TINCIONES ESTRUCTURALES

ALVAREZ TICONA DORIS, CHAYACAÑA CHOQUEPATA NAZARETH, CUTIPA CHOQUE SONIA

FACULTAD DE CIENCIAS FARMACEÚTICAS
UNIVERSIDAD CATÓLICA DE SANTA MARIA – AREQUIPA
MICROBIOLOGA FARMACEÚTICA

RESUMEN
Las tinciones en microbiología son las primeras
herramientas que se utilizan en el laboratorio para el
diagnóstico de las enfermedades infecciosas. Desde
hace más de un siglo han ayudado a resolver
problemas de etiología microbiana. Hay una gran
variedad de tinciones, que se han ido desarrollando
para la detección de los diferentes agentes infecciosos
en los que se incluyen bacterias, parásitos y hongos. La
tinción de Gram se considera básica en la valoración
inicial de muestras para análisis bacteriológico,
mientras que la tinción de Wright se ocupa para el
diagnóstico de enfermedades muy particulares en el
rubro de la parasitología. Hay técnicas tintoriales
específicas de gran utilidad, como la tinción de Ziehl-
Neelsen, que se utiliza para el diagnóstico de
enfermedades crónicas como la tuberculosis o la
actinomicosis, o la tinción de azul de lactofenol, que
preserva e identifica a los componentes estructurales de
los hongos. Las diferentes tinciones en el laboratorio
microbiológico tienen una utilidad fundamental para el
diagnóstico y tratamiento oportuno de múltiples
patologías de etiología infecciosa.
ABSTRACT
Stains in microbiology lab are the first tools employed
for diagnosis of infectious diseases. Stains have helped
to identify the ethiology of microbial involvement for
more than a century. As the wide spectrum of stains is
currently in progress for the detection of bacteria,
fungus and parasites, such fundamentals as the Gram
stain are still considered basic for initial evaluation of
bacteriological samples, while the Wright stain is used
for very particular diseases as those related to
parasites. Other specific tintorial methods as the Ziehl-
Neelsen stain are used for diagnosis of chronic diseases
such as tuberculosis oractinomycosis. The lactophenol
blue stain is best employed for diagnosis of fungal
infections, as it helps to identify fungi and to preserve
their morphological structures. Different stains in the
clinical microbiological lab are permanent basic tools
for the diagnosis and treatment of many diseases of
infectious ethiology

I. INTRODUCCIÓN

En microbiología el microscopio se utiliza de forma rutinaria, ya que proporciona importante información para la
identificación temprana y definitiva de los microorganismos.
En la valoración de las muestras, es trascendente el poder de resolución del microscopio, el cual se define como la
capacidad que posee un objetivo para distinguir la distancia mínima entre dos puntos del objeto para que se
puedan visualizar como dos puntos separados. El poder de resolución de un objetivo es el responsable de la
calidad, claridad, nitidez y fineza detallada de la imagen, y depende de la longitud de onda (λ) del haz de luz
utilizado y de la apertura numérica del objetivo empleado. El máximo poder de resolución en un microscopio de
luz emitida es de 0.2 μm, por lo que se requiere de una amplificación entre 1000-1400x, mientras que el poder
de resolución del ojo humano es de aproximadamente 0.2 mm. Para aprovechar esta ventaja de los microscopios,
se han desarrollado técnicas tintoriales que destacan las características morfológicas de los microorganismos. Existe
una gran variedad de tinciones que pueden ser aplicadas dentro del campo de la microbiología.

