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Introducción a la microbiología y
parasitología
Tema: Bacterias Gram positivo y
Gram negativo
INTRODUCCION
Una de las características más importante de las bacterias es su morfología,
definida por el tamaño, la forma, el arreglo y la estructura. Existen bacterias en
forma redondeada denominadas cocos, en forma cilíndrica, denominadas
bacilos y una tercera morfología como son las que tienen forma de espirales,
denominadas espirilos. A su vez cada categoría puede subclasificarse con base
a diferentes arreglos. Estas características pueden determinarse examinando
muestras al microscopio. Las células no teñidas son prácticamente
transparentes, pero pueden observarse al microscopio de luz haciendo
preparaciones entre lámina y laminilla o con microscopios especiales como, por
ejemplo: de contraste de fases o de campo oscuro. Cuando se dispone de un
microscopio de luz, se pueden teñir las bacterias para facilitar su visualización.
Objetivo:
El alumno describirá las características de cultivo, morfológicas y bioquímicas
más relevantes de las enterobacterias
Practica 9
Primero fuimos a observar tres bacterias que se verán a continuación:
Staphylococcus
Fundamento: Los estafilococos son por definición bacterias de tipo coco,
responsables de numerosas enfermedades. Se contabilizan unas cuarenta
especies de estafilococos, entre los cuales el más común es estafilococo
aureus o simplemente estafilococo dorado.
Se encuentra en la primera fila de los gérmenes que provocan infecciones
nosocomiales (contraídas en el hospital). También se puede citar al
estafilococo blanco (staphylococcus epidermidis) y el staphylococcus
saprophyticus.
Diplococos
Fundamento:
Los diplococos son un conjunto
de bacterias que se caracterizan
por ser cocos asociados formando
parejas. Entre los diplococos patógenos más característicos encontramos a:
1. Streptococcus pneumoniae: Neumococo o diplococo grampositivo.
2. Neisseria gonorrhoeae: Diplococo gramnegativo.
3. Moraxella catarrhalis: Diplococo gramnegativo.
4. Neisseria meningitidis.
Mycobacterium
Fundamento: Género de
bacterias de la familia
micobacteriáceas; son bacilos
delgados, rectos o ligeramente
curvos e inmóviles. La pared
contiene elevada proporción de
lípidos y es muy rica en ácidos
micólicos, lo que acusa la
propiedad de la ácido-alcohol
resistencia. Muchas especies son
saprófitas; solo unas pocas son
patógenas, aunque muy virulentas: M. tuberculosis (bacilo de Koch) es
responsable de la tuberculosis; M. leprae es el agente causal de la lepra; M.
bovis origina tuberculosis en el ganado bovino.
Composición:
Carne de corazón (de 454g)……………….98.0g
Proteosa peptona……………………………20.0g
Dextrosa………………………………………2.0g
Cloruro de sodio…………………………….5.0g
Agua destilada c.p.s………………………..1000mL
Preparación:
Suspender 12,5 g de las partículas de medio en 100 mL de agua
destilada. Permitir que todas las partículas del medio se humedezcan
y formen una suspensión. Esterilizar a 121°C durante 15 minutos.
Reducir la presión de la autoclave lentamente y dejar enfriar sin
agitar. Si el medio no se utiliza dentro de las siguientes 24 horas de
su preparación, recalentar a 100 °C antes de su uso para eliminar
todo el oxígeno que pueda haber absorbido el medio.
Fundamento:
Este medio de cultivo contiene sustancias reductoras que favorecen
el crecimiento de microorganismos anaerobios estrictos. La disponibilidad
de los grupos sulfidrilos que aumentan el efecto reductor es
mayor en la proteína desnaturalizada, por ello en este medio se utiliza
carne cocida.
Lectura:
Después de la
incubación, el
crecimiento se indica
mediante la turbidez y,
en algunos casos, la
producción de gas. La
proteólisis es
característica de
algunas especies y se
demuestra por el
oscurecimiento de las
partículas de carne
con digestión o
disolución final de la
carne. Se debe llevar
a cabo una tinción de
Gram o de esporas,
dado que la ubicación y el tamaño de las esporas
son datos característicos de Clostridium spp7
Materiales y métodos:
Materiales:
Agar Mac-Conkey
Agar nutritivo
Agua destilada
Asas bacteriológicas
Tubos de ensayo estéril
Placas Petri estéril
Equipos:
Autoclave
Balanza analítica
Horno (180 °C) e incubadora (37°C).
Resultados:
Al transcurrir el tiempo
en cada cultivo las morfologías de las colonias tienden a cambiar. En el agar
nutritivo las colonias toman un color amarillento y hay colonias fuera del
estriado. En el agar Mac-Conkey las bacterias que fueron Lac+ pasan a ser Lac-,
esto hace que cambie su color en las colonias de rosadas pasan a ser lechosas o
amarillentas. Todo esto ocurre mientras esta en incubadora, pero si los cultivos
son puestos en refrigeración sus características culturales no cambian
Comentarios:
Para las Gram positivas lo importante es el poder de penetración a su
interior. Para ello debemos usar fórmulas que contengan elementos
bactericidas y elementos que destruyan la defensa impuesta por su
gruesa membrana. La piperina es una opción, si no se trata de infecciones
intestinales. Cualquier hierba de propiedades sinérgicas ayudará a las de
propiedades antibióticas a llegar a su destino, como un ariete.