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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA


CARRERA DE INGENIERÍA QUÍMICA
LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL

PRÁCTICA 2

MICROSCOPÍA

RESUMEN

Se conoció e identificaron las partes de un Microscopio compuesto y sus funciones. Para lo


cual se realizó una explicación detallada de las partes que conforman un microscopio,
posteriormente se prepararon diferentes tipos de preparaciones fijas y preparaciones frescas
para observar en el microscopio la estructura molecular de dichas muestras, adquiriendo
habilidades en la utilización eficiente del Microscopio al observar la diferencia de apreciación
según el juego de lentes ocupado. Determinando que a mayor intensidad en la capacidad del
lente se puede apreciar con mayor claridad la estructura de los microorganismos y lo que se
encuentra dentro de la muestra.

PALABRAS CLAVES:

MICROSCOPIO/MICROORGANISMOS/PREPARACIONES_FIJAS/PREPARACIONES
_FRESCAS
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1. OBJETIVOS
 Conocer e identificar las partes de un Microscopio compuesto y sus funciones.
 Adquirir habilidades en la utilización eficiente del Microscopio.
 Observar en el microscopio compuesto preparaciones fijas y preparaciones
frescas.

2. TEORÍA
2.1. Tipos de microscopio.

1) Microscopio óptico
la muestra es iluminada mediante luz visible. Este es el tipo de microscopio más habitual pero
su resolución está limitada por la difracción de la luz. El aumento máximo que se puede obtener
con este tipo de microscopio alcanza alrededor de 1500x.
2) Microscopio electrónico
la muestra no es iluminada con luz sino que se utilizan electrones. Los electrones impactan
contra la muestra dentro de una cámara de vacío
3) Microscopio de luz ultravioleta
Iluminan la muestra, como el nombre indica, con luz ultravioleta. Este tipo de luz tiene una
longitud de onda más corta que la luz visible utilizada en los microscopios ópticos.
4) Microscopio de luz polarizada
También conocido como microscopio petrográfico. Este microscopio es en realidad un tipo de
microscopio óptico al que se la han añadido dos polarizadores.
5) Microscopio de fluorescencia
Los microscopios de fluorescencia son aquellos que utilizan las propiedades de fluorescencia
para generar una imagen de la muestra. Este microscopio permite observar sustancias que
emiten luz propia cuando son iluminadas con una longitud de onda determinada
2) Microscopio de campo oscuro
Esta técnica de microscopía consiste en iluminar la muestra oblicuamente. De este modo los
rayos de luz que llegan al objetivo no provienen directamente del foco de luz sino que han sido
dispersados primero por la muestra. Esta técnica permite ver muestras que de otro modo no
serían visibles debido a su transparencia.
3) Microscopio de contraste de fases
La luz viaja a distintas velocidades dependiendo del medio de propagación. Esta propiedad es
utilizada en el microscopio de contraste de fases ya que la luz atraviesa la muestra con distintas
velocidades en distintas secciones. Este efecto es amplificado para generar la imagen de la
muestra.
(Programa de Afiliados de Amazon EU, 2000)
2.2. Microscopio óptico
2.2.1. Sistema óptico.
El sistema óptico incluye todos los elementos necesarios para generar y desviar la luz
en las direcciones necesarias y así acabar generando una imagen aumentada de la
muestra.

Foco o fuente de luz: Este es un elemento esencial que genera un haz de luz dirigido
hacia la muestra. En algunos casos el haz de luz es primero dirigido hacia un espejo
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que a su vez lo desvía hacia la muestra. La posición del foco en el microscopio