TINCIONES ESTRUCTURALES
Mientras las tinciones diferenciales permiten distinguir entre distintos tipos de microorganismos, las tinciones
estructurales incrementan el contraste en las células microbianas y revelan estructuras particulares, entre las que se
incluyen las endosporas, los flagelos y las cápsulas.
Tinción de Gram
La técnica de la tinción de Gram fue desarrollada por el bacteriólogo danés Christian Gram en 1884. Esta tinción
clasifica las bacterias en dos grupos: Gram positivas y Gram negativas.
La técnica incluye tinción primaria, decoloración y tinción de contraste:
 Se tiñe el espécimen con el primer colorante, cristal violeta, que tiñe de violeta.
 Se añade el mordiente, iodo.
 Se aplica el agente decolorante, normalmente una solución de acetona o etanol.
En este momento, las bacterias Gram negativas pierden su tinción violeta, pero las Gram positivas retienen el
colorante.
Como colorante de contraste se añade safranina, que tiñe de rosa las bacterias Gram negativas, previamente
decoloradas; mientras que a las bacterias Gram positivas les proporciona un color violeta más intenso.

El distinto comportamiento frente a los colorantes de las bacterias Gram positivas y Gram negativas se debe a las
diferencias existentes en sus superficies externas. Las células Gram negativas poseen una capa de peptidoglicano
delgada y una membrana externa.
Las bacterias Gram positivas poseen una capa gruesa de peptidoglicano v carecen de membrana externa.
La tinción de Gram es extraordinariamente útil en clínica. Esta técnica es, casi siempre, la primera prueba que se
lleva a cabo en la identificación de un microorganismo causante de una enfermedad, aislado de un paciente. Con
sólo un microscopio y unos cuantos botes de colorante podemos averiguar si un organismo es Gram positivo o Gram
negativo, su morfología celular y su agrupación típica. Esto, a veces, es suficiente para determinar con qué tipo de
bacteria estamos trabajando. Es más, el tratamiento de una infección depende de que el agente sea Gram positivo
o Gram negativo, ya que algunos antibióticos actúan sólo sobre los primeros, y otros sobre los segundos. La
penicilina, por ejemplo, es más efectiva contra bacterias Gram positivas; mientras que la estreptomicina y la
tetraciclina actúan sobre ambas.

TINCIÓN DE ÁCIDO-ALCOHOL RESISTENCIA

La tinción diferencial de ácido-alcohol resistencia fue desarrollada por Paul Ehrlich en 1882. Actualmente se utiliza
una modificación de la técnica de Ehrlich que recibe el nombre de tinción de Ziehl-Neelsen. Esta tinción sirve para
teñir bacterias del género Mycobacterium, el resto de las bacterias se tiñen de azul por el colorante de contraste.
M. tuberculosis, causante de la tuberculosis y M. leprae, causante de la lepra o enfermedad de Hansen, se
identifican mediante esta tinción.
Las micobacterias son ácido-alcohol resistentes porque poseen en sus cubiertas lípidos de ácidos grasos complejos
que forman en su pared celular un material de tipo céreo resistente a la decoloración.
Una tinción ácido-alcohol resistente se realiza según los siguientes pasos:
1. Tinción primaria con fucsina básica, que tiñe todas las células de rojo.
2. Calentamiento suave de la preparación para facilitar la penetración del colorante en el interior de la
célula.
3. Decoloración con una solución de ácido clorhídrico en etanol. Este decolorante elimina la fucsina de todas
las células excepto de las micobacterias, que la retienen debido a su superficie cérea.
4. Coloración de contraste con azul de metileno. Se tiñen de azul todas las células previamente decoloradas,
lo que facilita la diferenciación entre las células de Mycobacterium, aún teñidas de rojo, y las células
restantes del espécimen.

TINCIÓN DE ESPORAS DE WIRTZ-CONKLIN

Algunas bacterias poseen endosporas, estructuras de resistencia que les permiten sobrevivir en condiciones
ambientales extremas. Las endosporas poseen cubiertas gruesas e impermeables que no absorben la mayoría de
los colorantes.
La tinción de esporas de Wirtz-Conklin, sin embargo, es efectiva:
 Tinción con verde de malaquita.
 Calentamiento a emisión de vapores durante tres a seis minutos, para que el colorante penetre a través
de las paredes de la endospora.
 Lavado con agua del grifo, que elimina el colorante verde de todas las partes de la célula, con excepción
de las esporas.
 Tinción de contraste con el colorante rosa safranina.
Al final del proceso, las endosporas bacterianas quedan teñidas de verde y el resto de la célula de rosa. Las
bacterias Bacillus anthracis y Clostridium perfringens, agentes etiológicos del carbunco y la gangrena,
respectivamente, forman esporas y pueden ser identificadas mediante esta tinción.

