UNIVERSIDAD CONTINENTAL

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

INFORME N° 4 DE MICROBIOLOGÍA:
“SIEMBRA BACTERIANA”

CÁTEDRA : Microbiología - Práctica

CATEDRÁTICO: Dr. Daniel Enrique Matos

ALUMNA : Cárdenas Carreño Anghella Fiorella

2018- I
1. AGAR SANGRE (BLOOD AGAR BASE)

Tipo de clasificación: Medio selectivo

Es un medio selectivo para aislar microorganismos.Base de Agar de Sangre
como base a la que se puede añadir sangre para su uso en el aislamiento y
cultivo de microorganismos patógenos fastidiosos como Neisseria,
Streptococci etc.

Descripción
Blood Agar Base es un medio altamente nutritivo utilizado generalmente
como medio basal para preparar agar sangre por suplementación con
sangre. También puede utilizarse como medio de uso general sin la adición
de sangre.

2. MANNITOL SALT AGAR

Tipo de clasificación: Selectivo y diferencial
Uso:
Manitol Salt Agar se utiliza para el aislamiento selectivo de estafilococos y
para la detección de Staphylococcus aureus a partir de muestras clínicas.
Fundamento:
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentración
salina. Los estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando
el medio; las colonias aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. Los
estafilococos coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas de una zona
roja o púrpura. Las colonias sospechosas, se repicarán en un medio sin
exceso de cloruro de sodio para efectuarles, posteriormente, la prueba de la
coagulasa.
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, constituyen la
fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas y minerales, el manitol es el hidrato
de carbono fermentable, el cloruro de sodio (que se encuentra en alta
concentración) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompañante, y el rojo fenol es el indicador de pH.
Las bacterias que crecen en un medio con alta concentración de sal y
fermentan el manitol, producen ácidos, con lo que se modifica el pH del medio
y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo.
Los estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no
fermentar el manitol.
Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan
como colonias amarillas rodeadas de una zona del mismo color. Los
estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias rojas,
rodeadas de una zona del mismo color o púrpura.
MATERIALES:
 Agar sangre ,Agar manitol salado

 Cepas bacterianas

 Discos de novobiocina
  Asa de siembra en aro

PROCEDIMIENTOS:
1. Con un asa de siembra ,quitar una pequeña línea de las cepas bacterianas

2. Esparcir una pequeña cantidad de muestra bacteriana sobre la superficie de

modo que cubra todo el agar sangre

3. En forma de zigzag pasar las bacterias en el agar manitol –salado

4. Se coloca en un disco de novobiocina en el agar sangre

INTERPRETACION DE RESULTADOS:

1. BLOOD AGAR BASE

 Inhibición de novobiocina positivo: Las cepas bacterianas no crecieron
alrededor del disco de novobiocina

2. MANNITOL SALT AGAR

 El color del manitol salado, se convirtió en un color amarillo.

 Las bacterias que crecen en un medio con alta concentración de sal

y fermentan el manitol, producen ácidos , con lo que se modifica el
pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo
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ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

INFORME N° 4 DE MICROBIOLOGÍA:
“PRUEBA CATALASA Y COAGULASA”
 1. PRUEBA DE LA CATALASA
Fundamento:
La enzima catalasa descompone el peróxido de hidrógeno (H2O2) en agua
y oxígeno. De esta manera las bacterias se protegen del efecto tóxico del
H2O2, que es un producto final del metabolismo aerobio de los azúcares.
Procedimiento: Se coloca una gota de H2O2 al 3% sobre un portaobjetos y
luego se transfiere una porción de colonia sobre el H2O2 realizándose una
emulsión. En lo posible debe tomarse la colonia a partir de un medio sin
sangre ya que los eritrocitos tienen actividad de catalasa y pueden falsear
los resultados.
La prueba diferencia los estreptococos (catalasa negativo) de los
estafilococos (catalasa positivo).

2. PRUEBA DE LA COAGULASA
Permite separar S.aureus, que posee coagulasa, de las otras especies de
estafilococos que genéricamente se denominan coagulasa negativos.

MATERIALES:
 Suero
 Peróxido de hidrogeno
 Micro pipeta
 Porta objetos
 Asa de siembra en aro
 Cepas bacterianas
PROCEDIMIENTOS:
AGAR SANGRE
1. En portaobjeto colocar en un extremo una gota de peróxido de hidrogeno

2. Con un asa de siembra sacar una muestra de microorganismos del agar

sangre y colocarlo en el peróxido de hidrogeno
3. Observar resultado

4. En el otro extremo del portaobjeto colocar una gota de suero

5. Con un asa de siembra distinta sacar una muestra de microorganismos del

manitol-salado y colocarlo en la gota de suero
 6. Observar resultado

MANITOL SALADO
1. En portaobjeto colocar en un extremo una gota de peróxido de hidrogeno
 2. Con un asa de siembra sacar una muestra de microorganismos del agar
sangre y colocarlo en el peróxido de hidrogeno

3. Observar resultado
4. En el otro extremo del portaobjeto colocar una gota de suero
5. Con un asa de siembra diferente sacar una muestra de microorganismos
del manitol-salado y colocarlo en la gota de suero
6. Observar resultado

INTERPRETACION DE RESULTADOS
AGAR SANGRE
 Peróxido de hidrogeno: Catalasa (+) .Se observó un desprendimiento de
burbujas considerándose una prueba positiva.
 Suero : Coagulasa (-)
MANITOL SALADO
 Peróxido de hidrogeno: Catalasa (+). Se observó un desprendimiento de
burbujas considerándose una prueba positiva.
 Suero: Coagulasa (-)

RESULTADO FINAL: STAPHYLOCOCCUS AUREUS