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MANUAL DE PROCEDIMIENTO DE PRACTICAS


MATERIA BIOLOGÍA CELULAR

DOCENTE MARCO CERNA

PERIODO 50

CARRERA INGENIERIA EN BIOTECNOLOGIA DE LOS RECURSOS NATURALES

SEDE EL GIRON - QUITO

PRACTICA N° 1

TEMA: MOLÉCULAS ORGÁNICAS

OBJETIVOS
1.- Conocer los componentes químicos de las células y ser capaz de reconocer las
estructuras químicas.
2.- Conocer las pruebas usadas en este experimento para proteínas, carbohidratos y
lípidos.

MARCO TEÓRICO

En los organismos vivos se encuentran grandes cantidades de cuatro clases de moléculas


orgánicas. Estas moléculas son: carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos.
Los carbohidratos, lípidos y proteínas, contienen carbono, hidrógeno y oxígeno en su
estructura. Además de estos las proteínas contienen nitrógeno y azufre. Los ácidos
nucleicos así como los lípidos contienen nitrógeno y fósforo.
Estas moléculas se encuentran construidas por unidades o “subunidades” simples que se
combinan por reacciones de condensación. En tales reacciones un átomo de hidrógeno
es removido del final de una de las subunidades y un grupo hidroxilo de la otra subunidad.
Las reacciones de condensación son reversibles, las complejas moléculas orgánicas
pueden ser hidrolizadas en sus subunidades simples.

RECURSOS UTILIZADOS
MATERIALES
CANTIDAD
DESCRIPCION
POR CURSO POR GRUPO
Tubos de ensayo 7
Mortero con pistilo 2
Cebolla 1
Portaobjetos 4
Cubreobjetos 4
Papa 1
Marcador indeleble 1
Discos de papel filtro 10
Pinza 1
Pipetas pasteur 2
Cultivo bacteriano 1
Aceite de coco 1 gota
Aceite vegetal 1 gota
Aguacate 1
Leche 1 gota
Caja Petri pequeña 1
Vaso de precipitación de 1000ml 1

REACTIVOS
CANTIDAD
DESCRIPCION
POR CURSO POR GRUPO
Agua destilada
Reactivo de benedict 6cm
Lugol 5ml
Reactivo de biuret 5ml
Albumina de huevo 5ml
Solución de almidón 5ml
Reactivo de nyhidrina 2ml
Sales biliares 5 gotas
Sudan IV 2 gotas
Aceite vegetal 3ml
Sudan III 3ml

EQUIPOS
CANTIDAD
DESCRIPCION
POR CURSO POR GRUPO
Mechero 1
Horno 1

PROCEDIMIENTO
EJERCICIO N° 1

Carbohidratos

A. Prueba de Benedict

Los monosacáridos y disacáridos tienen un grupo aldehído libre que interviene en la


siguiente ecuación de óxido reducción.

Benedict + aldehído Benedict + azúcar

forma oxidada del azúcar reductor forma reducida ácido

Este experimento probará la presencia de azúcares en la cebolla y la papa. El reactivo de


Beedict cambia de color después de calentarlo en presencia de azúcares, pero no de
almidón.

Procedimiento

1. Marque tres tubos de ensayo a 1cm y a 3cm desde la base. Identifíquelos como A,
B y C.
2. En un mortero, macere un pedazo de papa y recoja el jugo en el tubo A hasta la
marca de 1cm.
3. En otro mortero, macere un pedazo de cebolla y recoja el jugo en el tubo B hasta la
marca de 1cm.
4. Llene con agua destilada el tubo C hasta la marca de 1cm.
5. Agregue el reactivo de Benedict hasta completar 3cm a los tres tubos, y mezcle bien.
6. Coloque los tubos en un baño de agua hirviendo por cinco minutos.
7. Saque del agua los tubos y observe el cambio de color. El cambio de azul claro a
rojo naranja o marrón indica abundancia de glucosa (abundantes azúcares
reductores). Un cambio a verde indica la presencia de maltosa (pocos azúcares
reductores).
B. Prueba de yodo para almidones.

El lugol es una solución de yodo que se utiliza para identificar el almidón de otros azúcares.
Los almidones en presencia de yodo cambia el color café a un negro azulado.