TINCIÓN DE FLAGELOS DE LEIFSON

Los flagelos, largos y finos apéndices de las células bacterianas que les permiten moverse, son tan delgados que
resultan invisibles al microscopio óptico, si no se realiza una técnica especial para su tinción.
Los distintos métodos de tinción utilizan
combinaciones de mordientes y metales para
engrosar los flagelos, así como colorantes para
teñirlos.
La tinción de flagelos de Leifson se realiza según
la siguiente técnica:
 Se fija químicamente la suspensión
bacteriana, mediante formol, y se
hace la extensión en un portaobjetos.
 Se deja secar al aire, sin
calentamiento alguno.
 Se cubre la preparación con una mezcla de ácido tánico y el colorante rosanilina, de preparación
extemporánea. El ácido tánico engruesa los flagelos y la rosanilina los tiñe. - Se retira el exceso de
colorante con agua.
 Se deja secar al aire, antes de su observación al microscopio.
 Esta tinción permite determinar el número y la disposición de los flagelos de las bacterias, lo que constituye una
información esencial para la identificación de muchas especies.
La tinción de flagelos es un arte que se adquiere sólo con la práctica .

TINCIÓN NEGATIVA
Algunas bacterias están rodeadas por una estructura protectora denominada cápsula. Para poner de manifiesto
la presencia de una cápsula se utiliza una técnica denominada tinción negativa:
 Se hace una preparación en fresco del espécimen.
 Se añade tinta china. Las partículas de carbón de la tinta no pueden penetrar en la cápsula, de manera
que solo se ennegrece el fondo.
 Al microscopio, se observan las células y sus capsulas, como zonas claras alrededor de las mismas.
 Se puede aplicar un colorante para hacer las células más visibles (los colorantes habituales no tiñen las
cápsulas). También se puede usar nigrosina, en lugar de tinta china.

(a) La tinción de Wirtz-Conklin se utiliza para observar endosporas. Bacillus cereus es una
bacteria esporulada. Las endosporas mantienen la tinción primaria verde, mientras que las
otras células se observan teñidas con la coloración de contraste rosa. (b) La tinción de Leifson
revela que este microorganismo posee flagelos, lo cual contribuye a su identificación como
Spirillum volutans..(c) La tinción negativa con tinta china permite observar que esta bacteria
posee cápsula, lo que facilita su identificación como Klebsiella pneumoniae, agente causal de
la neumonía.

II. PARTE EXPERIMENTAL

 MATERIALES Y METODOS

MATERIALES  Solución de cloruro de sodio

 Microscopio  Colorante de leifson
 Laminas porta objetos  Coloración hiss
 Set para coloración  Xilol
 Asas de platino  Safranina
 Cultivos con gérmenes diferentes  Verde de malaquita
 Aceite de inmersión  Colorante Albert
Reactivos  Solución de lugol
 Fucsina básica
 Acido tánico

 PROCEDIMIENTO

A) TINCION DE FRAGELOS - METODO DE LEIFSON

 Utilizando un cultivo joven en un medio de agar adecuado, preparar una ligera suspensión bacteriana en
agua
 Coloque una gota de la suspensión bacteriana sobre una lámina porta objeto limpia
 Deje pasar a temperatura ambiente o pasando por una llama suavemente para obtener la fijación del
frotis con la finalidad que el material no sea arrastrado durante el proceso de tinción
 Colorear durante 15 minutos, permitiendo que se forme un precipitado al evaporarse el alcohol. El tiempo
es menor si el colorante es fresco.
 Cuando se forma un precipitado, enjuague el porta objeto con agua destilada, escurrir el exceso de agua
y dejar secar al aire seco.
 Obtener al microscopio con lente de inmersión (100x) y con aceite de inmersión

