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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

INTRODUCCION.......................................................................................................................... 2
OBJETIVOS .................................................................................................................................. 3
MARCO TEORICO ....................................................................................................................... 4
MATERIALES Y EQUIPOS .......................................................................................................... 7
PROCEDIMIENTO ....................................................................................................................... 8
LECTURA DE PLACAS .............................................................................................................. 10
RESULTADOS ............................................................................................................................ 23
CONCLUSIONES ........................................................................................................................ 28
CUESTIONARIO......................................................................................................................... 29
BIBLIOGRAFIA .......................................................................................................................... 33

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

INTRODUCCION

Para demostrar la presencia de una bacteria patógena y lograr su completa


identificación es necesario en primer lugar obtener una muestra del paciente, del
área o medio contaminado. Sin embargo en pocos casos se obtendrá cultivos
bacterianos puros, ya que regularmente las bacterias existen en poblaciones mixtas.
Es necesario, entonces, obtener un cultivo puro. Se trata de separar una especie
bacteriana de todas las demás que comparten su hábitat para poder estudiar sus
características culturales, morfológicas y fisiológicas con lo cual lograr una
adecuada identificación. Uno de los métodos más importantes para la identificación
de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias
artificiales preparadas en el laboratorio. El Medio de Cultivo es el material
alimenticio en el que crecen los microorganismos. Al crecimiento de los
microorganismos se le denomina Cultivo. En distintos laboratorios de Microbiología
se ha preparado más de 2,000 medios de cultivo diferentes. Para que las bacterias
crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunirse varias
condiciones propicias, entre ellas: temperatura, humedad, presión de oxígeno y pH.
Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento
necesarios y debe estar exento de microorganismos contaminantes en todas sus
formas.

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OBJETIVOS

 Lograr que el participante sea capaz de cuidar y mantener sus cultivos puros.

 Realizar el sembrado de los microorganismos en total asepsia.

 Interpretar los resultados del análisis microbiológico de los alimentos.

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MARCO TEORICO

Sembrar: Es el acto de colocar el material bacteriológico en el medio de cultivo para


promover su crecimiento y desarrollo, y subsiguiente multiplicación.
El resultado de una siembra se llama: Cultivo
Las siembras pueden ser:
- Primarias: cuando el material es inoculado en los medios por primera vez
- Secundarias: cuando el material a inocular procede de una siembra primaria
Métodos Generales:
1) Siembra por estría por agotamiento: Con éste procedimiento se puede
conseguir una buena separación de las colonias y aislarlas fácilmente. Para ello se
funde el medio de cultivo, se vuelca en caja de Petri y se deja solidificar. Con el asa
previamente esterilizada se toma material de un cultivo heterogéneo y se descarga
sobre la superficie del medio formando estrías. Esto puede realizarse de varias
formas:
a- Al comienzo se coloca el inoculo, luego se continúa con las estrías. Cuando se
quiere obtener colonias muy separadas se puede utilizar dos o tres placas de Petri,
para lo cual se repite la operación sin tomar con el asa nuevo material.
b- Se puede dividir la placa de Petri en cuatro cuadrantes; una vez depositado el
material en el primero, siguiendo el sentido de las agujas del reloj, se hace una estría
luego en el segundo, tercero y cuarto cuadrante sin cargar nuevamente el asa; en el
último cuadrante aparecerán las colonias aisladas
c- El inóculo se extiende sobre una pequeña zona de la placa, próxima al borde, se
esteriliza el asa y se traza otra estría a partir del depósito y así sucesivamente.
Medio de cultivo: solido en placa de Petri
Instrumento. Asa
Finalidad. Obtener colonias aisladas

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2) Siembra por inmersión: se coloca el inóculo en una placa o caja de Petri y sobre
el mismo se vierte el medio de cultivo previamente fundido. Este método se utiliza
para microorganismos aerobios.

