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2017
DETERMINACIÓN DEL NÚMERO DE COLIFORMES TOTALES, COLIFORMES
FECALES Y ESCHERICHIA COLI
ÍNDICE
Página
Resumen……………………………………………………………………………3
Objetivos……………………………………………………………………………4
Introducción...………………………………………………………………………5
Método – Procedimiento……………………………………………………………6
Resultados…………………………………………………………………………..8
Conclusiones………………………………………………………………………..9
Recomendaciones…………………………………………………………………...10
Referencia bibliográfica…………………………………………………………….14
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DETERMINACIÓN DEL NÚMERO DE COLIFORMES TOTALES, COLIFORMES
FECALES Y ESCHERICHIA COLI
RESUMEN
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DETERMINACIÓN DEL NÚMERO DE COLIFORMES TOTALES, COLIFORMES
FECALES Y ESCHERICHIA COLI
OBJETIVOS
Objetivo específico:
Objetivos generales:
Demostrar la presencia de coliformes en la calidad de agua del acuario
proveniente de la FOPCAA.
Conocer el medio donde se desarrollan los colifores totales, colifores fecales y
E. coli
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DETERMINACIÓN DEL NÚMERO DE COLIFORMES TOTALES, COLIFORMES
FECALES Y ESCHERICHIA COLI
INTRODUCCIÓN
La calidad del agua se define como: el conjunto de caracteres físicos químicos y
biológicos que deben satisfacerse con el fin de que el agua que se suministra sea segura
para el fin destinado.
Para que el agua sea de calidad potable debe de reunir ciertos factores:
a) Físicos. Color, olor, sabor, temperatura, conductividad específica, sólidos, pH.
b) Químicos. Alcalinidad, metales, nutrimentos, sulfatos, OD (Oxígeno Disuelto), DBO
(Demanda Bioquímica de Oxígeno).
c) Biológicos. El método microbiológico para detectar la presencia de microorganismos
coliformes en el agua contempla tres fases: Prueba Presuntiva, Prueba Confirmativa,
Prueba Completa.
Los parámetros físico-químicos dan información extensa de la naturaleza de las
sustancias químicas del agua y sus propiedades físicas, sin aportar información de su
influencia en la vida acuática; los métodos biológicos aportan esta información pero no
señalan algo acerca del contaminante o contaminantes responsables.
La determinación de microorganismos indicadores de contaminación fecal permite
poner de manifiesto que el agua, ha sido contaminada con materia fecal y su posible
transmisión de enfermedades causadas por organismos enteropatógenos (bacterias que
viven y se desarrollan en la cavidad entérica –intestino grueso- de animales de sangre
caliente).
La definición generalmente aceptada para el término “coliformes” describe a estos
microorganismos como bacilos Gram negativos, no esporulados, aerobios o anaerobios
facultativos que fermentan la lactosa con producción de ácido y gas, aunque algunos
pueden ser fermentadores tardíos o no fermentadores, como Citrobacter y Serratia,
respectivamente. La mayoría de los coliformes pueden encontrarse en la flora normal
del tracto digestivo del hombre o animales, por lo cual son expulsados especialmente en
las heces, por ejemplo Escherichia coli. Por esta razón, su presencia constante en la
materia fecal, los coliformes son el grupo más ampliamente utilizado en la
microbiología de alimentos como indicador de prácticas higiénicas inadecuadas. Como
los coliformes también pueden vivir en otros ambientes, se distingue entre coliformes
totales y coliformes fecales. Esta práctica se refiere a coliformes totales.
El uso de los coliformes como indicador sanitario puede aplicarse para: • La detección
de prácticas sanitarias deficientes en el manejo y en la fabricación de los alimentos. • La
evaluación de la calidad microbiológica de un producto, aunque su presencia no
necesariamente implica un riesgo sanitario, cuando los coliformes son de origen no-
fecal. • Evaluación de la eficiencia de prácticas sanitarias e higiénicas en el equipo. • La
calidad sanitaria del hielo y los distintos tipos de agua utilizados en las diferentes áreas
del procesamiento de alimentos.
