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Área: Ciencias de la vida y la salud

Introducción a la microbiología y
parasitología
Tema: Bacterias Gram positivo y
Gram negativo
INTRODUCCION
Una de las características más importante de las bacterias es su morfología,
definida por el tamaño, la forma, el arreglo y la estructura. Existen bacterias en
forma redondeada denominadas cocos, en forma cilíndrica, denominadas
bacilos y una tercera morfología como son las que tienen forma de espirales,
denominadas espirilos. A su vez cada categoría puede subclasificarse con base
a diferentes arreglos. Estas características pueden determinarse examinando
muestras al microscopio. Las células no teñidas son prácticamente
transparentes, pero pueden observarse al microscopio de luz haciendo
preparaciones entre lámina y laminilla o con microscopios especiales como, por
ejemplo: de contraste de fases o de campo oscuro. Cuando se dispone de un
microscopio de luz, se pueden teñir las bacterias para facilitar su visualización.
Objetivo:
 El alumno describirá las características de cultivo, morfológicas y bioquímicas
más relevantes de las enterobacterias
Practica 9
Primero fuimos a observar tres bacterias que se verán a continuación:
 Staphylococcus
 Fundamento: Los estafilococos son por definición bacterias de tipo coco,
responsables de numerosas enfermedades. Se contabilizan unas cuarenta
especies de estafilococos, entre los cuales el más común es estafilococo
aureus o simplemente estafilococo dorado.
Se encuentra en la primera fila de los gérmenes que provocan infecciones
nosocomiales (contraídas en el hospital). También se puede citar al
estafilococo blanco (staphylococcus epidermidis) y el staphylococcus
saprophyticus.

  Diplococos
 Fundamento:
Los diplococos son un conjunto
de bacterias que se caracterizan
por ser cocos asociados formando
parejas. Entre los diplococos patógenos más característicos encontramos a:
1. Streptococcus pneumoniae: Neumococo o diplococo grampositivo.
2. Neisseria gonorrhoeae: Diplococo gramnegativo.
3. Moraxella catarrhalis: Diplococo gramnegativo.
4. Neisseria meningitidis.
 Mycobacterium
 Fundamento: Género de
bacterias de la familia
micobacteriáceas; son bacilos
delgados, rectos o ligeramente
curvos e inmóviles. La pared
contiene elevada proporción de
lípidos y es muy rica en ácidos
micólicos, lo que acusa la
propiedad de la ácido-alcohol
resistencia. Muchas especies son
saprófitas; solo unas pocas son
patógenas, aunque muy virulentas: M. tuberculosis (bacilo de Koch) es
responsable de la tuberculosis; M. leprae es el agente causal de la lepra; M.
bovis origina tuberculosis en el ganado bovino.

  Medio de carne cocidas


El medio de carne cocida es un medio de enriquecimiento utilizado
para el cultivo de microorganismos anaerobios, especialmente los
pertenecientes al género Clostridium.

 Composición:
 Carne de corazón (de 454g)……………….98.0g
 Proteosa peptona……………………………20.0g
 Dextrosa………………………………………2.0g
 Cloruro de sodio…………………………….5.0g
 Agua destilada c.p.s………………………..1000mL

 Preparación:
Suspender 12,5 g de las partículas de medio en 100 mL de agua
destilada. Permitir que todas las partículas del medio se humedezcan
y formen una suspensión. Esterilizar a 121°C durante 15 minutos.
Reducir la presión de la autoclave lentamente y dejar enfriar sin
agitar. Si el medio no se utiliza dentro de las siguientes 24 horas de
su preparación, recalentar a 100 °C antes de su uso para eliminar
todo el oxígeno que pueda haber absorbido el medio.

 Fundamento:
Este medio de cultivo contiene sustancias reductoras que favorecen
el crecimiento de microorganismos anaerobios estrictos. La disponibilidad
de los grupos sulfidrilos que aumentan el efecto reductor es
mayor en la proteína desnaturalizada, por ello en este medio se utiliza
carne cocida.

 Lectura:

 Después de la
incubación, el
crecimiento se indica
mediante la turbidez y,
en algunos casos, la
producción de gas. La
proteólisis es
característica de
algunas especies y se
demuestra por el
oscurecimiento de las
partículas de carne
con digestión o
disolución final de la
carne. Se debe llevar
a cabo una tinción de
Gram o de esporas,
dado que la ubicación y el tamaño de las esporas
son datos característicos de Clostridium spp7
Materiales y métodos:
 Materiales:
 Agar Mac-Conkey
 Agar nutritivo
 Agua destilada
 Asas bacteriológicas
 Tubos de ensayo estéril
 Placas Petri estéril

 Equipos:
 Autoclave
 Balanza analítica
 Horno (180 °C) e incubadora (37°C).