3) Siembra en doble capa: se procede de la misma manera que por inmersión. Una
vez solidificado el medio se vierte una cantidad extra de medio necesaria para cubrir
la capa anterior (generalmente 10 ml. aprox.). Este método se utiliza para
microorganismos anaerobios facultativos y microaerofílicos.
Para observar la flora bacteriana general de una muestra de cualquier sustancia se
utilizan medios no selectivos. Ni un medio cualquiera ni cualquier temperatura
pueden permitir el crecimiento de todos los posibles gérmenes. Son medios
recomendables el agar nutritivo, algún medio para organismos exigentes son o sin
adición de sangre, agar triptona glucosado, agar leche desnatada, agar rugosa.
Sembrar o inocular es introducir artificialmente un porción de muestra (inoculo) en
un medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo microbiano. Las siembras pueden
realizarse en medio líquido, solido, o semi sólido, utilizando punta, asa, hisopo o
pipeta estéril.
Toda siembra debe adaptarse a los siguientes principios generales:
Practicarla en medio de cultivo favorable y previamente esterilizado.
Emplear instrumentos asépticos.
No contaminar ni destruir el inoculo.
Depositarla asépticamente en los medios elegidos.
Esterilizar los instrumentos empleados antes y después de cada operación.
El inoculo es la carga de microorganismos presentes en un sitio y momento
determinado.
Mientras que el aislamiento, es separar un tipo de microrganismo a partir de una
población que les contiene de varios tipos. En hábitats naturales, raramente
encontramos a los microorganismos en cultivo puro (un solo tipo), por lo tanto es

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necesario hacer algún procedimiento de asilamiento para separar e identificar los


distintos tipos de microorganismos presentes.
Aislamiento de microorganismos en cultivo puro
Un cultivo puro es aquel formado por células provenientes de una sola inicial y por
tanto perteneciente a la misma cepa y especie. Es una situación artificial ya que en
la naturaleza los microorganismos se encuentran formando poblaciones mixtas y
heterogéneas. Es un artificio obligado para estudiar cada especie y cepa de
microrganismo en particular.
Aislamiento de microorganismos anaerobios
Para aislar microorganismos anaerobios que son rápidamente destruidos por
exposición al oxigeno las placas pueden ser preparadas en la forma usual, luego d
sembradas, incubadas en recipientes cerrados en la atmosfera sin oxígeno. También
se pueden sembrar dicluciones en tubos con agar fundido y termostatizado que
luego se tapan con una capa de vaselina – parafina, para evitar el acceso de aire.

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MATERIALES Y EQUIPOS

ASA DE PLACA
KOLLE PETRI

PIPETA BOTELLAS

MUESTRAS
MEDIOS DE
ANALIZAR:
CULTIVOS
MacConkey
PREPARAD
OS
Plate Count

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PROCEDIMIENTO

Técnica
-Aislamiento en Placas por Estrías
Se hacen diluciones del producto, por lo general es suficiente la emulsión general y un
dilución 1:10. Cuando se emplea éste método de agotamiento del asa, es útil disponer de dos
asas; una de ellas se enfría mientras se usa la otra. Existen distintas maneras, el objeto es
obtener colonias aisladas.
Técnica A:
Se pone un asa cargada de material sobre el medio, cerca del borde de la placa y se extiende
sobre un sector. Se flamea el asa se hace la extensión desde el área A sobre la zona B en
estrías paralelas, cuidando no dejar que se solapen las estrías. Se flamea el asa y se repite
en la zona C y así sucesivamente. Cada estriación con el asa diluye el inoculo. Las placas se
invierten y se incuban.

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El método moderno para la preparación de una placa estriada incluye la diseminación de


