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INTRODUCCION

La ciencia y tecnología forman parte integral de todos los procesos de la


ingeniería agroindustrial. Paralelamente, la optimización, innovación e
investigación científica son imprescindibles para el desarrollo continuo en esta
rama de la ingeniería. De esta manera, para estar a la vanguardia de las nuevas
tendencias productivas de la ingeniería agroindustrial es esencial contar con
conocimientos de procesos bioquímicos y biológicos. A partir de aquí nace una
necesidad de carácter urgente de contribuir a la formación científica de esta
ingeniería, y es así que los bioprocesos llegan a ser parte de esta.

De esta forma, los procesos de fermentación están arraigados a la ingeniería de


bioprocesos y entonces es que el crecimiento de los microorganismos son parte
integral de estos procesos fermentativos. Resulta entonces importante el
conocimiento de las condiciones en que estos microorganismos puedan crecer
y optimizar sus productos. Para ello la preparación de medios de cultivo es un
buen punto de partida para conocer sobre su comportamiento así como también
el seguimiento de su cinética. Esto nos proporcionará datos prácticos y exactos
sobre la velocidad y características del crecimiento del microorganismo en
estudio.

La preparación de medios para el desarrollo de procesos de fermentación es una


etapa fundamental para asegurar la productividad de los mismos. Los
componentes de los medios constituyen los efectores externos de naturaleza
química que desempeñan un rol esencial en los procesos ya que deben cumplir
con los requerimientos del crecimiento y de formación de productos y además
suministrar energía para la síntesis de metabolitos y para el mantenimiento
celular. No obstante que los microorganismos varían considerablemente
respecto de los nutrientes que pueden necesitar.

Por esto, en nuestra experiencia realizaremos tres medios, los cuales son
requerimientos indispensables para nuestro objetivo de producción de etanol.
Estos medios son de mantención, que contienen nutrientes como extracto de
levadura, peptona, extracto de malta, agar y glucosa a concentraciones (g/L)
definidas. Medio de activación, conteniendo glucosa, extracto de levadura y
malta, solución de sales. Medio de fermentación, que contiene glucosa, extracto
de levadura, Sulfato de amonio ((NH4)2SO4), Fosfato monopotásico (KH2PO4),
Sulfato de magnesio heptahidratado (MgSO4.7H2O), Solución de sales, Tampón
citrato esto a un pH 4,2 y todo a definidas concentraciones (g/L).

Todos estos medios deben ser operados bajo determinadas condiciones


fermentativas de temperatura, velocidades de agitación, pH y además estrictas
condiciones de asepsia, esterilización de materiales, buenas prácticas de
laboratorio en su conjunto para la manipulación de instrumentos y equipos como
es el caso de los agitadores orbitales como el Shaker, uso del espectrofotómetro,
entendimiento del cromatógrafo de gases, incubadoras, entre otros.
Consecuentemente, evaluación de las cinéticas de crecimiento de la biomasa,
cinética de consumo de la fuente de carbono y de la generación de un alcohol
(etanol).

Es así que para esta práctica nos hemos centrado en el tratamiento de un


microorganismo (Saccharomyces cerevisae ATCC 4126), iniciando desde su
siembra partiendo desde su estado en cepa congelada, para luego sembrarlo en
medio rico, empleando la glucosa como fuente de carbono, procurando su rápida
activación, para que luego de un determinado tiempo podamos sembrar el
microorganismo en un medio y posteriormente sea factible determinar la cinética
de crecimiento de este y la producción de etanol (C2H6O).

De esta forma, el objetivo general del experimento es diseñar y realizar una


experiencia de cultivo celular por lotes en matraces, empleando una cepa de
Saccharomyces cerevisae ATCC 4126, evaluándose el efecto de la fuente de
carbono y la velocidad de agitación en la cinética de crecimiento y la producción
de etanol.

Los objetivos específicos son diseñar y preparar el medio líquido de cultivo,


lograr la activación celular y el desarrollo del inóculo determinar la cinética de
crecimiento de la biomasa, determinar la cinética de consumo de la fuente de
carbono, determinar la cinética de generación de etanol, determinar los valores
de μM, qs y los rendimientos del nutriente limitante en células y en etanol, además
de las respectivas productividades en células y en etanol, evaluar el valor del pH
al inicio y al final de la cinética.