16/02/2018

UNIVERSIDAD DE
GUADALAJARA
Centro Universitario de Ciencias Exactas e Ingenierías

Unidad 2. Guías de validación y normatividad vigente

Guía editada por del Colegio Nacional de Químicos  Analizar las diferentes guías normativas y fuentes de
Farmacéuticos Biólogos de México, A.C. referencia que marcan los requisitos necesarios para la
validación de procesos y métodos analíticos.
Licenciatura en Químico Farmacéutico Biólogo
Validación de Procesos y Métodos Analíticos

Presentan: Buelna Avilés María Fernanda

Aviña Díaz Andrea Verónica Peña Peña Gabriela Yamile
Baeza Falcón Adrián Ramírez Medina Jonatán

PROLOGO PRÓLOGO

 La validación de métodos analíticos es un sistema involucrado en los procesos de

 Es necesario llevar a cabo en la mayoría de las ocasiones estudios experimentales que permitan fabricación en el área de calidad de la empresa y bajo la filosofía de la Validación,
demostrar la confiabilidad de lo que se está midiendo. Un proceso que permite cumplir este fin, es la las Autoridades Regulatorias verifican que las empresas sustenten estos sistemas
validación. con actividades documentadas.

 Todo producto farmacéutico debe reunir atributos para cumplir con los aspectos normativos oficiales e
internos y los éticos, por lo que si un método analítico, que finalmente es el medidor de las
características criticas de calidad del producto, no es confiable, se corre el grave riesgo de afectar al
usuario final que es un paciente.
 El objetivo final de un dictamen de calidad, es la liberación o no liberación de un
producto sobre la base de las especificaciones previamente establecidas. La
validación le proporciona, a quien aplica la metodología, una seguridad de la
confiabilidad de dichos resultados y puede tomar la decisión final con certeza.

PRÓLOGO OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACIÓN

 Establecer lineamientos generales mínimos necesarios para llevar a cabo el proceso de validación
de métodos analíticos en aquellos establecimientos dedicados a:
 Así́ mismo, no hay que perder de vista que esta es únicamente
una Guía donde se establecen los requisitos mínimos, que es Fabrica o laboratorio de
Laboratorio de control
químico biológico,
materias primas para la
necesario satisfacer con la Validación y que no limita de ninguna elaboración de
farmacéutico o de
toxicología, para el estudio y
medicamentos o productos
manera el interés que pudiera tener el profesionista para biológicos para uso humano,
experimentación de
medicamentos y materias
incluyendo fármacos.
primas.
profundizar, de manera particular, en alguno o algunos de los
temas involucrados.
Fabrica o laboratorio de
Laboratorio de control
medicamentos o productos
auxiliar de la regulación.
biológicos para uso humano.

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Se puede justificar por 4 áreas

JUSTIFICACIÓN

 Un método analítico se define como la descripción de la secuencia de actividades, recursos materiales • El profesional farmacéutico es
y parámetros que se deben cumplir, para llevar a cabo el análisis de un componente especifico de la el responsable de los
procesos farmacéuticos y por
muestra. lo tanto de la calidad de estos. •Productividad elevada a
costos bajos
Moral y Económica
 La validación de métodos analíticos es el proceso por el cual se demuestra, por estudios de laboratorio, ética.
que la capacidad del método satisface los requisitos para la aplicación analítica deseada; es decir
cumple con su propósito.

Aseguramiento
de Calidad.
Regulatoria • Reglamento de insumos para la salud
• Sistema critico porque • NOM-089-SSA1-1993. Buenas practicas
de fabricación de medicamentos,
impacta en la calidad de los • NOM-164-SSA1-1998, Buenas practicas
productos y/o servicios de fabricación para fármacos.
• NOM-073-SSA1-1993, Estabilidad de
medicamentos.

Símbolos y abreviaturas Símbolos y abreviaturas

 La guía hace referencia en cinco páginas a símbolos y abreviaturas.