B) TINCION DE CAPSULAS - METODO HISS

 Tome una lámina porta objeto limpia, coloque una gota de agua destilada para hacer un frotis.
 Debe realizarse un frotis espeso a partir de una suspensión de los gérmenes en suero sanguíneo
diluido en 1/3en suero fisiológico.
 Deje secar a temperatura ambiente o pasando por la llama suavemente para obtener la fijación
del frotis.
 Cubrir la preparación con solución de cristal violeta y se calienta a vapor fuerte durante 1 minuto.
 Lavar con solución de sulfato de cobre.
 Secar al aire a temperatura ambiente.
 Observar al microscopio con lente de inmersión (100x) y con aceite de intención .
 C) TINCION DE ESPORAS - METODO DE WIRTS CONKLIN
 Se fija el frotis al calor.
 Se cubre con la solución de verde malaquita y se calienta hasta la emisión de vapores, durante unos ocho
minutos
 Se lava con agua destilada
 Se añade la solución de safranina y se deja actuar por 30 segundos
 Se lava con agua y se seca a temperatura ambiente
 Observar al microscopio con lente de inmersión (100x) y con aceite de inmersión.

D) TINCION DE CORPUSCULOS METACROMATICOS

METODOS DE ALBERT
 Se fija el frotis
 Se cubre con el colorante Albert y se deja actuar durante 15 minutos
 Se lava con agua
 Se seca a temperatura ambiente
 Se observa con lente de inmersión (100X).

RESULTADOS

A) MÉTODO DE LEIFSON, Los flagelos teñidos se visualizan de colores oscuros, rojo a negro-azulado.

B) MÉTODO HISS, Las células del fondo aparecen teñidos en color azul oscuro mientras que la capsula
aparece de color azul pálido.
C) MÉTODO DE WIRTS CONKLIN, Las esporas se observan verdes, mientras que las formas vegetativas se
ven de color rojo:

D) MÉTODOS DE ALBERT, no se pudo realizar en la práctica, pero se buscó información para

poder observar la tinción, la figura de abajo muestra.

BIBLIOGRAFIA

1. Díaz R Gamazo C y López Goñi I. 1999. Manual práctico de microbiología. Edición Masson
2. Jenkins, D., Richard, M. y Daigger, G. (1993). Manual on the causes and control of activated sludge bulking
and foaming. 2ª Edición. Lewis Publishers. Michigan.
3. Feimbrook ME, Wang WLL, Campbell G. Staining bacterial flagella easily. . J. Clin. Microbiol. 1989.
4. Tortora, G. J., Funke, B. R. y Case, C. L. 2007. Introducción a la Microbiología, 9ª Ed. Editorial Médica
Panamericana. Buenos Aires. Argentina.
5. Gamazo, C.; López-Goñi, I. y R. Díaz. 2005. Manual práctico de microbiología. Masson. Barcelona.
 CUESTIONARIO

1. ¿Cuáles son las partes del flagelo y hacer un

esquema?

El flagelo bacteriano consta de tres partes:

a) La parte más larga y evidente es
el filamento del flagelo, que se
extiende desde la superficie de la
célula hasta la punta del flagelo.
b) El cuerpo basal está insertado en la
célula.
c) El gancho del flagelo es un segmento
corto y curvado, que une el filamento a
su cuerpo basal y actúa como
acoplamiento flexible.
El filamento es un cilindro hueco y rígido
constituido por subunidades de la proteína
flagelina; algunas bacterias tienen vainas
que rodean sus flagelos.
El gancho y el cuerpo basal son distintos del
filamento. El gancho, ligeramente más ancho
que el filamento consta de diferentes
subunidades proteicas. El cuerpo basal es la
parte más compleja; en la mayoría de
bacterias gram negativas, consta de cuatro
anillos conectados por un cilindro central.
El movimiento de rotación del flagelo parte
del cuerpo basal que funciona como un
motor. La energía necesaria para para la
rotación proviene de a fuerza motriz
generada por el gradiente de protones.

