Facultad de Ciencias Básicas

Programa de Química

CULTIVO Y SIEMBRA DE GALACTOMYCES GEOTRICHUM

Facultad de Ciencias Básicas, Programa de Química.

Laboratorio de Biotecnología

Resumen
En este trabajo de laboratorio se preparó un medio de cultivo compuesto por 0,6 g de glucosa, 0,6 g de
peptona, 0,6 g de agar y 0,3 g de extracto de levadura en 30 mL de agua destilada, para la siembra de
Galactomyces Geotrichum. Como resultado no se pudo evidenciar el crecimiento de dicha levadura debido a
que la temperatura de crecimiento de ésta está comprendida entre 5 y 37 °C y la temperatura del medio del
cultivo se encontraba un par de grados o más sobre el valor óptimo.
Palabras claves: Levadura, Galactomyces Geotrichum, cultivo.

INTRODUCCIÓN

MATERIALES Y EQUIPOS

 Glucosa
 Peptona
 Agar
 Extracto de levadura
 Agua destilada
 Una caja de Petri
 Parafilm Figura n. Medio de cultivo sin esterilizar.
 Equipo de autoclave
 Cabina de flujo laminar 2. Autoclave
 Mechero La mezcla se autoclavó antes de poner a crecer
las levaduras para evitar el crecimiento de
otros organismos.
METODOLOGÍA
3. Siembra de la levadura
1. Preparación del medio
Se preparó una mezcla para uso general, Esta etapa final del proceso se realizó en la cabina
diluyendo 0,6 g de glucosa, 0,6 g de peptona, 0,6 g de flujo laminar para garantizar que el aire de la
de agar y 0,3 g de extracto de levadura en 30 mL zona de trabajo estuviera libre de partículas
de agua destilada. (Figura n) contaminantes, adicionalmente a eso se prendió
un mechero dentro de la cabina.

El medio de cultivo previamente autoclavado se

dividió en tres porciones, cada una en una caja de
Petri. Se esperó cierto tiempo para que este llegase
a una temperatura apropiada.

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La técnica de siembra aplicada fue por estría
central.
Se sometió el asa al calor del mechero, luego se
introdujo a un borde el cultivo y se tomó una
pequeña cantidad de levadura, luego se movió el
asa suavemente sobre la superficie del medio en
forma de zigzag, iniciándose la estría en el borde
del medio más alejado del operador y se extendió
hasta llegar al centro de la placa, luego se giró ésta
180 º y se continuó realizando otra estría de la
misma manera. (Figura n)
Figura n. pasos para la siembra de la levadura.
4. Almacenamiento
Finalmente se procedió a cerrar la caja de Petri
cuidadosamente utilizando Parafilm para sellar
los bordes de la tapa. Y se rotuló.
DISCUSIÓN
Al desarrollar la práctica de laboratorio se preparó
un medio de cultivo para el crecimiento de los
microorganismos de interés en este caso
levaduras. En el medio de cultivo, adicionamos
agar para dar solidez, es el agente solidificante
más comúnmente utilizado. Se compone de dos
componentes, agarosa y agaropectina, que no son
degradados por la mayoría de las especies
bacterianas (Mesbah N. and Wiegel J., 2006).
También adicionamos peptona y la glucosa que
juegan un papel importante como fuente de
nutrientes para el crecimiento de la levadura
(Suhaimi H., Wang S., Bhusan D., 2015). El otro
componente de nuestro medio es el extracto de
levadura que es un medio rico que contiene, entre
sus componentes principales, un 7-9,5% de
nitrógeno orgánico, cofactores, vitaminas y
minerales. (Sánchez F., 2008)
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Realizamos los cálculos sobre 1000 mL de medio
de cultivo donde se agregaban 20 g de peptosa,
glucosa, agar, 10 g del extracto de levadura y los
convertimos sobre 30 mL de cultivo dando como
resultado 0.6 g de peptosa, glucosa, agar y 0.3 g del
extracto de levadura.
 Calculo para la peptosa, glucosa, agar.
1000 mL → 20 g
30 mL → x g
30𝑚𝐿 × 20𝑔
= 0.6𝑔
1000𝑚𝐿
 Calculo para el extracto de levadura.
1000 mL → 10 g
30 mL → x g
30𝑚𝐿 × 10𝑔
= 0.3𝑔
1000𝑚𝐿
Preparamos nuestro medio de cultivo en una caja
de Petri y lo hicimos pasar una hora por el
autoclave que maneja una temperatura de 120°C
para esterilizarlo y posteriormente agregamos un
poco de nuestra levadura tomada de una caja de
Petri con el cultivo ya terminado y la dejamos
incubar por veinticuatro (24) horas obteniendo
como resultado que nuestra levadura no creció.
Las causas para que nuestra levadura no creciera
pueden ser variables, como sobrecalentamiento
en la esterilización, mala conservación del medio y
de los diferentes compuestos, bajo porcentaje de
agar en el medio o exceso de agua, la más probable
podría ser que el medio de cultivo estaba muy
caliente luego de salir del autoclave y en el
momento de agregar nuestra levadura no
sobrevivió por la alta temperatura que aun
preservaba.
La temperatura de crecimiento de la mayoría de
las levaduras está comprendida entre 5 y 37°C. El
valor óptimo se sitúa hasta los 28°C. Sin embargo
estas temperaturas no son rigurosamente las
óptimas de crecimiento de las levaduras cuando se
encuentran en sus ambientes naturales (Villamil,
1999).

De modo general las levaduras no son

microorganismos termofílicos, sin embargo la
termodestrucción comienza desde los 52°C,
siendo las células en la fase exponencial más
sensibles que las células en la fase estacionaria
(Sarmiento, 2003).

CONCLUSIONES

REFERENCIAS

 Isolation, Cultivation and Characterization of

Alkalithermophiles. Mesbah N. and Wiegel J.
(2006).Department of Microbiology, The
University of Georgia, Athens, GA 30602-
2605,USA.
 Sánchez F., Gutiérrez-Rojas M. y Favela-
Torres E. Estudio del efecto de la relación
carbono:nitrógeno, el tipo de inóculo y la
adición de extracto de levadura en la
producción de ácido jasmónico. Revista
Iberoamericana de Micología. Volume 25,
Issue 3, Septiembre 2008, Pag 188-192.
 Sarmiento A., Herrera J. 2003. Obtención y
caracterización de un banco de levaduras con
potencial aplicación probiótica. Trabajo de
grado (Microbiología Industrial). Pontificia
Universidad Javeriana. Bogota. P 103.
 Suhaimi H., Wang S., Bhusan D. Difusividad de
glucosa en medio de cultivo celular enlaces de
autor abierto panel de superposición. Revista
de Ingeniería Química. Volumen 269 ,1 de
junio de 2015, páginas 323-327.
 Villamil Y., Zapata Y. 1999. Caracterización de
levaduras fermentadoras aisladas de frutas
en descomposición con potencial aplicación
productora de etanol. Trabajo de Grado
(Microbiología Industrial). Pontificia
Universidad Javeriana. Bogota.