una sola asada de material con los microorganismos sobre la superficie de un medio con
agar que ya se ha solidificado. Las siguientes figuras son representativas de los métodos de
estriar que se utilizan para extender el inoculo inicial sobre la superficie del agar.
Aislamiento por dilución en medio solido
Se emplea tanto el método de siembra incorporada como el de siembra en superficie. Suele
ser necesario diluir la muestra. Para ello se puede preparar las diluciones decimales en
condiciones asépticas usando suero fisiológico o algún otro diluyente.
-Tecnica por masificación o siembra incoporada: Se coloca n mililitro de la muestra en una
placa esteril vacía, en el centro de la misma. Sobre ella se agrega 20 ml de medio de cultivo
fundido y termostatizado a 45°C, luego se agita la placa moviéndola cuatro veces en sentido
horario y cuatro en sentidoantihorario, una vez de arriba abajo y otra hacia los costados.
-Tecnica por extencion o en superficie: Se secan las placas de un medio adecuado. Se hacen
diluciones del material emulsionado. Se ponen unos 0.05-0.1 ml de dilución en el centro de
la placa y se extiende sobre el medio impulsado el extendedor hacia delante y atrás mientras
se hace girar la placa. Se vuelve a poner la tapa de la placa Petri y se deja secar 1 o 2 horas
antes de invertir la placa e incubar.

Aislamiento por Placa invertida


Utilizada para producir una distribución mejor de la carga microbiana.
 Se funden varios tubos que contengan 15 ml de medio.
 Se ponen enfriar en baño maria a 45 – 50°C.
 Se emulsiona el producto que se va a examinar en agua peptona al 0.1% y se
preparan diluciones al 1:10, 1:100 y 1:1000 en la misma solución.
 A 15 ml de medio fundido a 45°C se añade 1 ml de una de las diluciones y se vierte
en una placa Petri.
 Se hacen réplicas de placa vertida para cada dilución, para la incubación a
temperaturas adecuadas. Se deja solidificar el medio.
 Se invierte la placa y se incuba.

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LECTURA DE PLACAS
FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Semisólido
MUESTRA A ANALIZAR Agar MacConkey
PROCEDENCIA Peptona 10(-3)
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octubre, 16:00 h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de octubre
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 8:47am
ANALISTA MORAN FLORES HAROLD

PLACA CONTROL PLACA ANALIZADA


FORMA DE LA COLONIA SIN COLONIA
CIRCULAR X/IRREGULAR
PUNTIFORME
OTRO
SUPERFICIE SIN SUPERFICIE
LISO
RUGOSO X
HOMOGENEO
OTRO
ELEVACION SIN ELEVACION
PLANO
ELEVADO X/CONVEXA
OTRO
BORDES SIN BORDE
ONDULADOS X
DENTADOS
COLOR GUINDA
MATE
BRILLANTE X
OPACIDAD OPACO
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO X
MUCOSO
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR
ABUNDANTE X

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Semisólido
MUESTRA A ANALIZAR Agar MacConkey
PROCEDENCIA Peptona 10(-1)
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octubre, 16:00 h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de octubre
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 8:59am
ANALISTA TORRES MENDOZA ALONDRA

PLACA CONTROL PLACA ANALIZADA


FORMA DE LA COLONIA SIN COLONIA
CIRCULAR
PUNTIFORME X
OTRO
SUPERFICIE SIN SUPERFICIE
LISO X
RUGOSO
HOMOGENEO
OTRO
ELEVACION SIN ELEVACION
PLANO
ELEVADO X/CONVEXO
OTRO
BORDES SIN BORDE
ONDULADOS
DENTADOS
ENTERO X
COLOR GUINDA
MATE X
BRILLANTE
OPACIDAD OPACO
TRANSPARENTE X
OPACO
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO X
MUCOSO
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR
ABUNDANTE X

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Semisólido
MUESTRA A ANALIZAR Agar MacConkey
PROCEDENCIA Peptona 10(-3)
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octubre, 16:00 h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de octubre
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 9:08 am
ANALISTA ORIHUELA FABIAN ANGELES

PLACA CONTROL PLACA ANALIZADA


FORMA DE LA COLONIA SIN FORMA
CIRCULAR
PUNTIFORME X/ALARGADA
OTRO
SUPERFICIE SIN SUPERFICIE
LISO
RUGOSO X
HOMOGENEO
OTRO
ELEVACION SIN ELEVACION
PLANO
ELEVADO
OTRO UMBONADA
BORDES SIN BORDES
ONDULADOS X
DENTADOS
COLOR GUINDA
MATE X
BRILLANTE
OPACIDAD OPACO
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO
MUCOSO X
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR X
ABUNDANTE