depende de si se trata de un microscopio de luz transmitida o de luz reflejada.
Condensador: El condensador es el elemento encargado de concentrar los rayos de
luz provenientes del foco a la muestra. En general, los rayos de luz provenientes del
foco son divergentes. El condensador consiste en un seguido de lentes que cambian
la dirección de estos rayos de modo que pasen a ser paralelos o incluso convergentes.
Diafragma: El diafragma es un pieza que permite regular la cantidad de luz
incidente a la muestra. Normalmente se encuentra situado justo debajo la platina.
Regulando la luz incidente es posible variar el contraste con el que se observa la
muestra. El punto óptimo del diafragma depende del tipo de muestra observada y de
su transparencia.
Objetivo: El objetivo es el conjunto de lentes que se encuentran más cerca de la
muestra y que producen la primera etapa de aumento. El objetivo suele tener una
distancia focal muy corta. En los microscopios modernos distintos objetivos están
montados en el revólver. Este permite seleccionar el objetivo adecuado para el
aumento deseado. El aumento del objetivo junto con su apertura numérica suele estar
estar escrito en su parte lateral.
Ocular: Este es el elemento óptico que proporciona la segunda etapa de ampliación
de imagen. El ocular amplia la imagen que ha sido previamente aumentada mediante
el objetivo. En general, el aumento aportado por el ocular es inferior al del objetivo.
Es a través del ocular que el usuario observa la muestra. En función del número de
oculares se puede distinguir entre microscopios monoculares, binoculares e incluso
trinoculares. La combinación de objetivo y ocular determina el aumento total del
microscopio.
Prisma óptico: Algunos microscopios incluyen también prismas en su interior para
corregir la dirección de la luz. Por ejemplo, esto es imprescindible en el caso de los
microscopios binoculares, donde un prisma divide el haz de luz proveniente del
objetivo para dirigirlo hacia dos oculares distintos. (RNS, 1979)
2.2.2. Sistema mecánico.
Dentro del sistema mecánico se incluyen todos los elementos estructurales que dan
estabilidad al microscopio y mantienen los elementos ópticos correctamente
alineados.
Base o pie: Es la pieza que se encuentra en la parte inferior del microscopio y sobre
la cual se montan el resto de elementos. Acostumbra a ser la parte más pesante para
proporcionar suficiente equilibrio y estabilidad al microscopio. Es habitual que
incluya algunos topes de goma para evitar que el microscopio se deslice sobre la
superficie donde se encuentra.

Brazo: El brazo constituye el esqueleto del microscopio. Es la pieza intermedia del


microscopio que conecta todas sus partes. Principalmente conecta la superficie donde
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se coloca la muestra con el ocular por donde ésta se puede observar. Tanto las lentes
del objetivo como del ocular se encuentran también conectadas al brazo del
telescopio.
Platina: Esta es la superfície donde se coloca la muestra que se quiere observar. Su
posición vertical con respecto a las lentes del objetivo se puede regular mediante dos
tornillos para generar una imagen enfocada. La platina tiene un agujero en el centro a
través del cual se ilumina la muestra. Generalmente hay dos pinzas unidas a la
platina que permiten mantener la muestra en posición fija.
Pinzas: Las pinzas tienen la función de mantener fija la preparación una vez esta se
ha colocado sobre la platina.
Tornillo macrométrico: Este tornillo permite ajustar la posición vertical de la
muestra respecto el objetivo de forma rápida. Se utiliza para obtener un primer
enfoque que es ajustado posteriormente mediante el tornillo micrométrico
Tornillo micrométrico: El tornillo micrométrico se utiliza para conseguir un
enfoque más preciso de la muestra. Mediante este tornillo se ajusta de forma lenta y
con gran precisión el desplazamiento vertical de la platina.
Revólver: El revólver es una pieza giratoria donde se montan los objetivos. Cada
objetivo tiene proporciona un aumento distinto, el revólver permite seleccionar el
más adecuado a cada aplicación. Habitualmente el revólver permite escoger entre
tres o cuatro objetivos distintos.
Tubo: El tubo es una pieza estructural unida al brazo del telescopio que conecta el
ocular con los objetivos. Es un elemento esencial para mantener una correcta
alineación entre los elementos ópticos. (Programa de Afiliados de Amazon EU,
2000)

