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LA MOLINA-LIMA-PERÚ
1. INTRODUCCIÓN
1.1 JUSTIFICACIÓN
1.2 OBJETIVOS
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➢ Determinación de proteínas en la muestra.
1.3 HIPÓTESIS
2. REVISIÓN DE LITERATURA
a) DIGESTIÓN
La muestra es oxidada por vía húmeda con ácido sulfúrico, catalizadores
químicos y temperatura alta en un digestor, carbono, hidrógeno, oxígeno, azufre que
pueda contener se gasifican y se emiten al exterior como dióxido de carbono, agua,
óxidos de azufre, etc. Si la muestra está compuesta de nitrógeno amídico y amínico
se convierte en ion amonio. El objetivo en sí es transformar N-orgánico con enlaces
peptídicos formando macromoléculas a N-amoniacal, inorgánico, simple de carácter
ácido base.
c) TITULACIÓN
Se utiliza el ácido sulfúrico por retrovaloración,cuando el amoniaco se recibió
en un exceso de una solución de un ácido fuerte.se titula el remanente del
ácido con una base estandarizada.
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3. MATERIALES Y MÉTODOS
3.1 MATERIALES:
❖ Bureta de 25 a 50 ml
3
❖ Pipeta volumétrica
❖ Ácido sulfúrico
❖ Fenolftaleína
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❖ Hidróxido de sodio
3.2 MÉTODOS:
❖ DESTILACIÓN NH4HSO4
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● Identificar el equipo de destilación y sus partes, luego verificar que todas las llaves
estén abiertas.
● Encender la plancha y esperar que el agua hierva a 100ºC.
● Comprobar la circulación de agua (entrada y salida).
❖ TITULACIÓN
4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
4.1 RESULTADOS
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J Milimoles de N equivalente 2.86
L %N(p/p) 3.2337%
● A pesar de los numerosos métodos alternativos existentes hoy en día como, p. ej., el ya
mencionado análisis de combustión de Dumas, el análisis Kjeldahl sigue ocupando una
posición dominante. Esto no solo se debe a su gran flexibilidad y aplicación universal con
material de muestra con baja homogeneidad,
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6. CONCLUSIONES
Cuadro 1. Valores máximos y mínimos de la composición del grano de quinua según varios
autores (g/100 g).
➔ De acuerdo a los valores teóricos establecidos (Junge, 1975). Se puede afirmar que están
en el intervalo de 11- 21.3 %.
Por lo tanto al hallarse un 20,2107%, se concluye que el valor hallado esta dentro de dicho
intervalo y se considera aceptable, además de proceder a hallar el error porcentual:
7. RECOMENDACIONES
➔ Hay que familiarizarse con los elementos de seguridad disponibles y localizar las salidas
principales de emergencia. Deben respetarse siempre sin ser invadidas por objetos
innecesarios. Además, se debe conocer la localización exacta de extintores, mangueras,
duchas de seguridad y lavaojos.
➔ Es obligatorio usar gafas de seguridad y no llevar lentes de contacto.
➔ El uso de bata es obligatorio, deberá estar siempre cerrada y no ser utilizada fuera del
laboratorio. Se recomienda llevar zapatos cerrados y no sandalias. Se utilizarán guantes
para protección de las manos. El pelo largo deberá estar siempre recogido. Se evitará el
uso de anillos, pulseras, etc.
➔ No comer ni beber en el laboratorio. Hay que lavarse siempre las manos antes de salir
del mismo.
8. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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❏ https://es.scribd.com/document/350325721/5-Cuantificaicon-de-Proteinas-Por
-El-Metodo-Del-Acido-Bicinconinico-y-Bradford
❏ http://www.labome.es/method/Protein-Quantitation.html
❏ http://www.gerhardt.de/fileadmin/Redaktion/downloads/Stickstoffanalyse_-_Di
e_Methode_von_Johan_Kjeldahl_gekuerzt_f_Homepage-spa-ES.pdf
9. ANEXOS
CUESTIONARIO DE PREGUNTAS
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➢ Método Biuret
➢ Método de Lowry
Es un método colorimétrico de relación cuantitativa de las proteínas. A las muestras
se le añaden un reactivo que forma un complejo coloreado. Siendo la intensidad de
color proporcional a la concentración de proteínas, según la ley de Lambert-Beer.
➢ Método de Bradford
Está basado en el cambio de color del colorante Coomassie brilliant blue G-250 en
respuestas a diferentes concentraciones de proteínas . Este compuesto interacciona
con aminoácidos básicos y aromáticos. Esta unión del colorante con las proteínas
provoca un cambio en el máximo de absorción del colorante desde 465 a 595 nm.
Este método se basa en la propiedad del Azul Brillante de Coomassie G-250 de
presentarse en dos formas con colores diferentes, rojo y azul. La forma se convierte
en azul cuando el colorante se une a la proteína.
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➢ Método de la Ninhidrina
Es un poderoso reactivo que reacciona con la proteína y aminoácidos para
diferenciarse de otros compuestos como los carbohidratos. Este reactivo reacciona con la
alfa-aminoácido que está dentro de la proteína dándole un color púrpura pero menos el
hidroxiprolina y prolina que le dan un color amarillento.
➢ Método turbidimétrico
%Proteína= %Nx5.7
= 16x5.7
= 91.2
%N = MxVHClxF.Ex0.014x100
W(g)
91.2 = 0.025x50x5.7x0.014 x 100÷W
= 9.975g
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Ac bórico FE=1
HCl 0.182M= 45.32mL
%N=11.547%
%Proteínas=11.547%x6.25=72.172%
j) ¿ Cuál será el peso en gramos de muestra que se analizará para que por la técnica de
Kjeldahl, variante ácido bórico, el gasto de HCl 0.1 M consumido en la titulación final sea
igual al % de proteínas totales de la muestra?
HCl 0.35 M= XmL
%P= XmL
Ac. Bórico FE= 1
%P=%Nx6.25=X
x100
W=3.0625
k) Una muestra impura de 0.25g de urea es analizada por la técnica Kjeldahl. El gasto en la
valoración final fue de 44.2 ml de HCl 0.35 M. Calcular el % de pureza de la muestra.
W=0.25 urea
Masa molar úrea=60.06 g/mol
HCl 0.35M=44.2mL
Pureza= =37.165%
l) Se sabe que un embutido contiene 20.09 de proteínas totales. ¿Cuál será el volumen de
HCl 0.125 M que se gastara en la valoración final si se analiza una muestra de 0.875 g por
la técnica de Kjeldahl?
Muestra=0.875g
%Proteína=20.09%
HCl 0.125 M= VmL
20.09=%Nx6.25 %N=3.2144
3.2144=
V=16.072mL
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