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Semisólido
MUESTRA A ANALIZAR Agar MacConkey
PROCEDENCIA Peptona 10(-2)
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octubre, 16:00 h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de octubre
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 10:08 am
ANALISTA SAAVEDRA VARGAS JHON

PLACA CONTROL PLACA ANALIZADA


FORMA DE LA COLONIA SIN FORMA
CIRCULAR
PUNTIFORME X
OTRO
SUPERFICIE SIN SUPERFICIE
LISO
RUGOSO X
HOMOGENEO
OTRO
ELEVACION SIN ELEVACION
PLANO
ELEVADO X/CONVEXA
OTRO
BORDES SIN BORDE
ONDULADOS X
DENTADOS
COLOR SIN COLOR
MATE X
BRILLANTE
OPACIDAD OPACO
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO X
MUCOSO
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA X
REGULAR
ABUNDANTE

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Semisólido
MUESTRA A ANALIZAR Agar MacConkey
PROCEDENCIA Peptona 10(-1)
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octubre, 16:00 h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de octubre
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 10:38 am
ANALISTA TORRES ANTONIO JULIA

PLACA CONTROL PLACA ANALIZADA


FORMA DE LA COLONIA SIN COLONIA
CIRCULAR X
PUNTIFORME
OTRO
SUPERFICIE SIN SUPERFICIE
LISO X
RUGOSO
HOMOGENEO
OTRO
ELEVACION SIN ELEVACION
PLANO
ELEVADO X/CONVEXO
OTRO
BORDES SIN BORDES
ONDULADOS
DENTADOS

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

ENTERO X
COLOR GUINDA
MATE X
BRILLANTE
OPACIDAD OPACO
TRANSPARENTE X
OPACO
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO X
MUCOSO
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR
ABUNDANTE X

FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Semisólido
MUESTRA A ANALIZAR Agar MacConkey
PROCEDENCIA Peptona 10(-2)
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octubre, 16:00 h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de octubre
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 10:47 am
ANALISTA MORAN FLORES HAROLD

PLACA CONTROL PLACA ANALIZADA


FORMA DE LA COLONIA SIN FORMA
CIRCULAR X
PUNTIFORME
OTRO
SUPERFICIE SIN SUPERFICIE
LISO X
RUGOSO
HOMOGENEO
OTRO
ELEVACION SIN ELEVACION
PLANO
ELEVADO
OTRO UMBONADA
BORDES SIN BORDE
ONDULADOS
DENTADOS

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

ENTERO X
COLOR GUINDA
MATE X
BRILLANTE
OPACIDAD OPACO
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO
MUCOSO X
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR X
ABUNDANTE

FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Solido
MUESTRA A ANALIZAR Agar Plate Count (método 1)
PROCEDENCIA Peptona
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octube del 2016, 16:00h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de Octubre del 2016
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 11:15 am
ANALISTA

PLACA CONTROL PLACA ANALIZADA


FORMA DE LA COLONIA SIN FORMA
CIRCULAR
PUNTIFORME X
OTRO
SUPERFICIE SIN SUPERFICIE
LISO
RUGOSO X
HOMOGENEO
OTRO
ELEVACION SIN ELEVACION
PLANO X/APLANADO
ELEVADO
OTRO
BORDES SIN BORDE
ONDULADOS

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

DENTADOS
OTROS FESTONEADA
COLOR INCOLORO
MATE
BRILLANTE X
OPACIDAD TRANSPARENTE
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO
MUCOSO X
CONTAMINACION SIN CONTANIMACION
ESCASA
REGULAR X
ABUNDANTE

FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Solido
MUESTRA A ANALIZAR Agar Plate Count (método 1)
PROCEDENCIA Peptona
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octube del 2016, 16:00h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de Octubre del 2016
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 9:22 am
ANALISTA

PLACA CONTROL PLACA ANALIZADA


FORMA DE LA COLONIA SIN FORMA
CIRCULAR
PUNTIFORME X
OTRO
SUPERFICIE SIN SUPERFICIE
LISO
RUGOSO X
HOMOGENEO
OTRO
ELEVACION SIN ELEVACION
PLANO X/APLANADA
ELEVADO
OTRO
BORDES SIN BORDE

