Nombre: MAX VERA FLORES

Metodología
Desinfección del tejido

Las raíces fueron lavadas con Se seleccionaron las diez raíces laterales
agua potable para retirar el suelo más engrosadas, se cortaron en fragmentos
adherido de aproximadamente 5 cm.

Se pesarán 5 g y se depositarán en frascos de 500 mL de capacidad, con tapa,

previamente esterilizados, se lavarán con 50 mL de agua destilada más detergente
neutro 0,005% por 1 minuto. Luego se enjuagó por cuatro veces consecutivas con agua
destilada esterilizada (1 minuto por enjuague).

Después, se agitó por 15 minutos en Se sometió a inmersión por 1 minuto en

solución tampón de fosfato de potasio alcohol 70%
0,05molL-1, pH 7,0
Se agitó por 5 minutos en solución de A continuación, el tejido fue llevado a nuevos
hipoclorito de sodio (NaClO) 5% más Tween frascos previamente esterilizados.
80%.

Pasó por inmersión en alcohol 70% por 1 minuto, seguida por agitación por 15 minutos en solución
tampón y finalmente, se lavó cuatro veces con agua destilada esterilizada.

Verificación de la desinfección

Para confirmar la desinfección de la

superficie de las raíces se tomó alícuota
del último lavado y se sembró en agar
nutritivo, después se incubó a 30ºC, por
48 horas.

Siembra y aislamiento

El tejido desinfectado, se depositó en papel Una vez secado, el tejido se llevó a bolsas de
secante para eliminar el exceso de polietileno de 16x15 cm
humedad.
 Posteriormente fue macerado. Se obtuvo el macerado.

Con una jeringa de tuberculina, se extrajo Se procedió a sembrarse en medios semisólidos

el macerado. sin nitrógeno NFb, LGI, JNFb, LGI-P y JMV.

Se incubaron a 30±2°C por 7 días. Pasado los 7 días se observó crecimiento por la formación de
película blanquecina bajo la superficie y el viraje del indicador.

Se siguió el mismo procedimiento de Bacterias Rizosféricas Fijadoras de Nitrógeno.

Resultados
Debido a que paso mucho tiempo en incubación, los medios se contaminaron
con hongos.

Bibliografía
Altamirano C, Carreño, Plasencia V, Ramírez L, Silva J, Ugaz. Bacterias rizosféricas y
endófitas fijadoras de nitrógeno. Perú: Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo; 2014.