Ingeniería hidráulica en México, vol. XXII, núm. 2, pp.

113-118, abril-junio de 2007

Nota técnica

Biorremediación de agua doméstica

contaminada con aceite residual automotriz
David García-Hernández
Carlos Rubén Sosa-Aguirre
Juan Manuel Sánchez-Yáñez

Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo, México

Un problema ambiental grave en México y el mundo es la contaminación de agua doméstica con

derivados de hidrocarburos (HC), como el aceite residual automotriz (ARA). La bioestimulación de los
microorganismos nativos de ese sitio por el enriquecimiento con nutrientes esenciales puede inducir
la mineralización de los HC del ARA. En el presente trabajo se evaluó la bioestimulación de la micro-
biota nativa del agua doméstica de un taller de lavado y engrasado de automóviles, enriquecida con
una solución mineral (SM), la que aumentó la producción de CO2 en treinta veces, al mineralizar los
HC alifáticos del ARA de entre C11-C20 hasta en un 96% en 21 días, en comparación con el agua usa-
da como control. En conclusión, la bioestimulación es viable como estrategia de recuperación de
agua doméstica contaminada con ARA.

Palabras clave: bioestimulación, alifáticos, microbiota, sales minerales.

que inducen a los microorganismos nativos de esos am-

bientes a la mineralización de los HC (Atlas, 1997; Duar-
Antecedentes

La contaminación de agua con mezclas complejas de
HC, producto de la industria petroquímica como el ARA,
es un problema que requiere una pronta solución, en es-
pecial por la creciente escasez de agua. En México, el
ARA es generado durante el ciclo de lubricación de mo-
tores de automóviles y cambio de aceite que se arroja al
drenaje en los talleres mecánicos, lo que causa la con-
taminación de agua superficial y de los acuíferos (Ubi-
ratan, 2002), a pesar de que la normatividad de la Se-
cretaría del Medio Ambiente y Recursos Naturales
(Semarnat) obliga a su confinamiento, según la Ley Ge-
neral del Equilibrio Ecológico y Protección al Ambiente
(1996) y la NOM-055-ECOL-(Semarnat, 1996; Sedesol/
INE,1993).
El ARA es una mezcla de HC: alifáticos, aromáticos,
policíclicos, clorohalogenados y metales pesados (Pot-
ter y Simmons, 1998). Algunos de éstos son tóxicos en
el ambiente y/o mutagénicos para cualquier forma de
vida (Glazer y Nikaido, 1998).
Una alternativa de solución para minimizar su negati-
vo impacto ambiental es la bioestimulación de suelos y
aguas contaminados con HC por enriquecimiento con
nutrientes esenciales con base en nitrógeno y fósforo
te y Gomes-Ferreira, 2000; Márquez-Rocha et al., 2001).
Así, la bioestimulación se ha usado con éxito en la elimi-
nación de HC contaminantes de sedimentos marinos
(Röling et al., 2002).
En general, en el ambiente, la inducción de la activi-
dad biológica natural con nutrientes para la mineraliza-
ción de los HC está ampliamente documentada (Piehler
y Paerl, 1996; Margesin y Schinner, 2001). No obstante,
existen pocos reportes sobre la biorremediación de agua
doméstica con ARA. Al respecto, un factor limitante en la
eliminación de ese tipo de HC es la concentración del
oxígeno disponible (Atlas, 1997; Plohl et al., 2002), mien-
tras que la solubilidad de los HC determinan su disponi-
bilidad a los agentes biológicos. En general, se reporta
que tanto la adición de oxígeno como de un detergente
a baja concentración aumenta la solubilidad de los HC y
favorece su oxidación por vía biológica (Mahro et al.,
2001; Christofi e Ivshina, 2002; Wongsa et al., 2004). Sin
embargo, sobre la dinámica de la biorremediación de
agua contaminada con ARA, la información es mínima.
Los objetivos de este proyecto fueron los siguientes:
a) establecer el efecto de una solución mineral sobre los
consorcios microbianos en agua doméstica en la mine-

