Práctica 4

CARIOTIPO HUMANO

INTRODUCCIÓN

El descubrimiento del número cromosómico humano (46 cromosomas) en el año

1965 por Tjio y Levan, marca el comienzo de la citogenética humana moderna.

El material hereditario se encuentra formado por genes, que son secuencias de

ADN que transcriben a una cadena polipeptídica funcional. El ADN se encuentra en el
núcleo celular en forma dispersa y junto con ciertas proteínas constituye la cromatina
(2,37 nm). Durante la división celular el ADN se organiza en estructuras más complejas
hasta formar los cromosomas. El primer nivel de organización del ADN consiste en
subunidades a manera de cuentas de un collar, llamado Nucleosoma, en el cual la fibra
de cromatina dará dos vueltas alrededor de un "núcleo" formado por un octámero de
histonas empaquetando al ADN en una proporción de más o menos 7 veces,
constituyéndose una fibra de 10 nm de diámetro. Un segundo nivel de organización es
el Solenoide en el que los nucleosomas se reenrollan sobre si mismos, condensando la
longitud del ADN en 40 veces más. El arreglo interno del solenoide consiste de una
fibra de cromatina enrollada en forma de hélice conteniendo 6 nucleosomas por vuelta,
que tiene 30 nm de diámetro. Esta fibra parece ser la unidad fundamental para que la
cromatina se organice en cromosomas. La fibra de 30 nm durante la condensación de
los cromosomas forma empaquetamientos en forma de "loops" o lazos unidos a un
"scaffold" o eje central, que constituye una matriz de proteínas no histónicas, el ADN en
este nivel se compacta 1.000 veces al final de la interfase (700 nm) y 10.000 veces en el
cromosoma metafásico (2.000 nm). Los lazos contienen de 60 a 100 Kb cada uno y
están empacados a modo de hélices superpuestas sujetas a un eje central o andamio.

Entre las proteínas no histónicas del andamio se destaca la Sci (Topoisomerasa

II). La Topoisomerasa II constituye el 70 % del eje central formando los complejos de
anclaje de los lazos de ADN. Su función es la de enrollar y desenrollar las cadenas de
ADN para permitir la separación de las cromátides hermanas durante la anafase. Su
ubicación estratégica en la base de los dominios permite que desde aquí actúe en la
segregación y condensación cromosómica (Fig. 7).

Se ha especulado que los lazos son, en efecto, unidades funcionales de la

replicación y transcripción del ADN. Probablemente los cromosomas mitóticos son el
resultado de la condensación o agrupamiento de los lazos o loops de la cromatina
interfásica. Llegándose a producir el nivel de compactación del cromosoma mitótico de
5 a 10 veces más sobre la cromatina en interfase.
 Figura 7. Niveles de organización del material hereditario

(Tomado de Strachan y Read, 1996)

Mediante la observación de los cromosomas mitóticos al microscopio de luz, se

puede apreciar que estos adoptan, bajo ciertas condiciones, una clara conformación
helicoidal, a pesar de que al microscopio electrónico presenten una apariencia más
desordenada. A través del proceso de condensación del material hereditario, se pasa de
una fibra de ADN con una longitud de aproximadamente 174 cm., a los cromosomas
con una longitud de 2 a 8 micras.

Los cromosomas están formados por dos cromátides unidas en el centrómero

(constricción primaria), regiones terminales o teloneros y en ocasiones pueden presentar
satélites, separados del cromosoma por una constricción secundaria. El centrómero
divide al cromosoma en dos brazos: uno corto (p) y uno largo (q) (Fig. 8).

El complemento cromosómico de cada célula se denomina cariotipo. Este

término se utiliza para describir la constitución cromosómica de una especie. La
identificación morfológica de los cromosomas está basada en los tamaños relativos de
los mismos y de sus brazos. Un idiograma es la representación esquemática de la
morfología cromosómica que se usa como diagnóstico para la comparación de los
cariotipos de diferentes especies y variedades. El idiograma está basado en las medidas
de los cromosomas en varias células.

Los cromosomas humanos de acuerdo a la posición del centrómero se clasifican

en: metacéntricos cuando sus brazos son equidistantes con respecto al centrómero y por
lo tanto sus cromátides son de la misma longitud, acrocéntricos cuando el centrómero
se localiza en la región subterminal formando brazos muy pequeños generalmente con
satélites, submetacéntricos cuando la localización del centrómero tiende hacia uno de
los extremos, por lo que los brazos de las cromátides son desiguales y telocéntricos
cuando el centrómero se ubica en la región terminal del cromosoma, por lo tanto no
existen brazos p, este tipo de cromosoma no está presente en el cariotipo humano.