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

ONDULADOS
DENTADOS
OTROS FESTONEADA
COLOR INCOLORO
MATE
BRILLANTE X
OPACIDAD TRANSPARENTE
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO
MUCOSO X
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR X
ABUNDANTE

FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Solido
MUESTRA A ANALIZAR Agar Plate Count (método 1)
PROCEDENCIA Peptona
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octube del 2016, 16:00h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de Octubre del 2016
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 9:37 am
ANALISTA

PLACA CONTROL PLACA ANALIZADA


FORMA DE LA COLONIA SIN FORMA
CIRCULAR
PUNTIFORME X
OTRO
SUPERFICIE SIN SUPERFICIE
LISO
RUGOSO X
HOMOGENEO
OTRO
ELEVACION SIN ELEVACION
PLANO X/APLANADA
ELEVADO
OTRO

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

BORDES SIN BORDE


ONDULADOS
DENTADOS
OTROS FESTONEDADA
COLOR INCOLORO
MATE
BRILLANTE X
OPACIDAD TRANSPARENTE
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO X
MUCOSO
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR X
ABUNDANTE

FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Solido
MUESTRA A ANALIZAR Agar Plate Count (método 1)
PROCEDENCIA Peptona
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octube del 2016, 16:00h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de Octubre del 2016
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 9:55 am
ANALISTA

PLACA CONTROL PLACA ANALIZADA


FORMA DE LA COLONIA SIN FORMA
CIRCULAR
PUNTIFORME X
OTRO
SUPERFICIE SIN SUPERFICIE
LISO
RUGOSO X
HOMOGENEO
OTRO
ELEVACION SIN ELEVACION
PLANO X/APLANADA
ELEVADO

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

OTRO
BORDES SIN BORDE
ONDULADOS
DENTADOS
OTROS FESTOREADA
COLOR INCOLORO
MATE
BRILLANTE X
OPACIDAD TRANSPARENTE
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO X
MUCOSO
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA X
REGULAR
ABUNDANTE

FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Solido
MUESTRA A ANALIZAR Agar Plate Count (método 2)
PROCEDENCIA Peptona
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octube del 2016, 16:00h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de Octubre del 2016
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 10:15 am
ANALISTA

PLACA CONTROL PLACA ANALIZADA


FORMA DE LA COLONIA SIN FORMA
CIRCULAR
PUNTIFORME X
OTRO
SUPERFICIE SIN SUPERFICIE
LISO
RUGOSO X
HOMOGENEO
OTRO
ELEVACION SIN ELEVACION
PLANO X/APLANADA

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

ELEVADO
OTRO
BORDES SIN BORDE
ONDULADOS
DENTADOS
OTROS FESTONEADA
COLOR INCOLORO
MATE
BRILLANTE X
OPACIDAD TRANSPARENTE
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO X
MUCOSO
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR
ABUNDANTE X

FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Solido
MUESTRA A ANALIZAR Agar Plate Count (método 2)
PROCEDENCIA Peptona
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octube del 2016, 16:00h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de Octubre del 2016
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 10:27 am
ANALISTA

PLACA CONTROL PLACA ANALIZADA


FORMA DE LA COLONIA SIN FORMA
CIRCULAR
PUNTIFORME X
OTRO
SUPERFICIE SIN SUPERFICIE
LISO
RUGOSO X
HOMOGENEO
OTRO
ELEVACION SIN ELEVACION

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

PLANO X
ELEVADO
OTRO
BORDES SIN BORDE
ONDULADOS
DENTADOS
OTROS FESTONEADA
COLOR INCOLORO
MATE
BRILLANTE X
OPACIDAD TRANSPARENTE
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO X
MUCOSO
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR
ABUNDANTE X

FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Solido
MUESTRA A ANALIZAR Agar Plate Count (método 2)
PROCEDENCIA Peptona
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octube del 2016, 16:00h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de Octubre del 2016
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 10:34 am
ANALISTA