 Preparación De Medios De Cultivo:


 Agar nutritivo (23 g / 1L de agua destilada)
 Pesar 23 g de agar.
 Calentar el agua destilada.
 Disolver 23 g / 1 l de H2O.
 Cubrir la boca del matraz con papel y amarrarlo con un hilo.
 Meterlo dentro de la autoclave y llenar esta con agua destilada.
 Esterilizar en autoclave (12 °C/ 15 lb/ 30 min).
 Verter en placas.
 Esperar a que sea gelatinoso.
 Sembrar la muestra clínica.
 Observar
`

 Agar Mac Conkey (50.03 g / 1L de agua destilada)


 Pesar 5 g de agar.
 Calentar el agua destilada.
 Disolver 5 g / 1 l de agua destilada.
 Cubrir la boca del matraz con papel y amarrarlo con hilo pabilo
 Meterlo dentro de autoclave y llenar esta con agua destilada.
 Esterilizar en autoclave (12 °C/ 15 lb/ 30 min).
 Verter en placas.
 Esperar a que sea gelatinoso.
 Observar.

 Resultados:
Al transcurrir el tiempo
en cada cultivo las morfologías de las colonias tienden a cambiar. En el agar
nutritivo las colonias toman un color amarillento y hay colonias fuera del
estriado. En el agar Mac-Conkey las bacterias que fueron Lac+ pasan a ser Lac-,
esto hace que cambie su color en las colonias de rosadas pasan a ser lechosas o
amarillentas. Todo esto ocurre mientras esta en incubadora, pero si los cultivos
son puestos en refrigeración sus características culturales no cambian
 Comentarios:
 Para las Gram positivas lo importante es el poder de penetración a su
interior. Para ello debemos usar fórmulas que contengan elementos
bactericidas y elementos que destruyan la defensa impuesta por su
gruesa membrana. La piperina es una opción, si no se trata de infecciones
intestinales. Cualquier hierba de propiedades sinérgicas ayudará a las de
propiedades antibióticas a llegar a su destino, como un ariete.

 Un ejemplo de fórmula herbal donde se incluye la piperina lo puedes


encontrar en el artículo referente a la tuberculosis. El bacilo que provoca
la tuberculosis es Gram positiva, y es uno de los que rápidamente está
aumentando su resistencia a los tratamientos habituales con antibióticos
de síntesis.

 En las Gram negativas lo importante es evitar las exhalaciones tóxicas que


produce la bacteria a modo de defensa y las toxinas liberada al morir.
Estos tóxicos pueden producir enfermedades mortales. El ataque a las
bacterias Gram negativa debe realizarse inmovilizando sus poros
excretores y evitando que la bacteria muera. Así usaremos
preferiblemente remedios con propiedades bacteriostáticas mezclados
con otros de propiedades antitóxicas. A la vez proporcionaremos soporte
al sistema inmunitario del cuerpo para que se encargue de evacuar a las
bacterias desactivadas.

CARACTERÍSTICAS Agar Nutritivo Agar MAC-


CULTURALES CONKEY
Aspecto de colonia Húmeda Húmeda
Borde Entero Entero
Consistencia Pastosa Pastosa
Elevación Convexa Convexa
Forma Circular Circular
Siembra Estriado Estriado
Superficie Lisa Lisa
 Referencias Bibliográficas:
 Web:
 “Cooked Meat Medium” recuperado el día 28 de junio del 2018 de:
http://foodsafety.neogen.com/sp/cooked-meat-medium

 “Staphylococcus” recuperado el día 28 de junio del 2018 de:


https://espanol.foodsafety.gov/intoxicaci
%C3%B3n/causas/bacteriasvirus/staphylococcus/xmd/%C3%ADndice.html
 “Diplococos” recuperado el día 28 de junio del 2018 de:
http://equipodelaboratorioclinico.blogspot.com/2012/12/diplococos_4.ht
ml

 “Mycobacterium” recuperado el día 28 de junio del 2018 de:


https://www.ecured.cu/Mycobacterium

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