Símbolos y abreviaturas DETERMINACIONES, METODOLOGÍA Y

CRITERIOS DE ACEPTACIÓN

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PRECISIÓN DEL SISTEMA ADECUACIÓN DEL SISTEMA (MÉTODOS CROMATOGRÁFICOS)

 Metodología: El analista debe preparar por lo menos un
sextuplicado de soluciones bajo las mismas condiciones.
 Criterios de aceptación: CV ≤ 1.5% para métodos físico-
químicos y CV ≤ 3% para métodos biológicos.
 Metodología: Inyectar por quintuplicado la solución. Para cada inyección se
reportará: factor capacidad (K), resolución (R), retención relativa (Rr), factor
de coleo (T) y número de platos teóricos (N).
 Criterios de aceptación: CV ≤ 2% para la respuesta analítica. Valores
superiores deben ser justificados.
Para cada inyección se recomienda: K ≥2, R ≥2, T ≤2.

LINEALIDAD DEL SISTEMA ESPECIFICIDAD

 Metodología: Debe de prepararse al menos por triplicado 5 niveles de concentración de la solución de
referencia. Calcular el valor de la pendiente (b1), la ordenada en el origen (b0), el coeficiente de
determinación (r2) y el intervalo de confianza para la pendiente (IC(β1)).
 Criterios de aceptación: r2 ≥ 0.98, IC(β1) no debe incluir el cero.
 Metodología:
Para métodos de identificación: seleccionar sustancias que potencialmente interfieran en la
determinación.
Para métodos de contenido/potencia/valoración: Se deberá analizar placebos del producto.
Para métodos de contenido/valoración de impurezas: si se dispone de impurezas se deben adicionar
al analito y/o muestra analítica en niveles que incluya la especificación.
Para métodos de limite de impurezas: analizar muestras individuales de la impureza, el producto y la
mezcla de estos.
Para métodos indicadores de estabilidad: Preparar muestra con placebo adicionado de productos de
degradación, placebo adicionado de analito, placebo adicionado de analito y de productos de
degradación y analizarlos.
 Criterios de aceptación: la respuesta del método únicamente debe ser debida al analito.

EXACTITUD Y REPETIBILIDAD DEL MÉTODO LINEALIDAD DEL MÉTODO

 Metodología: Metodología:
Si se conocen los componentes de la muestra y es posible preparar un placebo analítico: Se deberá Si se conocen los componentes de la muestra y es posible preparar un placebo analítico:
analizar por sextuplicado, por el mismo analista y bajo las mismas condiciones, utilizando como Se deberá analizar por triplicado, por el mismo analista y bajo
referencia la sustancia empleada en la adición al placebo analítico. las mismas condiciones, utilizando como referencia la sustancia empleada en la adición al placebo analítico.
No se conocen los componentes de la muestra: Deberán analizar la muestra mediante métodos para No se conocen los componentes de la muestra: Deberán analizar la muestra mediante métodos para determinar el
determinar el contenido del analito y preparar por lo menos 6 muestras adicionadas del analito. contenido del analito y preparar por lo menos tres muestras adicionadas del analito.
Criterios de aceptación: si el método es:
Calcular CV e intervalo de confianza para la media poblacional (IC(µ)) Cromatográficos: IC(µ) 98 – 102%, CV no mayor de 2%
 Criterios de aceptación: si el método es: Volumétrico: IC(µ) 98 – 102%, CV no mayor de 2%
Cromatográficos: IC(µ) 98 – 102%, CV no mayor de 2% Químico o espectrofotométrico: IC(µ) 97 – 103%, CV no mayor de 3%
Volumétrico: IC(µ) 98 – 102%, CV no mayor de 2% Microbiológico: IC(µ) 95 – 105%, CV no mayor del 5%

Químico o espectrofotométrico: IC(µ) 97 – 103%, CV no mayor de 3%

Microbiológico: IC(µ) 95 – 105%, CV no mayor del 5%

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PRECISIÓN DEL MÉTODO ESTABILIDAD -Propiedad de una muestra preparada, de

conservar su integridad fisicoquímica y la
ANALÍTICA DE LA concentración del analito, después de almacenarse
por un tiempo y condiciones determinadas.

