OBJETIVOS RENDIMIENTO

-Aplicar una estrategia para aislar, purificar e identificar al RESULTADOS

glucógeno.
CARACTERIZACIÓN QUÍMICA DEL GLUCÓGENO
METODOLOGÍA

Obtención del glucógeno Prueba Observaciones

Molish +
Biuret -
Extraer
Sacrificar una rata
rápidamente el
Lavar el hígado al Ninhidrina -
con éter chorro del agua
hígado Fehling -
Lugol Rojo
Seliwanoff Lenta color rosa
Pesar y cortar el En un mortero Tabla 1. Caracterización química del glucógeno.
Colocar los pedazos
hígado en previamente
de hígado
pequeños pedazos sumergido
 (+) Prueba positiva
 (-) Prueba negativa

En hielo y añadir
En proporción Añadir aproximada- CARACTERIZACIÓN QUÍMICA DEL GLUCÓGENO
1mL/g de tejido mente 0.5 g de
TCA al 10%
hepático arena HIDROLIZADO

Hidrólisis Ácida Testigo Enzimática

Fehling Precipitado ++ - +
Triturar el hígado
Centrifugar el Durante 5 min. a Lugol - + -
hasta formar una
homogeneizado 2000 rpm
pasta Seliwanoff Lenta Lenta Lenta
Tabla 2. Caracterización química del glucógeno hidrolizado

Decantar el Añadir 2  (+) Prueba positiva

Consenvarndo-lo
sobrenadante en
en hielo
volúmenes de  (-) Prueba negativa
un vaso etanol del 96

Por volumen de Añadir una pizca Colocarlo a baño DISCUSIONES

sobrenadante de NaCl sólido maría a 37 °C
Se realizaron diferentes pruebas al glucógeno para
conocer sus diferentes propiedades
Hasta la Durante 5 min.
formación del
Centrifugar a
Desechar el
-Prueba de molish ésta prueba identifica a las aldosas y
2000 rpm cetosas, la prueba dio positiva observando un color
flóculo sobrenadante
violeta, indicando que el glucógeno se trata de una aldosa
o cetosa.
Precipitar con
Resuspender el Con 5 mL de -Prueba de Biuret ésta prueba identifica enlaces
dos volúmenes
precipitado agua destilada
de etanol al 96% peptídicos, la prueba resultó negativa (no hubo presencia
de color azul), indicando que en la estructura del
glucógeno no hay presencia de enlaces peptídicos.
Centrigugar a
Suspender con la Suspender con la
2000 rpm -Prueba de ninhidrina ésta prueba identifica grupos amino
meno meno
durante 3 min.
libres, da una prueba positiva al observarse un color
amarillo-naranja, al no observar esto en las pruebas se
deduce que el glucógeno no tiene grupos amino libre en
Suspender con la Suspender con la De alcohol sus estructuras
meno menor cantidad absoluto
-Prueba de fehling ésta prueba identifica a los azúcares
reductores, la prueba es positiva al observar un
Dejar que se
Pesar y calcular precipitado rojo, la cual en la prueba del colágeno sin
el rendimiento hidrolizar dio negativa, pero en el hidrolizado la prueba
seque y cristalice
obtenido
resultó positiva, indicando que el glucógeno está
compuesto por la unión de 2 o más azúcares reductores.

-Prueba de lugol (yodo), ésta prueba identifica a los

polisacáridos, si el polisacárido es lineal se obtiene un
color azul, si se obtiene un color rojo se trata de un
polisacárido ramificado, al realizar la prueba sin hidrolizar
resultó que el glucógeno se trata de un polisacárido
ramificado (Color rojo) y en el hidrolizado, resultó negativa
debido a que hubo rompimiento de enlaces y no había
enlaces glucocídicos. En la prueba enzimática se obtuvo
que la prueba era negativa debido a que se utilizó la
amilisa que es una enzima específica que rompe los
enlaces α 1-4 , al romper éstos enlaces no hay
ramificación, y por lo tanto la prueba resulta negativa.

-Prueba de Seliwanoff ésta prueba hace la diferenciación

entre las aldosas y cetosas, si la prueba es rápida y se
obtiene un color rojo se trata de una cetosa, pero si la
aparición del color (rosa) es lenta, se trata de una aldosa,
en la identificación del glucógeno la aparición de color
tardó 1 hora y 7 min, indicando que el glucógeno está
compuesto por aldosas en su estructura.

-Al añadir HCl a la muestra del glucógeno éste rompe a los

enlaces α 1-4 y α 1-6

CONCLUSIONES
Gracias a las pruebas realizadas se deduce que el
glucógeno es un polisacárido ramificado con enlaces α 1-4
en su estructura está compuesta por la unión de azúcares
reductores, se tratan de aldosas (Glucosa)

Imagen 1. Estructura química del glucógeno

BIBLIOGRAFÍA
-Voet D., Voet J. G., Pratt C. W. “Fundamentos de
Bioquímica” Editorial panamericana. Pp 473-476