Figura 8. Clasificación de los cromosomas por la posición del centrómero

(Tomado de Thompson y Thompson, 1996)

En 1960, en la convención de Denver, se unificó la nomenclatura de los

cromosomas reconociéndose 2 grupos: Autosomas (cromosomas somáticos) y
Gonosomas (cromosomas sexuales). Los autosomas se numeran del 1 al 22 ordenados
por tamaños decrecientes y, dentro del mismo tamaño, por la posición del centrómero.
Los cromosomas de tamaño semejante se reúnen en grupos que se designan por letras
(de la A a la G). A los cromosomas sexuales X e Y se les incluye en los grupos C y G
respectivamente.
 Los cromosomas 1, 3, 16, 19 y 20 son típicamente metacéntricos; el cromosoma
2 está en el límite entre metacéntrico y submetacéntrico; los cromosomas B representan
el tipo submetacéntrico grande. Los cromosomas de los grupos C y E (a excepción del
16) son típicamente submetacéntricos medianos y pequeños respectivamente. Los
cromosomas D y G son acrocéntricos grandes y pequeños, y usualmente presentan
satélites en los brazos cortos. El cromosoma X es submetacéntrico y al Y se le
considera acrocéntrico sin satélites (Fig. 8 y 9).
Según los resultados publicados (2001), parece que el genoma humano
verdaderamente contiene “desiertos”, o grandes regiones “pobres en genes”. Si se define
un desierto como una región >500kbp sin un gen, entonces se puede ver que 605 Mbp, o
cerca del 20% del genoma, es un desierto. Estos desiertos no están uniformemente
distribuidos en los cromosomas. Los cromosomas 17, 19, y 22 ricos en genes, tienen
cerca del 12% de un total de 171 Mbp en desiertos, mientras que los cromosomas
pobres en genes 4, 13, 18 y X tienen 27,5% de sus 492 Mbp en desiertos. La aparente
falta de genes en estas regiones, no necesariamente implica que estas regiones no tengan
función biológica.
Desde 1970 se han desarrollado nuevas técnicas que permiten identificar a cada
par de cromosomas por su patrón característico de bandas transversales, que se ponen de
manifiesto con métodos de tinción especiales. Las técnicas de bandeo cromosómico
consisten en exponer a los cromosomas a diferentes substancias y colorantes para
desnaturalizar porciones de proteínas del esqueleto cromosómico (histonas y no
histonas) o evidenciar secuencias de ADN con mayor o menor cantidad de enlaces bi o
trivalentes entre las bases nitrogenadas constitutivas de ADN (adenina, citosina, guanina
o timina).

OBJETIVOS

1. Aprender a reconocer los diferentes grupos y tipos de cromosomas que

conforman el cariotipo humano.

2. Clasificar a los cromosomas humanos de acuerdo a las normas del ISCN 2009.

3. Diferenciar un cariotipo normal de uno patológico con alteraciones numéricas y

estructurales.

MATERIALES

- fotografías de metafases humanas normales y patológicas

- plantillas para armar cariotipos
- goma y/o papel contact transparente
- tijeras

PROCEDIMIENTO

1. Estudie la metafase y cuente el número de cromosomas.

2. Recorte cada uno de los cromosomas dejando un margen entre la figura y la
línea de corte.
 3. En base a los patrones de bandeo característico, aparee los cromosomas
homólogos.
4. Clasifíquelos por grupos de acuerdo a la posición del centrómero y al tamaño de
cada uno de los pares y péguelos en la plantilla correspondiente.

RESULTADOS

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO

1. Explique qué es índice centromérico, cómo se calcula y cuál es su utilidad.

2. ¿Cuál es la diferencia entre cariotipo y mapa cromosómico?

3. Explique cuál sería la diferencia entre el cariotipo de una persona con Síndrome
de Klinefelter en relación al cariotipo normal.

4. Refiérase brevemente acerca de una alteración cromosómica estructural.

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http://pagina.de/geneticahumana

http://www.biologia.arizona.edu/human/act/karyotyping/karyotyping.html

http//gblx.cache.el-mundo.net/especiales/2001/02/ciencia/genoma/genoma.swf
 Figura 9. Cariotipo normal 46, XX

(Tomado de: http://www.delta-sistemi.it/images/kariotype.jpg)

Figura 10. Síndrome de Turner (45,X )

 Figura 11. Síndrome de Down (Trisomía 21)

Figura 12. Alteración Estructural (Cromosoma Filadelfia): 46,XY, t(9;22) (q34;q11)

(tomado de:gslc.genetics.utah.edu/.../ translocation.cfm)