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FECALES Y ESCHERICHIA COLI
MÉTODO
Unidades de análisis:
Se trabajó con materiales y equipos del laboratorio, para su reconocimiento e
introducción al manejo de estos. Las muestras fueron obtenidas de casa, tienda,
panadería; obtenida por los alumnos.
Método de trabajo:
Método del Numero Más Probable (NMP) con 9 tubos.
Materiales:
- Tubos de ensayo
- Campana de Durham
- Caldo lactosado bilis verde brillante (caldo BRILA)
- Caldo Triptona
- Encendedor.
- Mechero de Bunsen.
- Pipetas graduadas.
- Gradilla para tubos de ensayo.
- Estufa de 37°C
- Estufa de 45°C
- Agua de acuario de la FOPCAA
Procedimiento:
1.- Primero se cerró las ventanas del laboratorio de microbiología, se desinfectó la mesa
de trabajo con alcohol, y se encendio el mechero.
2.- En la gradilla tenemos un total de 12 tubos de ensayo lo cuales usaremos primero 3
tubos para preparar SSP esteril.
3.- Consecutivamente se extrajo 1ml del agua de acuario al primer tubo y se considera
como 10-1, agitamos fuertemente y se lleva 1ml a otro tubo se considera 10 -2 hasta el 10-
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FECALES Y ESCHERICHIA COLI
4.-Para este prueba tomamos primero alícuotas de 1ml del tubo 10-1 para llevarlo a 3
tubos por dilución con 9ml de caldo lactosado bilis verde brillante (caldo BRILA) y se
homogenizo cada uno.
5.- Consecutivamente se extrajo alícuotas de 1ml del tubo 10-2 para llevarlo a otros 3
tubos con 9ml de caldo lactosado bilis verde brillante (caldo BRILA) y se homogenizo
cada uno.
6.- Y finalmente se extrajo alícuotas de 1ml del tubo 10-3 para llevarlo a otros 3 tubos
con 9ml de caldo lactosado bilis verde brillante (caldo BRILA) y se homogenizo cada
uno.
5.- Por último, en una lata se colocan los 9 tubos con caldo BRILA y campana de
Durham y se envuelve en papel kraft y ligas debidamente rotuladas; se incubo a la
estufa a 37°C durante 48 horas.
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RESULTADOS
- De los 9 tubos solo pudimos observar que en uno de los tubos con dilución de
10-1 caldo Brila había más del 20% con gas en la campana Durham.
Figura 06. Sembrado de un tubo de 10-1 en dos tubos (caldo Brila y otro
caldo Triptona).
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CONCLUSIONES
En los resultados se observa que las unidades de formación de colonias va de
forma creciente en el siguiente modo: 10-3, 10-2, 10-1 de las disoluciones. Siendo
esta la forma correcta, porque se supone que el número es mayor de éstos es en
la disolución 10-1 por no tener más que una disolución, y el menor 10-3 por tener
varias disoluciones.
Los resultados son los siguientes:
Disolución 10-1 (A, B, C) = 1 tubo con más de 20%
Disolución 10-2 (A, B, C) = 0
Disolución 10-3 (A, B, C) = 0
El agua de acuario en la primera etapa hubo presencia de coliformes en un tubo
de ensayo con dilución 10-1 y en la segunda etapa ya no hay presencia en un tubo
de gas ni en el otro hay cambio de color al echar reactivo de kovacs, por lo tanto
solo hay presencia de coliformes pero no de E.coli
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RECOMENDACIONES
Se rotula todos los materiales de vidrio a utilizar, para evitar equivocaciones y
saber cuál es cual.
Todas las diluciones se trabajan con diferentes pipetas para que éstas tengan
diferentes cantidades.
Todos los procedimientos se deben realizar cerca al mechero (ambiente estéril),
para así obtener resultados confiables.
Desinfectar bien la mesa de trabajo con alcohol, cerrar todas las ventanas y lavar
nuestras manos para que ningún microorganismo exterior afecte nuestra prueba a
realizar.
Al momento de realizar la prueba utilizar todos los materiales previamente
esterilizados.
Cuando se estén realizando las pruebas seguir todos los procedimientos paso a
paso para luego obtener un efectivo y correcto resultado.
REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA
file:///C:/Users/pc/Downloads/619.pdf
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Tecnic-Basicas-Coliformes-en-
placa_6528.pdf
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