113
 García-Hernández, D. et al., Biorremediación de agua doméstica contaminada con aceite residual automotriz
ralización de HC alifáticos del ARA; b) determinar la den-
sidad de los microorganismos oxidadores de HC alifáti-
cos e identificar los dominantes; c) evaluar el efecto de
una solución mineral y del H2O2 sobre la microbiota na-
tiva oxidante de HC alifáticos del ARA; d) analizar el efec-
to de consorcios microbianos y un extracto fúngico de
Pleurotus florida en la eliminación de hidrocarburos aro-
máticos del ARA en agua doméstica, y e) demostrar que
cultivos axénicos y mezclas de microorganismos del
agua doméstica tienen capacidad de mineralizar HC ali-
fáticos del ARA.
El presente trabajo describe los resultados de la
biorremediación de la microbiota del agua doméstica
con ARA mediante enriquecimiento con una SM.
Materiales y métodos
Agua doméstica enriquecida con la SM
En esta etapa del trabajo se utilizaron como microcos-
mos matraces Bartha de 500 ml con 100 ml de ARA dilui-
do 1:100, procedente de un taller de lavado y engrasado
de automóviles, que se enriquecieron con una SM: 28
mM K2HPO4, 29 mM KH2PO4, 25 mM MgSO4, 125 mM
NH4NO3, 10 mM CaCO3, 26 mM KCl, 3 mM ZnSO4, 3 mM
CuSO4, 1.3 mM FeSO4, 21 mM EDTA, pH 6, 0.01% (p/v)
de tween 20, como se describe previamente (Leal,
2003), matraces tipo Bartha se agitaron a 100 rpm y se
incubaron a 30º C durante tres semanas, luego se deter-
minó la mejor temperatura y tiempo de la biorremedia-
ción del agua con ARA mediante un gradiente de tem-
Cuadro 1. Diseño experimental para determinar el efecto del
enriquecimiento con una solución mineral sobre la microbiota
nativa del agua doméstica en la mineralización de los HC del
ARA.
Factores Tratamientos
Muestra Control Control Control
problema relativo estéril absoluto
ARA* * *
ARA estéril * HC del ARA, previo a su oxidación por bioestimulación
Agua destilada *
Sol mineral** * * *
Tween 20: 0.01% * * * *
Agitación: 100 rpm * * * *
* ARA: agua doméstica con aceite residual automotriz.
** Sol. mineral: 28 mM K2HPO4, 29 mM KH2PO4, 25 mM MgSO4, 125 mM
NH4NO3, 10 mM CaCO3, 26 mM KCI, 3 mM ZnSO4, 3 mM CuSO4, 1.3 mM FeSO4,
21 mM EDTA, pH6, 0.01% (p/v) de tween 20.
Para la validación de los resultados y las diferencias estadísticas entre los
tratamientos se empleó la prueba de Tukey (P<0.05). Todos los tratamientos se
realizaron por cuadruplicado.
114 ingeniería hidráulica en méxico /abril-junio de 2007
peratura sobre los microorganismos nativos a la máxima
mineralización de los HC alifáticos del ARA en agua do-
méstica, medido por la liberación de CO2. En el cuadro 1
se indica el diseño experimental usado en esta etapa del
trabajo, en el que se explica que los controles experimen-
tales utilizados fueron un matraz Bartha con agua domés-
tica con ARA diluida sin la SM, como relativo; un matraz
con agua destilada enriquecido con la SM, como absolu-
to, y un matraz con agua doméstica con ARA diluida con
la SM, esterilizado a 121º C/15 min, como un control
estéril. Para cuantificar la producción de CO2, en uno de
los brazos del matraz Bartha se agregaron 10 ml de 0.1N
KOH cada 24 horas durante 21 días; se determinó por
titulación con 0.1 N HCl el alcali remanente (Leal, 2003).
Análisis de los hidrocarburos alifáticos del ARA en el agua
doméstica
En el caso de la técnica empleada para la medición de
la desaparición de los HC del ARA en el agua doméstica
se usó un cromatógrafo de gases Hewlett-Packard serie
6890, acoplado a un espectrofotómetro de masas serie
5792 A, con una columna capilar HP-5MS de 30 m de
longitud, con un diámetro interno de 0.25 mm y un espe-
sor de película de 0.25 mm. La inyección fue modo split,
el gas de acarreo fue helio, con velocidad de flujo de
37 cm·seg-1, la temperatura del horno fue de 40º C por
ocho minutos, con un incremento a 180º C, a velocidad
de 6º C·min-1, la temperatura del inyector fue de 250º C,
acorde con el método modificado de Plohl et al., 2002.
Resultados y discusión
El ARA es una mezcla compleja de HC alifáticos, aromá-
ticos, aromáticos policíclicos, halogenados y metales
pesados, entre otros componentes (Potter y Simmons,
1998). En esta investigación se analizó específicamente
el efecto de una SM en la bioestimulación de la microbio-
ta del agua doméstica en la mineralización de los HC ali-
fáticos del ARA.
En la ilustración 1a se muestra el perfil de los com-
puestos desde 12 hasta 20 átomos de carbono de los
de la microbiota nativa del agua doméstica, en donde se
observó que la biorremediación fue dependiente del
equilibrio nutricional con base en el nitrógeno, el fósforo
de la SM y el carbono orgánico disponible de los HC del
ARA (Atlas, 1997; Atlas y Bartha, 2004). En la ilustración
1c se presenta el efecto del enriquecimiento de la SM
sobre los consorcios microbianos que estimuló drástica-
mente la mineralización de esos HC alifáticos del ARA
con cadenas entre 11-20 carbonos; mientras que en la
 García-Hernández, D. et al., Biorremediación de agua doméstica contaminada con aceite residual automotriz