2. Clasificación de los flagelos, de ejemplos de cada uno de ellos y haga un dibujo:

a) Monótrica:
 Pseudomona aeroginosa
 Vibrio comma

b) Lofótrica
 Pseudomonas fluoresces
 Spirillus

c) Perítricas
 E. coli
 Proteus vulgaris
 Salmonella typhasa
 Clostridium parabotulinum
 3. Mencione 4 coloraciones que permitan visualizar flagelos y describa el procedimiento de
cada una de ellas y como se observó dicha estructura:

TINCIÓN DE LEIFSON:
 Utilizando un cultivo joven en un medio de agar adecuado, preparar una ligera suspensión
bacteriana en agua
 Coloque una gota de la suspensión bacteriana sobre una lámina porta objeto limpia
 Deje pasar a temperatura ambiente o pasando por una llama suavemente para obtener la
fijación del frotis con la finalidad que el material no sea arrastrado durante el proceso de tinción
 Colorear durante 15 minutos, permitiendo que se forme un precipitado al evaporarse el alcohol.
El tiempo es menor si el colorante es fresco.
 Cuando se forma un precipitado, enjuague el porta objeto con agua destilada, escurrir el exceso
de agua y dejar secar al aire seco.
 Obtener al microscopio con lente de inmersión (100x) y con aceite de inmersión.

MÉTODO DE GRAY
Utiliza un mordiente cubre la superficie del flagelo aumentando aparentemente su grosor y a su vez
proporciona una copa de material teñible para captar el colorante de golpe.
Método
 Pasar el portaobjeto 3 o 4 veces sobre la flama del mechero.
 Preparar una suspensión de la bacteria en agua esteril.
 Sobre el portaobjeto flameado y frio colocar 5 gotas de la suspensión.
 Deja secar la preparación al aire, no calentar.
 Cubrir con el mordiente durante 10 minutos
 Cubrir una solución carbol-fucsina durante 5 minutos
 Lavar con agua. Dejar secar al aire
 Observar a los flagelos de color rojo

TEORÍA KODOKA
Se agrega una gota de colorante en el borde del cubreobjetos y se dejó reposar por 10 minutos a
temperatura ambiente el colorante entrara en la preparación y teñirá los flagelos

TINCIÓN DE NOLAND
Solución I: 20 mg de cristal violeta + 80 mg de fenol + 20 ml de formaldehido al 40
% + 4 ml de glicerol.
Procedimiento:
 Mexclar una gota de solución I con una gota de muestra en el portaobjetos.
 Colocar un portaobejtos y observar a 100x bajo aceite de inmersión y campo claro.
Resultados
 Los flagelos aparecen teñidos de color azul

4. ¿En qué casos se aconseja hacer una coloración para flagelos?

Esta tinción permite determinar el número y la disposición de los flagelos de las bacterias, que constituyen
una información esencial para la identificación de muchas especies y fundamentalmente en el caso de
bacteria móviles.

5. ¿Cuál es la composición de la cápsula? ¿glicocalix?

