Manual de laboratorio para el análisis y la certificación de semillas

El Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias (CENIAP), como ente

certificador de semillas, tiene la responsabilidad de garantizar a los usuarios del
servicio, una óptima calidad de los materiales objeto de certificación (semilla
Básica y Certificada). Este es un proceso muy amplio y abarca las etapas de
investigación básica y desarrollo del cultivar hasta las actividades subsiguientes de
producción, acondicionamiento, análisis de laboratorio, etiquetado,
almacenamiento y comercialización. Por consiguiente la unidad de Tecnología de
Semillas del CENIAP como órgano regional del Servicio Nacional de Semillas
(SENASEM), lleva a cabo todo lo concerniente al proceso de certificación,
rigiéndose según las normas establecidas en la Resolución del MAC-DGSDA N°
159 de abril de 1986.

En lo que respecta a la etapa de laboratorio, el analista de semillas evalúa por

medio de pruebas físicas, fisiológicas y fitosanitarias la calidad de una muestra de
semillas representativa de un lote en particular. Una vez cumplidos los requisitos
de calidad exigidos para su comercialización, se le otorga la etiqueta según la
categoría de semilla a la cual corresponda: fundación, registrada, certificada o
fiscalizada; siendo ésta garantía de una óptima calidad. Igualmente se realizan los
análisis a semilla muestreada por particulares o empresas importadoras de
semillas.

El manual expuesto a continuación recoge el procedimiento a seguir desde que la

muestra es entregada al laboratorio hasta la entrega de las etiquetas a las
empresas productoras, de los lotes objeto de certificación. Se espera que todos
aquellos usuarios (técnicos, pasantes, empresas productoras, estudiantes) hagan
uso de estos procedimientos, garantizando de esta manera la estandarización del
mismo.

Objetivos

· Facilitar a los usuarios de los laboratorios del INIA (técnicos, pasantes,

estudiantes y personal de empresas productoras e importadoras de semillas) el
uso correcto del procedimiento que se realiza en el laboratorio para la certificación
y/o análisis de semillas.

· Estandarizar el procedimiento de laboratorio para la certificación y/o análisis de

semillas en los laboratorios del INIA.
Capítulo 1

Flujograma de procedimientos de laboratorio para la certificación y/o análisis de

semillas

En el Laboratorio se realizan los análisis de semilla con la finalidad de garantizar el

valor de éstas para su utilización por el agricultor. Para ello, el analista de semilla
evalúa, por medio de análisis de humedad, pureza, mezcla de tipo (maíz), vigor,
viabilidad y germinación, la calidad de la muestra de semilla representativa de un
lote en particular y determina si cumple con los requisitos mínimos exigidos.

Es de gran importancia que todos los laboratorios del I.N.I.A utilicen

procedimientos y documentaciones estandarizados, con el fin de que sean lo más
similares posibles.

A continuación se describe detalladamente los pasos a seguir de todo el proceso

que se ejecuta dentro del laboratorio desde el momento de recibir una muestra de
semilla hasta la entrega de las etiquetas de certificación impresas (cuando se trata
de semilla certificada) e informe de resultados (cuando se trata de semilla
muestreada por particulares).

Capítulo 2

Etapas del proceso

1. Antes de los análisis

a) Toma de muestra

La primera etapa se cumple en los almacenes de depósito de semilla de las

empresas productoras, donde los técnicos autorizados realizan el "muestreo
oficial" y las muestras son entregadas al laboratorio; en otros casos son los
particulares e interesados quienes toman la muestra y la entregan por sí mismos,
en ambos casos, se le da entrada a la muestra al laboratorio. El objetivo es
obtener una muestra del tamaño adecuado para el análisis, con las mismas
características cualitativas y cuantitativas que las del lote. Dicha toma de muestra
debe estar acompañada con los siguientes documentos:

Oficio de la empresa productora o del particular que solicita los respectivos

análisis de los lotes muestreados.

Tarjeta de identificación de la muestra en la cual se debe llenar toda la información

requerida a excepción del número de registro y el número de etiquetas
· Identificación de la bolsa (la cual contiene la muestra) con el número del lote y
del cultivar.

b) Recepción y registro de la muestra

Una vez que el técnico trae la(s) muestra(s) al laboratorio, con su respectiva
relación de muestreo, tarjeta de identificación e identificación de la bolsa, se
comprueba si los datos suministrados en la relación de muestreo coinciden con los
datos contenidos en la tarjeta; luego se coloca el número de registro
correspondiente, donde sus dos primeros dígitos indican el año en que fue
procesada la muestra y los demás dígitos indican el número de muestras
recibidas. Ejemplo: si una muestra es el número de registro 020208 quiere decir
que fue procesada en el año 2002 y es la muestra número 208 que ingresa al
laboratorio. Cuando se trata de semillas muestreadas por particulares y de semilla
fría (reetiquetada) los usuarios del servicio deben cancelar el monto establecido
previamente a la realización de los análisis. Los datos contenidos en la tarjeta de
identificación tales como: número de registro, cultivo, cultivar, productor, técnico
que realizó el muestreo, cantidad del lote, número del lote, tratamiento, se
procesan de forma manual en el Libro de Registros y de igual forma en el sistema
automatizado de etiquetado, donde se introducen estos datos en el formulario de
Identificación de la Muestra para ir almacenando la información.