2.3. Poder de resolución.


El poder de resolución está determinado en parte por la longitud de onda de la radiación
empleada para iluminar el espécimen y es inversamente proporcional a la misma, es decir,
a menor longitud de onda, mayor poder de resolución. El haz de electrones puede tener
longitudes de onda variables, las cuales influyen en el límite de resolución que a su vez
dependerá del voltaje empleado para acelerar los electrones.
Voltaje de Longitud de onda Limite de resolución
Aceleración (kV) (Å) teórico (Å)
10 0.122 (0.122nm) 3.7 (0.37nm)
20 0.086 (0.0086nm) 2.9 (0.29nm)
50 0.054 (0.0054nm) 2.1 (0.21nm)
100 0.037 (0.0037nm) 1.7 (0.17nm)
200 0.025 (0.0025nm) 1.3 (0.13nm)
500 0.014 (0.0014nm) 0.9 (0.9nm)
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1000 0.009 (0.0009nm) 0.7 (0.07nm)

Tabla2.3-1 Relación del voltaje de aceleración, la longitud de onda del haz de electrones
y el poder de resolución en el microscopio electrónico de transmisión expresadas en
kilovoltios (kV), angstroms (Å) y nanómetros (nm). Modificado de Sjöstrand F. (1967).
Electron Microscopy of Cells and Tissues. Vol. 1, Instrumentation and Techniques (14).
Con el microscopio electrónico se puede alcanzar una resolución de aproximadamente 40.000
veces más que el poder de resolución del microscopio de luz y 2 x 106 veces el poder de
resolución del ojo humano.
(F, 1967)

2.4. Preparaciones frescas y fijas

Preparación fija Se coloca una suspensión homogénea de microorganismos en una gota de agua
sobre el portaobjetos y se fija (mediante calor o agentes químicos) y después se tiñen mediante
diferentes técnicas. Estas preparaciones se observan sin cubreobjetos y, habitualmente, con
objetivos de inmersión.
Preparación en fresco es aquel que no precisa un tratamiento en el que se maten las células,
como es la fijación o la inclusión. No presenta dificultades añadidas a las de cualquier técnica
microscópica, pero sí que requiere la máxima limpieza. (Universidad de España, 2006)
3. PARTE EXPERIMENTAL
3.1. Material y Equipos
 Microscopio óptico.
 Preparaciones fijas.
 Portaobjetos y cubreobjetos.
 Papel milimetrado.
 Pipeta.
 Lanceta
 Toallas de papel absorbente
 Picetas

3.2. Sustancias y reactivos


 Aceite de inmersión.
 Sangre
 Cabello
 Agua estancada
 Preparaciones fijas
 Alcohol
 Agua
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3.3. Procedimiento
3.3.1. Preparaciones fijas.
3.3.1.1.Coloque una gota de agua en el portaobjetos.
3.3.1.2.Coloque un trozo de papel milimetrado y cubra la preparación.
3.3.1.3.Situé la placa sobre la platina sujetándola con las pinzas.
3.3.1.4.Precise la observación ajustando tanto el ajustador macrométrico y micrométrico
3.3.1.5. Observe con los lentes de 4x y 10x. Realice el cálculo del poder de resolución con
el lente de mayor aumento.
3.3.1.6.Grafique la observación.
3.3.1.7.Para la placa fija:
3.3.1.8.Enfocar las preparaciones fijas con los lentes 10x y 40x y observar.
3.3.1.9.Colocar una pequeña gota de aceite de inmersión sobre el frotis y observar con el
lente 100x, precaución de no tocar con el aceite los otros lentes.
3.3.1.10. Graficar lo observado
3.3.2. Preparaciones frescas.
3.3.2.1. Para el cabello ponga una gota de agua en el portaobjetos junto con el papel
milimetrado y coloque el trozo de cabello.
3.3.2.2.Cubra y observe con el lente de mayor aumento.
3.3.2.3.Calcule y anote el grosor del cabello en micras.
3.3.2.4. Para la sangre.
3.3.2.5.Desinfecte la zona, con mucho cuidado pinche una yema del dedo y con ayuda de la
pipeta tome una muestra de sangre.
3.3.2.6.Coloque inmediatamente en el portaobjetos y coloque el cubreobjetos sin formar
burbujas.
3.3.2.7.Observe con los diferentes lentes de aumento, analice las diferencias y grafique.
3.3.2.8.Realizar el mismo procedimiento de la sangre para el agua estancada.