PLACA CONTROL PLACA ANALIZADA


FORMA DE LA COLONIA SIN FORMA
CIRCULAR X/IRREGULAR
PUNTIFORME
OTRO

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

SUPERFICIE SIN SUPERFICIE


LISO
RUGOSO X
HOMOGENEO
OTRO
ELEVACION SIN ELEVACION
PLANO X/APLANADA
ELEVADO
OTRO
BORDES SIN BORDE
ONDULADOS X
DENTADOS
COLOR
MATE INCOLORO X
BRILLANTE
OTROS
OPACIDAD TRANSPARENTE
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO X
MUCOSO
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR
ABUNDANTE X

RESULTADOS

FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO sOLIDO
MUESTRA A ANALIZAR Agar EMB
PROCEDENCIA Jugo de naranja (10 -1)
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 11 de noviembre del 2016, 16:00h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 16 de Noviembre del 2016
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 72h
FECHA DE LECTURA 1:34 am
ANALISTA Ángeles Orihuela Fabián

Cuadro 1

PLACA CONTROL PLACA ANALIZADA


FORMA DE LA COLONIA SIN FORMA
CIRCULAR
PUNTIFORME X

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

OTRO
SUPERFICIE SIN SUPERFICIE
LISO
RUGOSO X
HOMOGENEO
OTRO
ELEVACION SIN ELEVACION
PLANO
ELEVADO
OTRO
BORDES SIN BORDE
ONDULADOS X
DENTADOS
COLOR
MATE INCOLORO
BRILLANTE X
OTROS
OPACIDAD TRANSPARENTE
TRANSPARENTE X
OPACO
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO
MUCOSO X
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR X
ABUNDANTE

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

Presenta un el color verde


metálico esto se da por la
presencia de E. coli

Hay presencia de lactosa o


sacarosa positivas dan el color
violeta purpura negruzco y están
rodeados de un velo incoloro.
Descripción de la muestra (Ver
cuadro 1)

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Semisólido
MUESTRA A ANALIZAR Agar MacConkey
PROCEDENCIA Juego de maracuyá al ambiente (10-1)
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 11 de Noviembre, 16:00 h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 16 de Noviembre
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 72 h
FECHA DE LECTURA 1:30 pm
ANALISTA Ángeles Orihuela Fabián

Cuadro 21

PLACA CONTROL PLACA ANALIZADA


FORMA DE LA COLONIA SIN FORMA
CIRCULAR
PUNTIFORME X
OTRO
SUPERFICIE SIN SUPERFICIE
LISO
RUGOSO X
HOMOGENEO
OTRO
ELEVACION SIN ELEVACION
PLANO X
ELEVADO
OTRO
BORDES SIN BORDE
ONDULADOS X
DENTADOS
COLOR
MATE INCOLORO
BRILLANTE X
OTROS
OPACIDAD TRANSPARENTE
TRANSPARENTE X
OPACO
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO
NO MUCOSO X
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA X
REGULAR
ABUNDANTE

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

El color del agar permanecía rosado intenso,


dado que hubo una fermentación de lactosa,
por la fermentación hubo una presencia
escasa de E.coli (ver cuadro 2)

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

CONCLUSIONES
Agar EMB

Las muestras cambian de color de un purpura vino a un rojizo oscuro debido a la


fermentación de la lactosa o sacarosa otorgándoles un verde metálico debido a la presencia de
e.coli(colonias grandes , color purpura negruzco), el verde metálico es por la presencia de
estas. La eosina que es el indicar de pH, gracias a esta se puede observar la fermentación.

Agar MacConkey

Las muestras cambian de color al utilizar la lactosa, producen acidez lo cual baja el
pH bajo 6,8 lo que tiene como consecuencia la aparición de colonias de color
rosadas o rojas. El indicador que permite todo esto es rojo neutro

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PRACTICA N° 7 TECNICA DE CULTIVO EN PLACA

CUESTIONARIO
1. ¿Cuándo sería necesario utilizar técnicas asépticas para inocular un tubo
de medio líquido con polvo?
Se introduce el asa de siembra en el tubo con cultivo crecido y se toma un inoculo
que se lleva el tubo estéril con medio liquido (agitándola en el seno del medio),
para ello se debe evitar raspar las paredes del tubo, procurar que cada
instrumento este completamente estéril antes de usarlo.