Metodología Cálculos Criterio de aceptación MUESTRA

• Analizar por • Reportar el contenido/ • CV ≤2% para
triplicado una potencia/ valoración métodos
muestra homogénea del analito. cromatográficos y
del producto. • Cálcular: volumétricos Establecer la etapa de Determinar si es posible
• Debe tener un nivel •Ŷ CV ≤3% para análisis en la cual se fraccionar (muestras
cercano a 100%. •S
métodos químicos o desea evaluar la dependientes) o no
• Realizar el método espectrofotométricos
• CV CV ≤5% para estabilidad (muestras independientes.
dos días diferentes
por dos analistas métodos biológicos
diferentes.
Muestras dependientes

Criterios de aceptación
Calcular:
Procesar por triplicado.
Muestras independientes

Analizar por trilpicado • % de recobro de cada

Fraccionar cada preparación de
acuerdo a las condiciones de
almacenaje.
Analizar
contenido/potencia/valoración.
Seguir el análisis al término de cada
condición de almacenaje utilizando
Soln de Ref.
(contenido/potencia/valoración) placebo analítico
Procesar número de muestras • Ŷ0
necesario para cada condición de • Ŷ1
almacenaje por triplicado. • |di|
Seguir el análisis al término de
cada condición de almacenaje
utilizando Soln de Ref.

Las formulas y el procedimiento se encuentran en el anexo 7.

LÍMITE DE DETECCIÓN CRITERIO DE ACEPTACIÓN

 METODOLOGÍA
 Este procedimiento aplica a métodos que utilizan instrumentos para medir la respuesta analítica y que
presentan una señal de ruido basal.
 El LD debe ser menor a la especificación de la prueba de impurezas límite.
 Determinar aquella cantidad del analito que genere una respuesta con respecto a la muestra blanco en
una proporción de por lo menos de 3 a 1

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LÍMITE DE CUANTIFICACIÓN
CRITERIO DE ACEPTACIÓN
 Señal de Ruido.
 Metodología:
 Este procedimiento aplica a métodos que utilizan un instrumento para medir la respuesta analítica y que
presentan una señal de ruido basal.

 Un analista debe determinar la señal de muestras blanco y la señal analítica de muestras a concentraciones  El LC debe ser menor a la especificación del contenido / valoración de la prueba de impurezas
conocidas del analito, inferiores o que incluya la especificación del contenido I valoración de la prueba de
impurezas.

 Determinar aquella cantidad del analito cuya señal sea similar o mayor a la de la muestra blanco en una
proporción de 10 a 1, lo que corresponde a la cantidad asociada al límite de cuantificación.

ROBUSTEZ CRITERIOS DE ACEPTACIÓN

 Se deben establecer aquellos factores instrumentales y/o factores no instrumentales relacionados al

propio método, que se considere críticos.

 En cada condición de operación distinta; asi como a la condición normal, analizar la misma muestra por
lo menos por triplicado.

 Reportar el contenido / potencia / valoración del analito para las muestras de condición normal de
operación y para la(s) muestra(s) de las otra(s) condicion(es) de operación, expresada(s) como %.

TOLERANCIA CRITERIOS DE ACEPTACIÓN

 Se deben establecer aquellos factores ajenos al método como diferentes equipos, lotes de reactivos,
columnas, etc., que se puedan presentar al reproducir el método en otras condiciones de uso.

 Fijar por lo menos 2 condiciones de uso y analizar una misma muestra por lo menos por triplicado a
cada condición.

 Reportar el contenido I potencia I valoración del analito de todas las muestras.