Procedimiento

1. Coloque un pedazo de cebolla sobre un portaobjetos.


2. Coloque un pedazo de papa sobre en portaobjetos.
3. Añada dos gotas de lugol sobre la cebolla y do gotas sobre la papa.
4. Observe el cambio de color. Un color amarillo o café es negativo; azul o negro es
positivo.

EJERCICIO N° 2

A. Prueba de proteínas

El reactivo de Biuret contiene una fuerte solución de hidróxido de sodio o potasio


(NaOH o KOH) y una pequeña cantidad de solución diluida de sulfato de cobre. El
reactivo cambia de color azul a violeta en presencia de una proteína o polipéptido.

Procedimiento

1. Marque tres tubos de ensayo A, B, C.


2. Añada cantidades iguales del reactivo de Biuret en los tres tubos,
aproximadamente 1cm del tubo.
3. Al tubo A añada igual cantidad de agua, al tubo B igual cantidad de albúmina de
huevo y al tubo C igual cantidad de solución de almidón.
4. Registre sus observaciones.

B. Prueba de Aminoácidos

El reactivo de nihydrina produce un color violeta púrpura en la presencia de la mayoría


de aminoácidos. Este experimento probará la presencia de aminoácidos en un medio
de cultivo para bacterias en donde la prueba será positiva.

Procedimiento

1. En un disco de papel filtro (tómelo por los filos), marque con un lápiz en un lado
“cultivo” y en otro “agua”.
2. Con dos pipetas Pasteur diferentes, coloque las respectivas muestras.
3. Deje secar las dos muestras.
4. Coloque una pequeña gota de reactivo de nihydrina al 0,1% y coloque el papel
filtro en un horno para que se seque. Espere de 15 a 20 minutos.
5. Observe los resultados.

EJERCICIO N°3

Lípidos

A. Solubilidad

Procedimiento
1. Marque en un tubo de ensayo a los 2cm y 3cm. Añada agua destilada hasta la
primera marca y añada aceite vegetal hasta la segunda marca.
2. Agite bien el tubo.
3. Observe la dispersión del aceite y la formación de dos capas.

B. Emulsificación

Procedimiento

1. Añada al mismo tubo de ensayo tres gotas de sales biliares.


2. Agite bien el tubo.
3. Observe cómo se distribuye el aceite y compare con lo que observó en el ejercicio
anterior.

C. Prueba de lípidos

Procedimiento

1. Coloque una gota de emulsión preparada anteriormente sobre un portaobjetos


limpio.
2. Añada una pequeña gota de Sudan IV y mescle.
3. Coloque un cubreobjetos y observe.
4. Si se observa todo el campo rojo haga una preparación aparte con emulsión
diluida y menos tinte de Sudan IV.

D. Prueba de tinción

El sudan III detecta los grupos hicrocarbonados libres de un lípido. El tiente y los grupos
hidocarbonados son no polares y se pegan fuertemente en un ambiente polar,
observándose una reacción hidrofóbica.

Procedimiento

1. Coja el papel filtro con pinza para evitar dejar grasa de sus dedos, la grasa
invalidará el experimento.
2. Enumere un disco de papel filtro de la siguiente manera: 1 coco, 2 aceite, 3
aguacate, 4 leche y 5 albúmina. De manera que queden equitativamente
distribuidos alrededor del disco. Haga un círculo pequeño al lado de cada número.
3. En otro disco repita el procedimiento pero coloque 6 agua y 7 etanol.
4. Con una pipeta Pasteur coloque una gota de cada muestra en el sitio
correspondiente del papel filtro.
5. Deje secar completamente.
6. Coloque el disco de papel por tres minutos en la solución de Sudam III.
7. Con una pinza saque el disco de papel del tinte y enjuague con agua por un
minuto.
8. Examine la intensidad de tinción naranja en el disco, de acuerdo a la siguiente
escala:
0= no hay color
+= naranja pálido
++= naranja definido
RESULTADOS ESPERADOS

Al tratarse de varios procedimientos los resultados se encuentran en la descripción de


cada procedimiento.

BIBLIOGRAFÍA

Audesirk, T., Audesirk, G., Byers, B. 2012. Biología. Novena Edición. Pearson Educación
de México, S.A. de C.V., México.

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