4. DATOS
4.1 Datos Experimentales

Tabla 1. Datos Experimentales

Lente AN Λ
10 0.25 600mm
40 0.65 600
100 1.25 600

5. CÁLCULOS.
𝟎,𝟔∗𝝀
𝑷𝑹 = Ec. 5-1
𝑨𝑵
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𝟎,𝟔∗𝟔𝟎𝟎
𝑷𝑹 = =1440
𝟎.𝟐𝟓

𝟎, 𝟔 = 𝐶𝑜𝑒𝑓𝑖𝑐𝑖𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑛𝑢𝑚é𝑟𝑖𝑐𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑙𝑜𝑛𝑔𝑢𝑖𝑡𝑢𝑑 𝑑𝑒𝑙 𝑡𝑢𝑏𝑜 ó𝑝𝑡𝑖𝑐𝑜


𝝀 = 𝐿𝑜𝑛𝑔𝑖𝑡𝑢𝑑 𝑑𝑒 𝑜𝑛𝑑𝑎
𝑨𝑵 = 𝐴𝑝𝑒𝑟𝑡𝑢𝑟𝑎 𝑛𝑢𝑚𝑒𝑟𝑖𝑐𝑎.
6. RESULTADOS
Tabla 2. Poder de resolución.
Lente PR
10 1440
40 553.85
100 288

Tabla 3. Observaciones.
Muestra Observación
Placa Fija 4x No se tuvo una
observación fija
más que una luz
10x Se observó
claramente los
microorganismos
que se encontraban
en esta placa que
ya se encontraba
preparada
Cabello Grosor cabello: el grosor del cabellos se
observó en el papel milimetrado y el
grosor fue de 0.5milimetros

Agua estancada 4x Se observó una luz


y no tan claro en la
muestra
10x Se observó más
claro la aparición
de seres
unicelulares

40x Se observó más


claramente la vida
de protozoos
gracias a la
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observación en el
microscopio

Sangre 4x Se observa una luz


con poca
visibilidad de
glóbulos rojos

10x Se observó
glóbulos rojos con
poca diferencia con
su entorno
40x Se pudo observar
los Globulos rojos
con una excelente
definición y
diferenciar su color

7. DISCUSIÓN

El método cuantitativo utilizado en la práctica de laboratorio para el análisis de las partes


del microscopio fue correcto, ya que se determinó experimentalmente el funcionamiento
de este dispositivo vital para el trabajo de laboratorio en biotecnología, no se encontraron
errores sistemáticos ni aleatorios, sin embargo es acertado mencionar que la funcionalidad
en la apreciación visual de la muestra es directamente proporcional al juego de lentes
utilizado, ya que si es necesario observar minuciosamente la forma de los microorganismos
se debe utilizar el lente de mayor aumento, mientras que si se desea tener una idea global
de la cantidad de microorganismos presentes en la muestra se puede utilizar lentes de menor
capacidad. Es recomendable para una próxima experimentación preparar más tipos de
muestras de microorganismos para comparar de mejor manera el funcionamiento del
microscopio.

8. CONCLUSIONES
8.1. Los lentes ópticos de mayor resolución permite observar con mejor claridad la estructura
de los microorganismos ya que el aumento que tiene el objetivo permite el análisis
minucioso de este.
8.2. El enfoque que se puede observar por el ocular generalmente tiene un aumento de 10x,
esto se verifica según lo observado y se ve reflejado en la tabla de observaciones
sustentando la teoría ya que se evidenció experimentalmente.
8.3. Para observar correctamente las muestras se debe multiplicar el tamaño del ocular por
cada aumento de los objetivos.