Ilustración 1. Perfil cromatográfico del efecto de la bioestimula- Ilustración 2. Efecto de la bioestimulación con una solución
ción de una solución mineral sobre la microbiota del agua do- mineral sobre la microbiota para la eliminación de los HC alifáti-
méstica en la mineralización de los HC alifáticos del aceite resi- cos en el agua doméstica con aceite residual automotriz. Estas
dual automotriz; (a) control al tiempo 0 del experimento sin SM, mediciones fueron tomadas al final del tratamiento de 21 días.
(b) muestras a los 21 días sin SM, y (c) con SM (c). C11-C20 =
hidrocarburos alifáticos de 11 hasta veinte átomos de carbono.
10
Abundancia
a) 9
C17
1,600,000 C16
1,500,000 8
1,400,000
1,300,000 C15 C18 7
1,200,000
1,100,000 6
1,000,000 C14
C19 %HC alifáticos
900,000
800,000 residuales 5
700,000 C13 C20 del ARA
600,000 4
500,000
400,000 C12
300,000
3
200,000 C11
100,000 2
0
Tiempo 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 1

Abundancia 0
C17 b) C11 C12 C13 C14 C15 C16 C17 C18 C19 C20
1,600,000 C16
1,500,000
1,400,000 ARA sin SM ARA + SM
1,300,000 C15 C18
1,200,000
1,100,000

presenta que entre los consorcios microbianos del agua

1,000,000 C14
C19
900,000

doméstica existe una evidente diversidad bioquímica, ya

800,000
700,000 C13

que se eliminaron los HC alifáticos del ARA de cadenas

C20
600,000
500,000

de entre 11-20 carbonos en un 96% en los 21 días de du-

400,000 C12

ración del experimento. Lo que reafirma lo anterior, es

300,000
200,000 C11

que en esta condición del ensayo, los alifáticos de cade-

100,000
0

na corta de entre C11 y C12 se oxidaron en un 100%,

Tiempo 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00

mientras que los HC alifáticos restantes dominantes, el

Abundancia
c)
hexadecano, el heptadecano y el octadecano, se mine-
1,600,000
1,500,000

ralizaron en un 96%.
1,400,000
1,300,000
1,200,000
1,100,000
1,000,000
900,000
800,000 Ilustración 3. Efecto del enriquecimiento con una SM sobre la
700,000
600,000 microbiota nativa en la producción de CO2 por la mineralización
500,000 del ARA en agua doméstica. El ensayo se realizó como se men-
400,000
C16 ciona en materiales y métodos. Letras diferentes son estadís-
300,000
C15 C17
200,000
100,000
C13 C14 C18 C19 C20 ticamente significativas, letras iguales no son estadísticamente
0 significativas (Tukey: P<0.05%).
Tiempo 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00

ilustración 1b se muestra que sin la adición de la SM, la 3.5

microbiota en el agua doméstica no fue estimulada para 3

la oxidación de los HC del ARA, ello sugiere que tampo-
co hubo una degradación abiótica de la mezcla de los
2.5

alifáticos. Estos resultados fueron concordantes con

mmoles 2

los reportados por Plohl et al. (2002) sobre el efecto de

CO2/ml
1.5

la bioestimulación con una SM de la cepa AL-12 aislada 1 b

de un depósito de materia orgánica en Eslovenia en la

c c c
0.5
mineralización de HC alifáticos en un medio de cultivo
acuoso en el laboratorio, en donde no se detectó la de-
0
ARA + agua ARA + tween 20 ARA + SM
gradación abiótica de los alifáticos. En la ilustración 2 se Agua + SM ARA estéril + SM

