancias que rodean al hecho (brote, control de rutina, toma de muestra en línea de proceso
o en punto de venta, producto listo para consumo, etc.)

El método de contaje de colonias provee una estimulación el número de microorganismos viables en

una muestra de acuerdo al medio empleado y el tiempo y la temperatura de incubación.

Las células microbianas a menudo se encuentras como conjunto o grupos de células, por tanto, la
muestra y las diluciones homogeneizadas pueden uniformemente distribuir los conjuntos de bacterias,
ya que estos grupos no pueden ser disgregados completamente por ellos mismos.

El mezclado y la disolución inicial en un bleder mecánico puede proveer mayo rotura a estos productos.
De todos modos, esto nos asegura que los microorganismos puedan estar bien distribuidos como
células libres.

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Consecuentemente, cada colina aparece en el Agar Plate puede aparecer como grupos de células y
deben ser referidos como unidades formadas de colonias (UFC).

APLICACIÓN

El método puede ser utilizado para cualquier tipo de muestra, con excepción de ciertos productos,
donde intervenga el proceso de fermentación, tales como ciertos quesos y embutidos, yogurt o de
maduración natural, ya que estos dan cifras muy elevadas de bacterias. También se puede utilizar para
medio ambiente, utensilios, etc.

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IV. EQUIPOS Y MATERIALES

1. Los requisitos necesarios para la dilución de las muestras de alimentos

2. Placas Petri
3. Pipetas bacteriológicas de 1 y 10 ml
4. Baño de agua regulado a 44-45 °C para mantener elagar licuado
5. Baño de agua regulado a 29-31 °C
6. Contados de colonias
7. Agar plate count

V. PROCEDIMIENTO

Para trabajar una muestra liquida, es necesario tener una referencia aproximada de carga
microbiana de esta, esto nos permitirá decidir si es necesario o no y hasta donde hacer
diluciones de la muestra o trabajar con ella directamente. El procedimiento a seguir será lo
siguiente:
 Hacer diluciones seriadas hasta un límite adecuado. Las diluciones son logarítmicas.
 De las diluciones apropiadas trabajar 3 de ellas, ejem 10-3,10-4 y 10-5 sembrar por
duplicado una alícuota de la disolución(1ml) en una placa Petri estéril

 Verter sobre la muestra medio de cultivo fundido a 45°c y hacer la rotación necesaria
(véase métodos de siembra placa vertida
 Una alternativa al paso anterior es colocar 0.1ml de la dilución en una placa con medio
de cultivo distribuyendo uniformemente en la superficie con la ayuda en un asa de
Digralsky
 Incubar las placas sembradas, por 24 horas, a la temperatura requerida.
 Pasadas las 24 hora se procede a hacer el recuento de las colonias que han desarrollado
en el medio de cultivo; esto puede hacerse directamente o con la ayuda de un cuenta
colonias. Debe tenerse en cuenta que el recuento se hace en aquellas placas que tienen
de 30 a 300 colonias para el caso de bacterias y entre 20 a 200 para el caso de hongo
s y levaduras
 Los resultados se expresan en unidades formadoras de colonias por mililitro (UFC/ml)
según la siguiente formula.

𝑛𝑢𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎𝑠
UFC/ml = 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑡𝑟𝑎𝑏𝑎𝑗𝑎𝑑𝑎 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑠𝑒𝑚𝑏𝑟𝑎𝑑𝑜

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VI. RESULTADOS
MESA N°1

- Dilución 10-5
- 20 colonias
- Conteo 2000000 = 20 x 105 UFC/gramo de suelo

MESA N°1

- Dilución 10-4
- 70 colonias
- Conteo 700000 = 70 x 104 UFC/gramo de suelo

MESA N°01

- Dilución 10-3
- 420 colonias
- Conteo 420000 = 420 x 103 UFC/gramo de suelo

MESA N°01

- Dilución 10-2
- 800 colonias
- Conteo 800000 = 800 x 103 UFC/gramo de suelo

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VII. CONCLUSIONES

 Para temer buenos resultado en la práctica a realizar se debe manejar con suma
precaución los materiales y diluciones a utilizar

 Para el conteo de microorganismos se debe realizar por la forma más adecuada.

VIII.BIBLIOGRAFIA

Pelczar, Michael J. (1982). Microbiology (2da edición). Mc Graw Hill.

Pommerville, Jeffrey C. (2010). Alcamo’s fundamentals of Microbiology (4ta edición).

Jones and Bartlett Publishers

http://www.unavarra.es/genmic/curso%20microbiologia%20general/12-
metodos%20de%20recuento.htm

https://es.scribd.com/document/265618598/RECUENTO-TOTAL-DE-BACTERIAS-
AEROBICAS-MESOFILAS-VIABLES

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