PROCEDIMIENTOS

Preparar una batería de tubos como sigue:

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3
Almidón al 1.0 1.0 1.0
0.5% (mL.)
Buffer Fosfato 0.5 0.5 ---
(mL.) pH= 6.8
HCL 0.5N (mL.) --- --- 1.5
Agua destilada --- 1.5 0.5
(mL.)
NaCL 0.9% 1.5 --- ---
(mL.)

NaCL: activador de la enzima alfa amilasa salival.

Tubo 1,2: pH óptimo
Tubo 3: pH ácido

Mezclar y llevar a baño maría de 37ºC por 10’ y luego agregar

Saliva diluída 0.5 0.5 0.5

Alfa amilasa (mL.)

Agitar e incubar a 37°C por 10´

Tubo 1 + Alfa amilasa salival: digerido I

Tubo 2 + Alfa amilasa salival: digerido II
Tubo 3 + Alfa amilasa salival: digerido III

Cada 3´se debe sacar una gota de cada tubo y se le debe

agregar Lugol

1. FUNDAMENTO

 Reacción del Lugol

El lugol o solución de Lugol es una solución de I2 (1%) en equilibrio con KI (2%) en agua destilada.
Fue nombrada en honor al físico francés J. G. A. Lugol. El Lugol colorea las micelas de almidón
de color azul intenso casi negro. El almidón es una mezcla (en diferentes proporciones según las
especies) de los polisacáridos amilosa (10-20%) y amilopectina (80-90%). El almidón es
coloreado de azul en presencia de Lugol, debido a una adsorción o fijación del I-3 sobre las
unidades de glucosa de la amilosa, y ayuda a mantener su estructura. Al calentar hasta
ebullición, desaparece la estructura ternaria (incoloro) y reaparece al enfriar (azul-violeta).
Tubo Tubo Tubo
3’ 6’ 9’
Digerido 1.0 --- ---
I
Digerido --- 1.0 ---
II
Digerido --- --- 1.0
III
HCL 0.5N 0.5 0.5 0.5

Lugol 1 1 1
RESULTADOS

 Reacción del Lugol

Para el Tubo 3’

Presencia de glucosa. Hubo

actividad enzimática. Lugol (-)

Para el Tubo 6’

Presencia de glucosa. Hubo

actividad enzimática. Lugol (-)

Para el Tubo 9’

Presencia de almidón. No
hubo actividad enzimática.
Lugol (+)