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INTRODUCCION.......................................................................................................................... 2
OBJETIVOS .................................................................................................................................. 3
MARCO TEORICO ....................................................................................................................... 4
MATERIALES Y EQUIPOS .......................................................................................................... 7
PROCEDIMIENTO ....................................................................................................................... 8
LECTURA DE PLACAS .............................................................................................................. 10
RESULTADOS ............................................................................................................................ 23
CONCLUSIONES ........................................................................................................................ 28
CUESTIONARIO......................................................................................................................... 29
BIBLIOGRAFIA .......................................................................................................................... 33
INTRODUCCION
OBJETIVOS
Lograr que el participante sea capaz de cuidar y mantener sus cultivos puros.
MARCO TEORICO
2) Siembra por inmersión: se coloca el inóculo en una placa o caja de Petri y sobre
el mismo se vierte el medio de cultivo previamente fundido. Este método se utiliza
para microorganismos aerobios.
3) Siembra en doble capa: se procede de la misma manera que por inmersión. Una
vez solidificado el medio se vierte una cantidad extra de medio necesaria para cubrir
la capa anterior (generalmente 10 ml. aprox.). Este método se utiliza para
microorganismos anaerobios facultativos y microaerofílicos.
Para observar la flora bacteriana general de una muestra de cualquier sustancia se
utilizan medios no selectivos. Ni un medio cualquiera ni cualquier temperatura
pueden permitir el crecimiento de todos los posibles gérmenes. Son medios
recomendables el agar nutritivo, algún medio para organismos exigentes son o sin
adición de sangre, agar triptona glucosado, agar leche desnatada, agar rugosa.
Sembrar o inocular es introducir artificialmente un porción de muestra (inoculo) en
un medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo microbiano. Las siembras pueden
realizarse en medio líquido, solido, o semi sólido, utilizando punta, asa, hisopo o
pipeta estéril.
Toda siembra debe adaptarse a los siguientes principios generales:
Practicarla en medio de cultivo favorable y previamente esterilizado.
Emplear instrumentos asépticos.
No contaminar ni destruir el inoculo.
Depositarla asépticamente en los medios elegidos.
Esterilizar los instrumentos empleados antes y después de cada operación.
El inoculo es la carga de microorganismos presentes en un sitio y momento
determinado.
Mientras que el aislamiento, es separar un tipo de microrganismo a partir de una
población que les contiene de varios tipos. En hábitats naturales, raramente
encontramos a los microorganismos en cultivo puro (un solo tipo), por lo tanto es
MATERIALES Y EQUIPOS
ASA DE PLACA
KOLLE PETRI
PIPETA BOTELLAS
MUESTRAS
MEDIOS DE
ANALIZAR:
CULTIVOS
MacConkey
PREPARAD
OS
Plate Count
PROCEDIMIENTO
Técnica
-Aislamiento en Placas por Estrías
Se hacen diluciones del producto, por lo general es suficiente la emulsión general y un
dilución 1:10. Cuando se emplea éste método de agotamiento del asa, es útil disponer de dos
asas; una de ellas se enfría mientras se usa la otra. Existen distintas maneras, el objeto es
obtener colonias aisladas.
Técnica A:
Se pone un asa cargada de material sobre el medio, cerca del borde de la placa y se extiende
sobre un sector. Se flamea el asa se hace la extensión desde el área A sobre la zona B en
estrías paralelas, cuidando no dejar que se solapen las estrías. Se flamea el asa y se repite
en la zona C y así sucesivamente. Cada estriación con el asa diluye el inoculo. Las placas se
invierten y se incuban.
LECTURA DE PLACAS
FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Semisólido
MUESTRA A ANALIZAR Agar MacConkey
PROCEDENCIA Peptona 10(-3)
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octubre, 16:00 h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de octubre
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 8:47am
ANALISTA MORAN FLORES HAROLD
FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Semisólido
MUESTRA A ANALIZAR Agar MacConkey
PROCEDENCIA Peptona 10(-1)
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octubre, 16:00 h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de octubre
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 8:59am
ANALISTA TORRES MENDOZA ALONDRA
FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Semisólido
MUESTRA A ANALIZAR Agar MacConkey
PROCEDENCIA Peptona 10(-3)
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octubre, 16:00 h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de octubre
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 9:08 am
ANALISTA ORIHUELA FABIAN ANGELES
FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Semisólido
MUESTRA A ANALIZAR Agar MacConkey
PROCEDENCIA Peptona 10(-2)
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octubre, 16:00 h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de octubre
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 10:08 am
ANALISTA SAAVEDRA VARGAS JHON
FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Semisólido
MUESTRA A ANALIZAR Agar MacConkey
PROCEDENCIA Peptona 10(-1)
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octubre, 16:00 h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de octubre
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 10:38 am
ANALISTA TORRES ANTONIO JULIA
ENTERO X
COLOR GUINDA
MATE X
BRILLANTE
OPACIDAD OPACO
TRANSPARENTE X
OPACO
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO X
MUCOSO
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR
ABUNDANTE X
FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Semisólido