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SUSTANCIAS DE REFERENCIA

Manejo: Cada sustancias debe almacenarse,

Constituyen un componente propio del método y una
herramienta en la evaluación de los parámetros de
desempeño, lo que permite establecer la confiabilidad
de la metodología.
Para la selección y adquisición se debe contar con
procedimientos acordes para su manejo y aplicación
correctos dentro del laboratorio que va a llevar a cabo
las actividades de validación de métodos.
manejarse y utilizarse de acuerdo con las
especificaciones correspondientes. Generalmente
deben almacenarse en su contenedor original,
alejadas del calor y protegidas de la luz. Cualquier
indicación sobre condiciones especiales de
almacenamiento deben incluirse en el marbete y
(o) certificado analítico
Tratamiento: Cualquier tratamiento previo debe
contemplarse en la metodología o especificarse en
el marbete

REVALIDACIÓN

Procedencia: Enlista centros Se deben establecer y justificar criterios apropiados para la revalidación de
especializados que proveen métodos analíticos, así como mantener un control de cambios.
sustancias de referencia: BP,
EPCRS, COSUFAR, OMS, SSA, CAMBIO IMPACTA PARÁMETRO A
USP. REVALIDAR
Concentración de la Exactitud del método Linealidad del
solución de sistema y exactitud
referencia del método

COMPARACIÓN DE DOS MÉTODOS ANALÍTICOS DOCUMENTACIÓN

 Las actividades de validación de un método
Estudio de Comparación de Parámetros de analítico deben ser sustentadas por los
Desempeño. Se utiliza cuando los dos métodos siguientes documentos:
analíticos han sido validados y se tiene interés a) PROTOCOLO:
en comparar sus parámetros de desempeño,
como puede ser el comparar un método - Título
volumétrico contra un método por cromatografía - Propósito u objetivo
de líquidos de alta resolución
- Responsabilidades
Estudio de correlación. Se utiliza cuando se
comparan dos métodos cuyos resultados se - Plan de prueba
expresan en unidades diferentes, tal como, - Criterios de aceptación para cada parámetro
actividad biológica vs concentración.
- Formatos de registro de resultados

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CONCORDANCIA CON GUÍAS INTERNACIONALES

b) REPORTE. Guideline for Industry: Text on Validation of Analytical Procedures. ICH-Q2A, March 1995
- Título
- Resultados Guideline on the Validation of Analytical Procedures; Methodology; Availability; Notice ICHQ2B

- Análisis de resultados
USP24. Validation of Compendial Methods
- Confrontación contra los criterios de aceptación
- Conclusión
Reviewer Guidance: Validation of Chromatographic Methods. CDER. November 1994, CMC 3

BIBLIOGRAFÍA/ANEXOS BIBLIOGRAFÍA/ANEXOS

NÚMERO CONTENIDO NÚMERO CONTENIDO

1 Matriz de Equivalencia de Métodos Analíticos 12 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo para tolerancia
2 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo para precisión del sistema 13 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo para repetibilidad y exactitud para
3 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo para adecuabilidad del sistema comparación de dos métodos analíticos

4 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo para linealidad del sistema 14 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo para repetibilidad en linealidad del
método para comparación de dos métodos analíticos
5 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo para exactitud y repetibilidad del método
15 Fórmulas y procedimientos de cálculo con ejemplo en exactitud para comparación de 2
6 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo para linealidad del método métodos
7 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo para precisión del método (precisión 16 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo en linealidad del método para
intermedia) comparación de 2 métodos analíticos
8 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo para estabilidad analítica de la muestra 17 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo en precisión del método para
9 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo para límite de detección comparación de 2 métodos analíticos
10 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo para límite de cuantificación 18 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo para proporcionalidad de métodos en
estudios de correlación para comparación de dos métodos analíticos
11 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo para robustez

BIBLIOGRAFÍA/ANEXOS ¡GRACIAS POR SU ATENCIÓN!

NÚMERO CONTENIDO
19 Fórmulas y procedimiento de cálculo con ejemplo para precisión del método en estudios de
correlación para comparación de dos métodos analíticos
20 Tabla estadística de la distribución t de Student
21 Tabla estadística de la distribución de f de Fisher
22 Comentarios respecto a los cálculos y las reglas de redondeo