9. APLICACIONES
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10. CUESTIONARIO.
10.1. Iluminación por el método de Köhler
La iluminación Köhler fue la primera descrita por August Köhler en 1893, y aun es la aceptada (casi
exclusivamente) como el método de iluminación en los microscopios modernos. La iluminación Köhler
elimina la iluminación dispareja en el campo de observación para que todas las partes de la fuente de luz
contribuyan a la iluminación del espécimen. Existen dos tipos de iluminación Köhler, un método en el cual
la luz es transmitida a través del espécimen (transmitida) y otro método cuando la luz es reflejada desde el
espécimen (incidente). La iluminación Köhler transmitida es usada para especimenes transparentes o
semitransparentes, mientras que la iluminación Köhler incidente es útil para objetivos como el metal, los
cuales no transmiten luz.

La iluminación Köhler requiere un lente colector en o cercano a la caseta lámpara que pueda ser ajustado
para enfocar la imagen del filamento de la lámpara al frente del plano focal del condensador donde se
posiciona el diafragma de apertura. Si la imagen del filamento de la lámpara esta centrado apropiadamente
y llena por completo la apertura, la iluminación del plano del espécimen es brillante y uniforme. Para
asegurar que el filamento de la imagen aparezca en plano focal del condensador, la altura del condensador
debe ser ajustada con frecuencia. Este es un ajuste crítico que junta los dos conjuntos de planos conjugados
(referidos como el conjunto de campo y el conjunto de apertura) en ubicaciones físicas precias dentro del
tren óptico del microscopio, y maximiza el desempeño del microscopio.

10.2. Cuando utilizó el microscopio, ¿las imágenes se observaron derechas o invertidas?


Este proceso de aumento se puede explicar en base a la naturaleza de las lentes, que no son más
que cuerpos con la capacidad de desviar los rayos de luz. En el caso de las lentes convergentes,
los rayos que inciden de forma paralela son desviados de modo que convergen en un punto llamada
foco por esta razón la imagen de la ve alrevez para que la visión lo pueda acomodar y observar de
la manera correcta.

10.3. Cuando movió el tornillo hacia la derecha, izquierda, abajo y arriba, ¿hacia dónde se
desplazó la imagen?
Tornillo macrométrico: Este tornillo permite ajustar la posición vertical de la muestra respecto el objetivo
de forma rápida. Se utiliza para obtener un primer enfoque que es ajustado posteriormente mediante el
tornillo micrométrico
Tornillo micrométrico: El tornillo micrométrico se utiliza para conseguir un enfoque más preciso de la
muestra. Mediante este tornillo se ajusta de forma lenta y con gran precisión el desplazamiento vertical de
la platina.

10.4. ¿Por qué razón las muestras que se observan en el microscopio compuesto deben ser
delgadas y utilizar un medio de montaje?
Se debe a que las muestras deben ser lo mas finas posibles para que la luz las atraviese, y asi
puedan ser observadas a través del ocular.
El uso de un medio de montaje es necesario para fijar las preparaciones, evitando que se desplacen,
y localizar fácilmente la zona que queremos observar

10.5. Explique las razones porque NO deben tocarse los lentes de un microscopio con los
dedos. Investigue sobre las buenas prácticas en el uso de microscopio.
10.6. Investigue sobre los diferentes tipos de microscopios y su utilización.
1) Microscopio óptico
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En el microscopio óptico la muestra es iluminada mediante luz visible. Esto significa que existe
un foco de luz apuntando hacia la muestra. Esa misma luz es conducida a través del objetivo y
del ocular hasta llegar a formar la imagen en el ojo del observador. Este es el tipo de microscopio
más habitual pero su resolución está limitada por la difracción de la luz. El aumento máximo que
se puede obtener con este tipo de microscopio alcanza alrededor de 1500x.

