You are on page 1of 4

1650966

Códigos 1650581
INFORME DE LABORATORIO TÉCNICAS DE TINCIÓN 1651058
Página 1

GUÍA # 2: TÉCNICAS DE TINCIÓN


Jerly Bianey Rodríguez Ramírez, Denis Yulieht Villamizar Pérez, Johan Sebastian Gonzalez Rodríguez

Profyerly96@hotmail.com y isagian18072209@gmail.com
jerlybianeyrr@ufps.edu.co , denisyuliehtvp@ufps.edu.co y johansebastiangr@ufps.edu.co

Resumen:

De acuerdo a la práctica realizada el día 10 de Abril aplicamos una de las técnicas de tinción, llamada tinción
de Gram, el cual se trabajó con algunas bacterias tales como: Pseudomona Aeuroginosa, DBT, Echerichia
Coli, Estafilococos, en nuestro caso, la bacteria que nos correspondió fue la Pseudomona aeruginosa , pues
esta es una especie de bacterias Gram-negativas, aeróbicas, con movilidad unipolar. De la práctica
correspondiente se recordó la manera en la que se debe manejar un microscopio correctamente, se analizó
de igual forma como pre-informe la guía de laboratorio para identificar las diferentes técnicas de tinción
teniendo algunos fundamentos básicos claros antes de la práctica.

Introducción:

Hoy en día la ciencia ha descubierto una gran variedad de bacterias que se encuentran inmersas en nuestro
medio, especialmente la microbiología se ha encargado de analizar y profundizar más el mundo de los
microorganismos, las bacterias de por sí son difíciles para ser vistas en los microscopios, es por ello que se
emplean algunas estrategias para facilitar a los científicos y microbiólogos su estudio, por esta razón se ha
utilizado métodos de coloración, para diferenciarlas del medio que las rodea, los colorantes también nos
ayudan a distinguir los diferentes tipos de bacterias y sus componentes celulares. Ahora, otro aspecto a
resaltar es que debemos tener claro que hay colorantes que se encuentran cargados positivamente y se
adhieren a los constituyentes celulares que están cargados negativamente, en este caso de la práctica
nuestra trabajamos con bacterias que se encuentran cargadas negativamente y por esta razón empleamos la
tinción de Gram, el cual se trabaja con el colorante catiónico cristal violeta (carga positiva) va a permitir que
se adhiera a la bacteria Pseudomona aeruginosa (carga negativa) a sus constituyentes celulares; un reactivo
que empleamos fue el yoduro de potasio, que sirve como fijador para matar al tejido provocando el menor
daño posible. El Lugol o solución de Lugol es una solución de yodo diatómico|I2 (1%) en equilibrio con yoduro
de potasio KI (2%) en agua destilada. Fue nombrada en honor al médico francés Jean Guillaume Auguste
Lugol, este producto se emplea frecuentemente como desinfectante y antiséptico, para cubrir deficiencias de
yodo, y para la desinfección de agua en emergencias. En microbiología, es empleado en la tinción de Gram
para retener el colorante cristal violeta. Este reactivo reacciona con algunos polisacáridos como los almidones,
glucógeno y ciertas dextrinas, formando un complejo de color diferente ( negro, azul, verde ) según las
ramificaciones que presente la molécula.

El yoduro de potasio es agregado para aumentar la solubilidad del yodo diatómico por formación del anión
triatómico I3-.De igual forma se emplearon otros colorantes que permitieron la visualización de las bacterias y
que posteriormente será explicado. Algunas de las técnicas mencionadas en la guía de laboratorio de
microbiología son: Tinción de endosporas, tinción de ácido- alcohol, tinción simple, tinción de Gram y tinción
de esporas, cada una delas anteriores técnicas permiten la visualización de las estructuras y componentes
celulares de los microorganismos, especialmente de las bacterias.

Así que, como podemos observar la finalidad de la práctica fue realizar las técnicas de tinción adecuadas para
la identificación bacteriana, en este caso como mencionamos anteriormente observamos cuatro tipos de
bacterias, pasando por cada equipo de trabajo para observar las morfologías de estas. Como ingenieros
1650966
Códigos 1650581
INFORME DE LABORATORIO TÉCNICAS DE TINCIÓN 1651058
Página 2

ambientales es importante identificar las bacterias para asegurar que una empresa de alimentos esté
brindando el mejor trato y procesos de higiene a los productos que comercializa, para así garantizar una
buena alimentación a los clientes quienes lo consumen, generando un saneamiento a sus medios de trabajo
brindando la orientación e ideas que procuren el bienestar de las personas.

Procedimiento:

TINCIÓN DE GRAM

1. Como primer paso, tomamos un portaobjeto, le agregamos una gota de solución salina o agua
destilada (como sucedió en la práctica) en todo el medio del portaobjeto.

2. Tomamos con la ayuda del asa bacteriológica una colonia de Pseudomona aeruginosa, y hacemos
un frotis con la gota esparcida.

3. Esperamos un momento para que la muestra se seque.

4. Flameamos con el objetivo de que los microorganismos se adhieran al portaobjeto.

5. Agregamos Cristal violeta, esperando un minuto para que realice su efecto (dar color a la muestra)

6. Lavamos después de un minuto para quitar el exceso de colorante

7. Cubrimos el frotis con Lugol, esperando 60 minutos (sirve como fijador, también para retener el
colorante cristal violeta. Este reactivo reacciona con algunos polisacáridos como los almidones,
glucógeno y ciertas dextrinas). Lavamos con agua para quitas su exceso.

8. Cubrimos el frotis con el colorante safranina, esperando su efecto de 60 segundos, y de igual manera
lavamos.

9. Secamos al aire libre, durante 5 minutos mas o menos, para que pueda ser trabajado y utilizado en el
microscopio. Antes de ello se colocó el cubreobjetos para mayor seguridad de la muestra.

10. Hicimos las respectivas observaciones de la preparación de la muestra y además pudimos apreciar
las muestras de los otros compañeros.

RESULTADOS

Aquí se muestran las imágenes de lo observado en un lado de los portaobjetos se muestra el


microorganismo los cuales se tiñeron y se paso a la observación en el microscopio donde podemos
apreciar las diferentes colonias .
1650966
Códigos 1650581
INFORME DE LABORATORIO TÉCNICAS DE TINCIÓN 1651058
Página 3

Conclusión:

Evidentemente, no aplicamos todas las técnicas de tinción, más sin embargo aprendimos la “Técnica de
tinción de Gram”, donde aplicamos la preparación de un frotis y seguimos el procedimiento para la tinción de
Gram, adquirimos los fundamentos básicos que se deben tener sobre los colorantes, como ingenieros leímos
y consultamos para expandir más nuestros conocimientos, y así obtener conceptos más completos y precisos.
Identificamos además la morfología bacteriana gracias a la técnica ejecutada. También recordamos el uso que
debemos darle al microscopio y por último observamos las morfologías y las diferencias que hay entre ellas.
Un dato a resaltar es que la Pseudomona aeroginosa es considerada como un patógeno oportunista en
humanos y también en plantas.

Bibliografía:

http://elprofedebiolo.blogspot.com.co/2010/01/tecnicas-de-tincion.html

https://es.wikipedia.org/wiki/Pseudomonas_aeruginosa

http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0187-893X2013000100006
1650966
Códigos 1650581
INFORME DE LABORATORIO TÉCNICAS DE TINCIÓN 1651058
Página 4

You might also like