Capsula bacteriana
 Compuesta de polisacáridos, polialcoholes y amino azúcares
 Resistencia a la desecación
  Resistencia al ataque de las células fagocitas y anticuerpos
 Fijación a células hospedadoras

Glucocalix
 Ayuda a proteger las bacterias contra los fagocitos fija el agua evitando que la células se seque
 Compuesta de glucoproteinas y proteoglicanos

6. Mencione tres coloraciones que permiten visualizar capsula y en que consiste:

METODO HISS
 Tome una lámina porta objeto limpia, coloque una gota de agua destilada para hacer un frotis.
 Debe realizarse un frotis espeso a partir de una suspensión de los gérmenes en suero sanguíneo
diluido en 1/3en suero fisiológico.
 Deje secar a temperatura ambiente o pasando por la llama suavemente para obtener la fijación
del frotis.
 Cubrir la preparación con solución de cristal violeta y se calienta a vapor fuerte durante 1
minuto.
 Lavar con solución de sulfato de cobre.
 Secar al aire a temperatura ambiente.
 Observar al microscopio con lente de inmersión (100x) y con aceite de intención.

METODO DE DUGUID
 Poner con el asa una gota pequeña de tinta china en el centro de un portaobjetos limpio.
 Poner una gota de agua del mismo tamaño junto a la gota de tinta china
 Tomar con el Asa bacteriológica un pequeño fragmento del cultivo de bacterias
 Hacer una suspensión ( sin extenderla) en la gota de agua
 Mezclarla con la tinta china
 Colocar un cubreobjetos sobre la suspensión, evitando que queden burbujas
 Observar la preparación al microscopio con el objetivo seco fuerte y de inmersión.
 La cápsula se observa como una zona brillante alrededor de la bacteria en un campo oscuro

METODO DEL ROJO CONGO

 Poner una gota pequeña de rojo congo en el centro de un portaobjetos limpio
 Tomar con el asa bacteriológica un pequeño fragmento de crecimiento de colonia bacteriana
 Suspender la muestra en la gota de rojo congo y hacer un frotis
 cubrir el frotis (SIN FIJARLO A LA FLAMA DEL MECHERO) con una gotas del mordente de cápsula
y dejarlo actuar durante un minuto.
 Lavar el frotis con agua destilada y dejarlo secar al aire
 Observar la preparación al microscopio con el objetivo de inmersión

 La cápsula se observa como una zona brillante alrededor de la bacteria de color rojo en un
campo de azul oscuro.

7. Mencione microorganismos que presentan capsula y glicocalix

Haemophilus influenzae Streptococcus pneumoniae

 8. Mencione 4 funciones que cumplan las cápsulas

 Mejora en las propiedades de difusión de nutrientes hacia la célula.

 Protección contra desecación
 Protección contra predacion por parte de protozoos
 Protección contra agentes antibacterianos.

9. ¿Qué función tienen las esporas?

Las esporas son unidades de dispersión de los hongos, musgos y algunas plantas, su función primaria es
asegurar la supervivencia en tiempos de tensión ambiental.

10. Mencione 4 microorganismo capaces de formar espora

Clostridium tetani Clostridium perfringens

Bacillus cereus Clostridium botulinum

11. ¿Cómo se produce el proceso de esporulación y germinación, explique y haga un esquema?

 PROCESO DE ESPORULACIÓN
El proceso de esporulación en bacterias sigue una
serie de etapas:
1. Se produce una duplicación del material
genético (ADN).
2. Comienza a formarse el septo de la espora y
va aislando el ADN recién replicado junto a
una pequeña porción de citoplasma.
3. La membrana plasmática comienza a rodear
el ADN, citoplasma y membrana aislada en el
paso 2.
4. El septo de la espora rodea la porción
aislada formándose la forespora.
5. Se forma una capa de peptidoglicano entre
las membranas.
6. La espora se recubre de una cubierta de
resistencia.
7. Liberación de la endospora de la célula al
medio, en ocasiones a este paso también se le
denomina esporulación. Durante el proceso de
esporulación se llevan a cabo una serie de
cambios químicos y físicos que dan lugar a
cambios morfológicos en la espora.
PROCESO DE GERMINACIÓN
1. Desarrollo del embrion.
2. Acumulación de reservas alimenticias: éstas se
fabrican en las partes verdes de la planta y
son transportadas a la semilla en desarrollo.
En las semillas denominadas endospérmicas,
las reservas alimenticias se depositan fuera
del embrión, formando el endospermo de la
semilla. En las semillas llamadas no
endospérmicas, el material alimenticio es
absorbido por el embrión y almacenado en
contenedores especiales llamadas cotiledones.
3. Maduración: durante esta fase, se seca la
semilla y se separa la conexión con la planta
madre, cortando el suministro de agua y
formando un punto de debilidad estructural
del que se puede separar fácilmente la semilla
madura