Figura1: Muestra en un microscopio óptico


2) Microscopio electrónico
la muestra no es iluminada con luz sino que se utilizan electrones. Los electrones impactan
contra la muestra dentro de una cámara de vacío. Existen diferentes tipos de microscopio
electrónico pero su principio de funcionamiento se basa siempre en capturar los electrones
dispersados u omitidos por la muestra y así poder reconstruir una imagen.
La ventaja principal de este tipo de microscopio es que puede obtenerse un nivel de aumento
muy superior al del resto de microscopios. Sin embargo, es necesario preparar la muestra y
colocarla en una cámara de vacío de modo que no es posible observar muestras biológicas vivas.
Los dos tipos de microscopio electrónicos principales son el microscopio electrónico de
barrido y el microscopio electrónico de transmisión.

Figura 2:Muestra observada en un microscopio electrónico


3) Microscopio de luz ultravioleta
Iluminan la muestra, como el nombre indica, con luz ultravioleta. Este tipo de luz tiene una
longitud de onda más corta que la luz visible utilizada en los microscopios ópticos. La ventaja
principal de utilizar esta técnica es que puede alcanzarse una resolución mejor que con luz
visible. Además, el contraste obtenido en la muestra es distinto que en los microscopios ópticos.
De este modo, con el microscopio de luz ultravioleta pueden observar muestras que aparecen
transparentes si son observadas con luz visible.
4) Microscopio de luz polarizada
También conocido como microscopio petrográfico. Este microscopio es en realidad un tipo de
microscopio óptico al que se la han añadido dos polarizadores. Esto significa que la onda de luz
utilizada para observar la muestra tiene una dirección de oscilación concreta. Este tipo de
microscopio es muy útil para observar estructuras cristalinas de rocas y minerales.
5) Microscopio de fluorescencia
Los microscopios de fluorescencia son aquellos que utilizan las propiedades de fluorescencia
para generar una imagen de la muestra. Este microscopio permite observar sustancias que
emiten luz propia cuando son iluminadas con una longitud de onda determinada. Para ello la
muestra es habitualmente iluminada con una lámpara xenón o con una lámpara de vapor de
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mercurio. Estos microscopios incorporan además filtros de luz para aislar la luz correspondiente
a la muestra.

Fuente: Zeiss Microscopy)

Microscopios según el número de lentes


En el caso concreto del microcopio óptico puede hacerse una distinción según el número de
lentes de su sistema óptico.
1) Microscopio simple
Este tipo de microscopio dispone de una única lente y es más habitualmente conocido
como lupa. Aún así, con un microscopio simple pueden conseguirse grandes aumentos. Hay que
destacar que durante el siglo XVII, Antonie van Leeuwenhoek utilizó este tipo de microscopios
para conseguir el mayor aumento alcanzado hasta el momento. A día de hoy, uno de los
conceptos basados en la misma idea es el Foldscope.
2) Microscopio compuesto
Este tipo de microscopio es aquél que dispone de por lo menos dos lentes. Este es el caso más
habitual en todos los microscopios modernos. Normalmente los microscopios disponen de
distintas lentes tanto en el objetivo como en el ocular para corregir las aberraciones ópticas y
alcanzar una imagen con buena calidad. La invención del microscopio está asociada con
la invención del microscopio compuesto. Este apareció en los Países Bajos a finales del siglo
XVI.
Microscopios según la transmisión de la luz
Existen dos tipos básicos de microscopio óptico según el camino seguido por la luz hasta llegar
el objetivo: microscopios de luz transmitida y los microscopios de luz reflejada.
1) Microscopio de luz transmitida
En este tipo de microscopio la luz atraviesa la muestra. Para esta clase de microscopios es
necesario preparar la muestra cortándola en láminas muy finas. La muestra se ilumina desde
debajo la platina. La preparación de la muestra hace que esta sea semitransparente y parte de la
luz pueda atravesarla y llegar al objetivo para ser observada posteriormente a través del ocular.
En general este es el sistema de iluminación más utilizado entre los microscopios ópticos.
2) Microscopio de luz reflejada
En este caso la luz ilumina la muestra y parte de esta es reflejada y dirigida al objetivo. De este
modo es necesario iluminar la muestra desde la parte superior de la platina. Este tipo de
microscopía es utilizada para examinar materiales opacos como pueden ser estructuras
metálicas, materiales cerámicos, etc. Existen microscopios ópticos que permiten los dos tipos de
iluminación de modo que es posible observar tanto muestras semitransparentes como opacas.
Los microscopios estereoscópicos (permiten observar la muestra en tres dimensiones) son
siempre de luz reflejada.