ingeniería hidráulica en méxico /abril-junio de 2007 115

 García-Hernández, D. et al., Biorremediación de agua doméstica contaminada con aceite residual automotriz
En la ilustración 3 se muestra que la microbiota del
agua doméstica enriquecida con la SM oxidó los HC
alifáticos del ARA, lo cual se midió indirectamente por la
producción de CO2, que alcanzó una máxima concentra-
ción de 3.5 mmoles·ml-1, en contraste con la microbiota
en el agua doméstica que, sin enriquecer con la SM, no
oxidó esos HC del ARA; en consecuencia, la generación
de CO2 fue apenas de 0.56 mmoles·ml-1. Estos datos
fueron consistentes con los obtenidos por el análisis de
cromatografía de gases acoplado a masas, que mostra-
ron la desaparición de los HC alifáticos cuando el agua
doméstica se enriqueció con la SM, lo cual hace eviden-
te que la biorremediación (eliminación de los HC) de
esta clase de agua requiere de un equilibrio nutricional
que la SM proporcionó a la microbiota para la minerali-
zación de los HC del ARA.
Conclusión
La microbiota del agua doméstica, estimulada con el en-
riquecimiento de la SM, mineralizó los HC alifáticos del
ARA, probablemente porque favoreció el equilibrio de
nutrientes en la relación N, P, C, pues en esta condición
experimental no se observó degradación del ARA en el
agua doméstica sin tratar con la SM, como tampoco por
procesos abióticos. Estos resultados apoyan que la bio-
estimulación es una estrategia viable en el tratamiento
de agua doméstica contaminada con aceite residual au-
tomotriz, al comprobarse una mineralización de más del
95% de los HC alifáticos.
Los resultados referentes a los otros objetivos seña-
lados en esta investigación serán dados a conocer en un
siguiente artículo, actualmente en preparación.
Agradecimientos
Al proyecto 2.7 de la CIC-UMSNH (2005-2006) por el apoyo para la
realización de esta investigación. Agradecemos la valiosa participación
de la bióloga Yolanda García Rodríguez en el análisis de HC alifáticos.
Recibido: 25/01/2006
Aprobado: 16/11/2006
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ingeniería hidráulica en méxico /abril-junio de 2007 117

 García-Hernández, D. et al., Biorremediación de agua doméstica contaminada con aceite residual automotriz

Abstract

GARCÍA-HERNÁNDEZ, D., SOSA-AGUIRRE, C.R. & SÁNCHEZ-YÁÑEZ, J.M. Bioremediation of domestic sewage
polluted with waste motor oil. Hydraulic engineering in Mexico (in Spanish). Vol. XXII, no. 2, April-June, 2007,
pp. 113-118.

One of the greatest environmental problems in Mexico and the world is pollution of domestic sewage with hydro-
carbon derivatives (HC), such as waste motor oil (WMO). Sewage enrichment with essential nutrients for native
microbes or biostimulation induces the mineralization of WMO. This paper evaluates bioestimulation on sewage
from car wash and paint workshops enriched with a mineral solution (MS). Sewage microbiote biostimulated with
MS increased CO2 production 30 times when compared with control water by mineralizating up to 96% of aliphat-
ic HC C11-C20 from WMO in 21 days. In conclusion, biostimulation is a viable strategy for waste water treatment
polluted with WMO.

Keywords: biostimulation, aliphatic HC, microbiote, mineral salts.

Dirección institucional de los autores:

M.C. David García-Hernández

Estudiante de doctorado.
Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo,
Instituto de Investigaciones Químico-Biológicas,
Laboratorio de Microbiología Ambiental,
Ciudad Universitaria, edificio B-3, 58060 Morelia, Michoacán, México,
teléfonos: + (52) (443) 326 5788 y 323 4605,
fax: + (52) (443) 326 5788,
dasahim@hotmail.com,
dburron_01@yahoo.com.mx

Dr. Carlos Rubén Sosa-Aguirre

Profesor investigador.
Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo,
Instituto de Investigaciones Químico-Biológicas,
Laboratorio de Microbiología Ambiental,
Ciudad Universitaria, edificio B-3, 58060 Morelia, Michoacán, México,
teléfonos: + (52) (443) 326 5788, extensión 121,
fax: + (52) (443) 326 5788,
rsosa@umich.mx

Dr. Juan Manuel Sánchez-Yáñez

Profesor investigador.
Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo,
Instituto de Investigaciones Químico-Biológicas,
Laboratorio de Microbiología Ambiental,
Ciudad Universitaria, edificio B-3, 58060 Morelia, Michoacán, México,
teléfonos: + (52) (443) 326 5788, extensiones 109 y 128,
fax: + (52) (443) 326 5788,
syanez@umich.mx

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