PROCESO DE ESPORULACIÓN PROCESO DE GERMINACIÓN

12. Mencione 2 coloraciones que permiten visualizar esporas y en que consiste cada una
de ellas:

METODO DE WIRTS CONKLIN

 Preparar el frotis bacteriano que se va a teñir.

 Colocar un trozo de papel de filtro, del tamaño de la extensión, encima de ella.
 Añadir el colorante verde malaquita para que cubra bien la extensión.
 Pasar la preparación por encima de la llama del mechero bunssen para fijar el colorante,
durante cinco minutos.
 Retirar el papel de filtro y lavar con agua destilada para eliminar el exceso de colorante.
 Teñir la preparación con safranina, para el contraste, durante un minuto.
 Lavar el agua destilada hasta el eliminar el exceso de colorante.
 Secar la preparación al aire, o entre dos papeles de filtro, teniendo especial cuidado en el
segundo caso para no arrastrar la extensión.
 Observar al microscopio óptico y anotar los resultados.
 VERDE DE MALAQUITA

Es un colorante débilmente básica, y por tanto, se une débilmente a las bacteria, se penetre en las células
vegetativas, cuando se calienta la preparación también penetra las endosporas.

CARBOL FUSCINA

Técnicas de protección personal identificación al producto ya que se penetra en la célula.

13. ¿Cuáles son las estructuras de verde de malaquita que aparecen en el medio circundante?

Son endosporas bacterianas a las esporas, para carecer de paredes celulares no se tiñen colorante
regulares y son teñidos con verde de malaquita.

14. ¿Todas las endosporas aparecen igual en las bacterias de la misma especie? ¿A qué se debe estas
diferencias?

No aparecen iguales, ya que la posición de las esporas diferencia entre especies de bacterias y es útil
en la identificación, las endosporas son difíciles de observar al microscopio debido a la impermeabilidad
de su pared, que evita la entrada de colorantes.

15. ¿A qué se denomina gránulos de reserva?

A los polisacáridos, lípidos, polifosfatos y azufre, esto sucede cuando las sustancias de partida se
encuentra en el medio pero el crecimiento está limitada por la falta de nutrientes de terminado o por la
presencia de inhibidores.

16. Mencione microorganismo que presentan de volutina?

Se encuentra de forma de gránulos constituidos en su mayor parte por polifosfatos tipo sal de Graham.
Spirillum volutans

17. Mencione 2 colorantes que permitan observar los corpúsculos metacromáticos y en que consiste
cada uno de ellos:

a) Coloración de loffer: azul de metileno en Loffer para tinción de bacteria AAR, como bacilos de
tuberculosis.
b) Coloración de Albert: la tinción simple se basa en la afinidad del colorante por los componentes
celulares tinción puede ser uniforme.

18. Mencione 3 tipos de inclusiones y que función cumple cada uno de ellos:

Inclusiones de reserva Inclusiones de sales minerales

Son acúmulos de sustancias orgánicas e
inorgánicas, rodeadas de una envoltura limitante
de naturaleza proteínica.
Inclusiones de hidrocarburos
Son acumulador de reserva de los hidrocarburos
que determina bacterias como de fuente de
carbono.
Acúmulos grande, denso, y refregentes de sales
insolubles de calcio (sobre todo de carbonato)
Inclusiones polisacáridos
Son acumulador en glucanos que se depositan
de modo más o menor uniforme por todo el
citoplasma cuando determina bacterias crece en
media limitación de fuente de nitrógeno.