Microscopios según el número de oculares


Los microscopios también pueden ser clasificados según el número de oculares. En base a este
criterio puede distinguirse entre microscopios monoculares, binoculares o trinoculares.
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1) Microscopio monocular

Figura: Microscopio monocular


Este tipo de microscopio dispone de un solo ocular a través del cual se puede observar la
muestra. Es el tipo más sencillo y es ideal para aficionados a la microscopía o para alguien que
se introduce en este campo. Su desventaja principal es que puede resultar un poco incómodo si
tiene que utilizarse durante largos periodos de tiempo. Por este motivo los microscopios
monoculares no son en general utilizados en ámbitos profesionales.
2) Microscopio binocular
Los microscopios binoculares disponen, como indica su nombre, de dos oculares. Esto permite
observar la muestra simultáneamente con los dos ojos resultando en una mayor comodidad para
el usuario. Este es el tipo de microscopio más utilizado en los laboratorios de investigación. La
distancia entre los dos oculares puede regularse para adaptarse a las necesidades del usuario. No
hay que confundir el microscopio binocular con el microscopio estereoscópico. El microscopio
estereoscópico siempre es binocular. Sin embargo, no todo microscopio binocular es
estereoscópico.
3) Microscopio trinocular
El microscopio trinocular está equipado con dos oculares para observar la muestra además de un
tercer ocular para conectar una cámara. En el caso de conectar una cámara digital esta puede
conectarse a un ordenador para ver la imágenes de la muestra en tiempo real. Con este
microscopio es posible observar la muestra y al mismo tiempo tomar fotografías o videos con la
cámara.
Microscopios según la configuración de los elementos

Figura;Microscopio invertido
(Fuente: Zeiss Microscopy)
Los microscopios convencionales tienen una configuración vertical. Esto significa que el foco de
luz se encuentra en la parte inferior de la estructura. A continuación hay la platina donde se
coloca la muestra y finalmente el cabezal con los objetivos y el ocular en la parte superior. Esta
es la configuración más habitual pero no la única.
Existen también los microscopios invertidos. Esto microscopios tienen una configuración
totalmente opuesta a la del microscopio vertical. La muestra es iluminada desde la parte superior
y los elementos ópticos se encuentran debajo la platina. Con este tipo de microscopio es posible
observar muestras colocadas en el fondo de un recipiente. Esto es muy útil para mantenerlas
hidratadas y poder así observar muestras vivas y procesos biológicos que duran días.
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Microscopios digitales
Los microscopios digitales son aquellos que capturan una imagen digital de la muestra. Esto se
consigue conectando una cámara digital en lugar del ocular. Existen microscopios digitales con
distintas configuraciones. Habitualmente deben conectarse al ordenadorpara poder transmitir las
imágenes y a continuación visualizarlas. También es cierto que existen microscopios digitales
con una pantalla incorporada. Estos permiten ver la muestra en la pantalla y almacenar
imágenes que pueden transmitirse a continuación a un ordenador mediante conexión
USB o tarjeta SD.
Un tipo especial de microscopios digitales son los microscopios USB. Estos microscopios
consisten únicamente en una lente de gran aumento y una cámara digital. El aumento que se
alcanza es limitado en comparación con un microscopio óptico convencional. Aún así son
instrumentos muy versátiles y útiles para observar objetos cotidianos. Los microscopios USB se
conectan al ordenador mediante conexión USB y permiten guardar imágenes de la muestra.
Microscopio estereoscópico
El microscopio estereoscópico es un tipo de microscopio que permite observar la muestra de
forma tridimensional. Estos microscopios están equipados siempre con dos oculares. La imagen
de la muestra que llega a cada ocular es ligeramente distinta de modo que cuando se combinan se
consigue el efecto 3D. Este efecto no podría conseguirse si la muestra se observara con un solo
ocular.
El aumento que se consigue con el microscopio estereoscópico es inferior al que se consigue con
un microscopio óptico convencional. Sin embargo, los microscopios convencionales solo
permiten una observación bidimensional de la muestra. Los microscopios estereoscópicos son
muy utilizados en aplicaciones donde debe manipularse la muestra mientras se observa. Por
ejemplo para el montaje de circuitos o relojes.
Otros tipos de microscopios
Además de los microscopios anteriormente presentados existen multitud de técnicas de
microscopía adicionales optimizadas para tipos de muestra específicas. Algunos de los que vale
la pena mencionar son:
1) Microscopio confocal
Este es un tipo de microscopio de fluorescencia. En lugar de iluminar la muestra de forma
global se ilumina punto a punto de forma sucesiva y se reconstruye la imagen al final del
proceso. Este proceso de escaneado de la muestra es similar al que se produce en los
microscopios electrónicos de barrido. Este tipo de microscopio fue inventado por Marvin
Minsky en 1957.
2) Microscopio de campo oscuro
Esta técnica de microscopía consiste en iluminar la muestra oblicuamente. De este modo los
rayos de luz que llegan al objetivo no provienen directamente del foco de luz sino que han sido
dispersados primero por la muestra. Esta técnica permite ver muestras que de otro modo no
serían visibles debido a su transparencia. También tiene la ventaja que no requiere teñir la
muestra para aumentar su contraste y poder observarla.