MUESTRA A ANALIZAR Agar MacConkey
PROCEDENCIA Peptona 10(-2)
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octubre, 16:00 h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de octubre
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 10:47 am
ANALISTA MORAN FLORES HAROLD
ENTERO X
COLOR GUINDA
MATE X
BRILLANTE
OPACIDAD OPACO
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO
MUCOSO X
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR X
ABUNDANTE
FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Solido
MUESTRA A ANALIZAR Agar Plate Count (método 1)
PROCEDENCIA Peptona
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octube del 2016, 16:00h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de Octubre del 2016
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 11:15 am
ANALISTA
DENTADOS
OTROS FESTONEADA
COLOR INCOLORO
MATE
BRILLANTE X
OPACIDAD TRANSPARENTE
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO
MUCOSO X
CONTAMINACION SIN CONTANIMACION
ESCASA
REGULAR X
ABUNDANTE
FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Solido
MUESTRA A ANALIZAR Agar Plate Count (método 1)
PROCEDENCIA Peptona
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octube del 2016, 16:00h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de Octubre del 2016
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 9:22 am
ANALISTA
ONDULADOS
DENTADOS
OTROS FESTONEADA
COLOR INCOLORO
MATE
BRILLANTE X
OPACIDAD TRANSPARENTE
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO
MUCOSO X
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR X
ABUNDANTE
FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Solido
MUESTRA A ANALIZAR Agar Plate Count (método 1)
PROCEDENCIA Peptona
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octube del 2016, 16:00h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de Octubre del 2016
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 9:37 am
ANALISTA
FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Solido
MUESTRA A ANALIZAR Agar Plate Count (método 1)
PROCEDENCIA Peptona
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octube del 2016, 16:00h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de Octubre del 2016
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 9:55 am
ANALISTA
OTRO
BORDES SIN BORDE
ONDULADOS
DENTADOS
OTROS FESTOREADA
COLOR INCOLORO
MATE
BRILLANTE X
OPACIDAD TRANSPARENTE
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO X
MUCOSO
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA X
REGULAR
ABUNDANTE
FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Solido
MUESTRA A ANALIZAR Agar Plate Count (método 2)
PROCEDENCIA Peptona
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octube del 2016, 16:00h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de Octubre del 2016
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 10:15 am
ANALISTA
ELEVADO
OTRO
BORDES SIN BORDE
ONDULADOS
DENTADOS
OTROS FESTONEADA
COLOR INCOLORO
MATE
BRILLANTE X
OPACIDAD TRANSPARENTE
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO X
MUCOSO
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR
ABUNDANTE X
FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Solido
MUESTRA A ANALIZAR Agar Plate Count (método 2)
PROCEDENCIA Peptona
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octube del 2016, 16:00h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de Octubre del 2016
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 10:27 am
ANALISTA
PLANO X
ELEVADO
OTRO
BORDES SIN BORDE
ONDULADOS
DENTADOS
OTROS FESTONEADA
COLOR INCOLORO
MATE
BRILLANTE X
OPACIDAD TRANSPARENTE
TRANSPARENTE
OPACO X
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO X
MUCOSO
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR
ABUNDANTE X
FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Solido
MUESTRA A ANALIZAR Agar Plate Count (método 2)
PROCEDENCIA Peptona
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 28 de Octube del 2016, 16:00h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 31 de Octubre del 2016
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 56h
FECHA DE LECTURA 10:34 am
ANALISTA
RESULTADOS
FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO sOLIDO
MUESTRA A ANALIZAR Agar EMB
PROCEDENCIA Jugo de naranja (10 -1)
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 11 de noviembre del 2016, 16:00h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 16 de Noviembre del 2016
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 72h
FECHA DE LECTURA 1:34 am
ANALISTA Ángeles Orihuela Fabián
Cuadro 1
OTRO
SUPERFICIE SIN SUPERFICIE
LISO
RUGOSO X
HOMOGENEO
OTRO
ELEVACION SIN ELEVACION
PLANO
ELEVADO
OTRO
BORDES SIN BORDE
ONDULADOS X
DENTADOS
COLOR
MATE INCOLORO
BRILLANTE X
OTROS
OPACIDAD TRANSPARENTE
TRANSPARENTE X
OPACO
CONSISTENCIA SIN CONSISTENCIA
SECO
MUCOSO X
CONTAMINACION SIN CONTAMINACION
ESCASA
REGULAR X
ABUNDANTE
FICHA DE LECTURA
MEDIO DE CULTIVO Semisólido
MUESTRA A ANALIZAR Agar MacConkey
PROCEDENCIA Juego de maracuyá al ambiente (10-1)
FECHA Y HORA DE RECOLECCION 11 de Noviembre, 16:00 h
FECHA Y HORA DE ANALISIS 16 de Noviembre
TEMPERATURA DE INCUBACION 37°C
TIEMPO DE INCUBACION 72 h
FECHA DE LECTURA 1:30 pm
ANALISTA Ángeles Orihuela Fabián
Cuadro 21
CONCLUSIONES
Agar EMB
Agar MacConkey
Las muestras cambian de color al utilizar la lactosa, producen acidez lo cual baja el
pH bajo 6,8 lo que tiene como consecuencia la aparición de colonias de color
rosadas o rojas. El indicador que permite todo esto es rojo neutro
CUESTIONARIO
1. ¿Cuándo sería necesario utilizar técnicas asépticas para inocular un tubo
de medio líquido con polvo?
Se introduce el asa de siembra en el tubo con cultivo crecido y se toma un inoculo
que se lleva el tubo estéril con medio liquido (agitándola en el seno del medio),
para ello se debe evitar raspar las paredes del tubo, procurar que cada
instrumento este completamente estéril antes de usarlo.
Anónima SHELOLAB
http://www.directindustry.es/prod/sheldon/product-28333-844069.html
4) Asa espatulada.
Para manipular colonias duras y tomar muestras.
BIBLIOGRAFIA
http://microbiologia3bequipo5.blogspot.pe/2014/10/asas-microbiologicas-y-su-
uso.html
Anónima SHELOLAB Recuperado de uvc.ve el mes de Noviembre del 2016 de :
http://www.directindustry.es/prod/sheldon/product-28333-844069.html