Posteriormente se coloca el número de registro correspondiente en la planilla de

análisis en la cual se colocan los resultados de los análisis

c) Homogenización de la muestra

Este proceso se realiza a través de un aparato denominado homogenizador o

divisor de muestras, el cual permite obtener una muestra más homogénea del lote
muestreado. Entre los tipos de homogenizadores que se manejan en el laboratorio
se encuentran el Gamet y el Boerner. El pase por el homogenizador se realiza tres
veces para cada muestra.

d) Archivo de la muestra

Seguidamente, se envasa parte de la muestra en un frasco debidamente

identificado de 750 g de capacidad. Esta muestra se archiva y se tiene
almacenada en condiciones apropiadas de temperatura y humedad relativa por
espacio de un año, en previsión de algún nuevo análisis que se requiera de la
muestra.
e) Muestra de trabajo

La parte restante de la muestra homogenizada es la que se va a utilizar como

muestra de trabajo, a la cual se le realiza los diferentes análisis. El peso de esta
muestra depende del cultivo con que se este trabajando, ya que según lo
establecido en las reglas de la ISTA (International Seed Testing Association), para
cada cultivo existe un peso establecido, que se va a utilizar para el análisis de
pureza.

2. Realización de los análisis

El técnico de semillas evalúa la calidad de una muestra de semillas representativa

de un lote en particular, con la finalidad de verificar si cumple con los requisitos de
calidad exigidos para su comercialización y luego proceder a la entrega de
etiqueta según la categoría de semilla que pertenezca (en caso de semilla
certificada). Los análisis a determinar son:

1. Análisis físicos: humedad, pureza, determinación de otras especies y mezcla de

tipo.

1.2. Análisis fisiológicos: germinación viabilidad con tetrazolium y vigor.

1.3. Otros análisis: daños causados por insectos, daños mecánicos, semillas
manchadas por microorganismos, semillas pre germinadas y presencia de
insectos vivos y/o muertos.

De los análisis anteriormente descritos, los de humedad, pureza, mezcla de tipo

(maíz) y germinación son los análisis que oficialmente se realizan en el laboratorio
requeridos para la determinación de calidad y la impresión de las etiquetas de
certificación; los demás análisis se realizan a solicitud de las empresas
productoras o particulares que lo requieran.

Análisis Físicos

· Análisis de humedad: el objetivo de este tipo de análisis es determinar la

cantidad de agua contenida por las semillas, utilizando métodos apropiados para
ensayos de rutina. Los métodos prescritos tienen por objeto reducir la oxidación,
descomposición o pérdida de otras sustancias volátiles, y al mismo tiempo
asegurar el desprendimiento de toda el agua posible. Los métodos para la
determinación del contenido de humedad son dos: el método de la estufa (método
oficial) y el método de conductividad eléctrica (este método es más rápido y es el
que se realiza en el laboratorio).
· Análisis mezcla de tipo: el objetivo de este tipo de análisis es determinar si la
muestra y el lote de semilla de maíz presenta dimensiones homogéneas y si
corresponde con el tipo establecido. Este análisis se hace por medio del método
de los cedazos, tomando en cuenta los siguientes tipos: redondo, plano grande,
plano mediano y plano pequeño.

· Análisis de pureza: este tipo de análisis presenta dos objetivos definidos que son:
(a) determinar la composición en peso de la muestra que se analiza y, por
consiguiente, la composición del lote de semillas y (b) la identidad de las distintas
especies de semillas y de las partículas de materia inerte presentes en la muestra.

Análisis fisiológicos

· Análisis de germinación: el objetivo de este tipo de análisis es obtener

información acerca del valor de las semillas, desde el punto de vista de su siembra
en terreno de cultivo, y proporcionar resultados que permitan comparar el valor de
los diferentes lotes de semillas. El porcentaje de germinación lo determina el
porcentaje de plántulas normales.

· Análisis de viabilidad: el objetivo de este análisis es determinar el potencial de

germinación de la semilla; como esta prueba es más rápida que el del análisis de
germinación es muy solicitada para las semillas de pasto y el método que se utiliza
es el de tetrazolium.

· Análisis de vigor: este análisis tiene como objetivo determinar el potencial de

almacenamiento de las semillas y el método utilizado en el laboratorio es el de
envejecimiento acelerado (temperatura de 40° C, 100% HR durante 72 horas).
Este análisis generalmente es solicitado por las empresas importadoras de
semillas de hortalizas.

Otros análisis

Estas determinaciones se realizan como complemento al análisis de pureza; por lo

tanto son opcionales, a solicitud de los interesados. Las más usuales son:
determinación de otras especies, daños mecánicos graves, daños por insectos,
manchas por microorganismos y semillas pre germinadas.

3. Después de los análisis

Evaluación de los resultados

Luego de haberse realizado los análisis respectivos, se procede a evaluar los

resultados, tomando en cuenta los requisitos mínimos exigidos de calidad para la
semilla certificada según lo contemplado en las Normas específicas de
certificación para los diferentes cultivos (ajonjolí, arroz, caraota, fríjol, girasol,
maíz, maní, papa, sorgo y soya). Si cumple con los mismos, se procede a aprobar
el lote. Estos resultados son registrados manualmente en el libro de registros e
introducidos en el sistema automatizado en el formulario respectivo de análisis de
laboratorio

1) Semilla certificada

a) Lote aprobado

Cuando se trata de semilla certificada, si el lote es aprobado, se procede a la

impresión de las etiquetas.