Figura:Muestra observada en un microscopio de campo oscuro


3) Microscopio de contraste de fases
La luz viaja a distintas velocidades dependiendo del medio de propagación. Esta propiedad es
utilizada en el microscopio de contraste de fases ya que la luz atraviesa la muestra con distintas
velocidades en distintas secciones. Este efecto es amplificado para generar la imagen de la
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muestra. Mediante esta técnica no hace falta utilizar tintes y, por lo tanto, pueden observarse
células vivas. El microscopio de contraste de fases fue inventado por Frits Zernike en 1932 y
recibió por ello el premio Nobel de física en 1953.

11. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS


11.1. Bibliografía.
 F, S. (1967). Instrumentation and Techniques . Sansed.

 Programa de Afiliados de Amazon EU. (2000). Mundo del Microscopio.

 RNS. (1979). MICROSCIPIO. Ediciones de Taller.

 Universidad de España. (2006). MICROBIOLOGÍA GENERAL . Madrid: Universidad de España.


UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA
CARRERA DE INGENIERÍA QUÍMICA
LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL

12. ANEXOS
12.1. Diagrama del equipo. (Microscopios con sus partes).

Figura 12.1-1: Partes del Microscopio

Fuente: VILLEE, Claude A.; ZARZA, Roberto Espinoza; Y CANO, Gerónimo


Cano.Biología. McGraw-Hill, 1996.
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12.2. Observaciones realizadas con el microscopio.

Figura 12.2-1: Visión en el microscopio de una placa fija

Fuente: Microscopio Laboratorio de Biotecnología, Ciencias Biológicas

Figura 12.2-2: Visión en el microscopio de un pedazo de papel milimetrado

Fuente: Microscopio Laboratorio de Biotecnología, Ciencias Biológicas


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Figura 12.2-3: Visión en el microscopio de glóbulos rojos

Fuente: Microscopio Laboratorio de Biotecnología, Ciencias Biológicas

Figura 12.2-4: Visión en el microscopio de aguas servidas

Fuente: Microscopio Laboratorio de Biotecnología, Ciencias Biológicas


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Figura 12.2-2: Visión en el microscopio de un pedazo de papel milimetrado y un cabello

Fuente: Microscopio Laboratorio de Biotecnología, Ciencias Biológicas

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