2. Describa que es una cámara anaerobiosis

Un sistema anaerobio económico del ambiente con el bolsa de aire, un


espacio de trabajo de 17.6 cu.ft. y una incubadora de la capacidad de 300
placas permite que el BACTRON300 entregue productividad óptima en un
espacio compacto. El operador tiene comando total del área de trabajo, con
todo goza del espacio amplio del banco para el funcionamiento eficiente de
todos los procedimientos que requieren una atmósfera anaerobia.

Los sistemas de Bactron tienen construcción hermética del acero inoxidable


y de Plexiglás rígido para la visión y la integridad sin obstáculo. Los puntos
forman un sello cómodo alrededor de los brazos del operador permitiendo

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la manipulación pelada de la mano de placas y de especímenes dentro del


compartimiento de trabajo, fabricación del trabajo más cómodo y eficiente.
Además, todos los compartimientos de Bactron tienen nuestras puertas
ergonómicas nuevas del armport, que aseguran comodidad del usuario y
reducen al mínimo el fatiga del hombro.

Anónima SHELOLAB

http://www.directindustry.es/prod/sheldon/product-28333-844069.html

Por Quistián García Hylary


1) Asa en argolla o anillos, no calibrada.
Generalmente son de alambre de nichrome. Sirve para la siembra por
estrías e inoculaciones en general.

2) Asa recta o en hilo.


Sirve para trasladar una sola colonia a medios de identificación, o sub-
cultivo.

3) Asa de platino en anillo.


Calibrada para tomar 0.001 ml, para uro-cultivo.

4) Asa espatulada.
Para manipular colonias duras y tomar muestras.

5) Asa de alambre grueso en “L”


Para purificar colonias de hongos y procedimientos especiales.

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6) Aguja de disección con punta aguda.

Para purificar colonias pequeñas y distribuir las preparaciones de


hongos en fresco.

Quistián García Hylary Asas microbiológicas y su uso


http://microbiologia3bequipo5.blogspot.pe/2014/10/asas-microbiologicas-y-su-
uso.html

4) ¿Para qué sirven los indicadores de anaerobiosis? Mencione cada uno de


ellos.
Las bacterias anaeróbicas estrictas sólo pueden crecer si se les excluye el oxígeno
del medio, lo cual puede hacerse de varias maneras:
a) Utilizando agentes reductores en el medio para disminuir el contenido de
oxígeno. Ej. el tioglicolato de sodio
b) Por remoción mecánica de oxígeno y reemplazándolo por otro gas (nitrógeno)
c) Mediante reacción química, el oxígeno disponible se convierte en CO2, esto ocurre
si se enciende una vela dentro de un recipiente cerrado o utilizando jarras Gaspak®,
en esta última la reacción del bicarbonato de sodio y el borohidruro de sodio en
presencia de agua, produce la liberación de hidrógeno y CO2, ese hidrógeno liberado
se combina con el oxígeno atmosférico para formar agua en presencia de un
catalizador de paladio. Cuando se utiliza la jarra Gaspak® es usual colocar un
indicador de anaerobiosis.

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5) ¿Por qué es importante evitar romper o dañar el medio durante la siembra?

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BIBLIOGRAFIA

Recuperado de uvc.ve el mes de Noviembre del 2016 de :


http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/08_Tema_5_Culti
vo.pdf

Quistián García Hylary Asas microbiológicas y su uso .Recuperado de uvc.ve el mes de


Noviembre del 2016 de :

http://microbiologia3bequipo5.blogspot.pe/2014/10/asas-microbiologicas-y-su-
uso.html
Anónima SHELOLAB Recuperado de uvc.ve el mes de Noviembre del 2016 de :

http://www.directindustry.es/prod/sheldon/product-28333-844069.html

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